Способ определения количества
О Il И С А Н И Е 388007
ИЗОБРЕТЕН ИЯ
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ
Союз Советских
Социалистических
Республик
Зависимое от авт. свидетельства №вЂ”
Заявлено 23.711.1971 (№ 1690887/28-13} с присоединением заявки №вЂ”
Приоритет—
Опубликовано 22.V1.1973. Бюллетень ¹ 28
Дата опубликования описания 4.1Х.1973
М. Кл, С 07g 7/026
Комитет по делам
УД К 577. 15. 08 (088.8} изобретений и открытий при Совете Министров
СССР
Авторы изобретения
Заявитель
Н. П, Пятницкий, И. Н. Пятницкая и Г. С. Трусова
СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ КОЛИЧЕСТВА
СЫЧУЖНОГО ФЕРМЕНТА И ПЕПСИНА
В СМЕШАННОМ ПРЕПАРАТЕ
Известен способ определения количества сычужпого фермента и пепсина в смешанном препарате путем нахождения суммарного количества двух ферментов (сычужного и пепсина) Tlo скорости свертывасчия молочно-ацетатной смеси при рН 5,0 с последующим количественным определением каждого из ферментов
Цель изоорстеиия — повышение точности определения, Это достигается тем, что определен»не количества пспсипа осуществляют параллельно с определением суммы двух ферментов путем разведения смешанного препарата, например, водой до общей концентрации ферментов по молочно-ацетатной смеси 10 — 12 лкг/лл и определения белокпереваривающей силы полученного раствора при рН 1,45 — 1,5.
Пример. Производят анализ препарата
«сычужного порошка», активность которого по натуральному молоку составляет 100000 условных ед/г, Этот препарат в количестве 1 г растворяют в дистиллированной воде и определяют .активность по молочно-ацетатной смеси при рН 5,0 и температуре 25 С за
90 сек.
Эталонный раствор пепсина, содержащий
0,08 лг чистого свиного пепсина в 1 лл, створаживает 5 лл молочно-ацстятной смеси зя
75 сек.
Следовательно, в 1 лл испытуемого раствора содержится 0,0бб лг чистого фермента
0,08.75
90 я в 1 г этого препарата — 6,6 л .
10 разводят испытусмьш раствор дист»ллированной водой в б раз (1:5), т. е. до конценTряции молочно-ацстатной смoc» 11 лкг/лл. Берут полученный после разведения раствор v количестве 0,2 лл и добавляют к 1.5 л.1 2"„.—
15 ного раствора гемоглобина (рН 1,15 — 1,50).
Инкубация смеси проводится ир» 35,5 С в течение 10 лин
20 Реакция останавливается путем добавлен»я
2 лл 0,3 М трихлоруксусной к»слоты. -1срез
5 — 10 лин смесь фильтруют через бума>кнь»1 фильтр и оптическую плотность фильтрят» определяют на спектрофотомстрс»p»
25 280 .члк (0,330) .
Параллельно с опытом ставится ко»трель, при котором раствор фермента дооявляют к субстрату после предварительного добявлсз0 ния к нему три iëîðóêoóñíîé кислоты (0,250), 388007
Предмет изобретения
Составитель Г. Субботина
Редактор О. Юркова Техред Г. Грачева Корректор О, Тюрина
Заказ 5876 Изд. № 1662 Тираж 523 Подписное
ЦНИИПИ Комитета по делам изобретений и открытий при Совете Министров СССР
Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5
Череповецкая городская типография
Величину коэффициента поглощения контроля вычитают из величины коэффициента поглощения опыта (0,330 — 0,250), и полученньш результат (0,080) позволяет найти концентряци1о пепсина в испытуемом препарате по калибровочной кривой, построенной по эталонным растворам (от 2 до 20 лкг чистого пепсиня B 1 л1).
Коэффициент оптического поглощения 0,080 соответствует содержанию пепсина в испытуемом растворе 0,008 лг/1Llli а в неразведенном — 0,048 лг/лл.
Таким ооразом, испытуемый препарат является смешанным с содержанием пепсина
4,8 лг, а сычужного фермента 1,8 лг в 1 г препарата.
Способ определения количества сычужного фермента и пепсина в смешанном препарате
5 путем нахождения суммарного количества двух ферментов (сычужного и пепоина) по скорости свертывания молочно-ацетатной смеси и ри р Н 5,0 с последующим количественным определением каждого из ферментов, от1Q личаюи ийсл тем, что, с целью повышения точности определения, определение количества пепсина осуществляют параллельно с определением суммы двух ферментов путем разведения смешанного препарата, напри мер, водой до общей концентрации ферметов по молочно-ацетатной смеси 10 — 12 лкг/лл и определения белокпереваривающей силы полученного раствора и ри р Н 1,45 — 1,5.
