Способ экспрессной диагностики холерных вибрионов

(1

Г %. .:,ю

О П И С АН И Е

ИЗОБРЕТЕНИЯ

Союз С©ветскик

Социалистических

Республик "> 371804

К АВТОРСКОМУ СВ ЕТЕЛЬСТВУ (61) Дополнительное к авт. саид-ву (22) Заявлено 0806.71 (21) 1671202/31-16 с присоединением заявкм М(23) ПриорнтетОпубликовано 07.10.81. Ькзллетемь Н9 37

Дата опублнкованмя оммсанмя 07.10.8.1 (53)M. Кл 3

С 12 Я 1/04

Государственный комитет

СССР но делам изобретений н открытий (53) УДК 576. 8. 078 (088. 8) (72) Авторы изобретения

tO.N. Ломов и S.Л. Иазрухо (71) Заявитель (54) СПОСОБ ЭКСПРЕССНОЙ ДИАГНОСТИКИ ХОЛЕРНЫХ

ВИБРИОНОВ

Находящиеся в исследуемом материале холерные вибрионы при своем дви.жении сталкиваются с эритроцитаья, сенсибилизированными специфическим гамма-глобулином, и прикрепляются к ним. Адсорбировавшиеся вибрионы, пытаясь оторваться от эритроцита; совершают при этом резкие, типичные для вибрионов, движения и увлекают за собой эритроциты.

Изобретение относится к медицине.

Известен способ экспрессной диагностики путем нанесения материала, содержащего ьякроорганизмы, на предметное стекло, добавления эритроцитов, сенсибилизированных специфическим гамма-глобулином, и визуального учета реакции.

Однако обнаружить холерные вибрионы укаэанным способом можно только в чистой культуре, при наличии посторонней подвижной микрофлоры диагностика невозможна.

Целью изобретения является разработка способа, позволяющего иденти- 15 фицировать холерные вибрионы в присутствии посторонней микрофлоры без выделения чистой культуры.

Достигается это тем, что учет результатов реакции проводят под фа- 20 зово-контрастным микроскопом по наличию специфической реакции антигенантнтело, морфологии и подвижности вибрионов.

Пример. Готовят препарат лиофилизированных формализированных эритроцитов барана, не сенсибилизированных (контрольных) и сенсибилиэированных гамма-глобулином, выделенным из холерной О-сыворотки (опытных).

На предметное стекло наносят петлей диаметром 4 мм каплю 0,5В-ной взвеси в физиологическом растворе зритроцитов, сенсибилизированных специфическим газала-глобулином. В каплю эритроцитов вносят петлю исследуемого материала (нативные испражнения, вода, пленка с первого пептона), перемешивают и покрывают стеклом.

На этом же стекле ставят контроль, который представляет собой раздавленную каплю из смеси контрольных эритроцитов и исследуемого материала.

Подготовленный препарат помещают во влажную камеру при 37 С на 10 змн, а затем просматривают под микроскопом, используя ф азово-контрастное устройство.

371804

Формула изобретения

Техред А. Вабинец

Корректор М. Коста

Редактор Е. Месропова тираж 531 .Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская. наб., д. 4/5

Заказ 8642/49

Филиал ППП "Патент", r. Ужгород, ул. Проектная, 4

При обнаружении 2-3 подвижных эритроцитов с адсорбировавшимися на них вибрионами дают заключение о наличии в исследуемом материале холерных вибрионов.

Заключение основывают на совокупности трех признаков: наличие специфической реакции антиген-антитело, морфология вибриона, подвижность вибриона.

В контрольном препарате обнаруживают эритроциты, спокойно плывущие

BQ взвешенном состоянии или неподвижные. Холерные вибрионы или посторонние бактерии, сталкиваясь с несен сибилизированными эритроцитами, не адсорбируются на них.

Чувствительность предлагаемого способа при исследовании нативных нефильтрованиых испражнений, зараженных холерными вибрионами, 1 мпн. микробных клеток в 1 мл. Результаты анализа с помощью предлагаемого способа получают через 10-15 мин от начала исфтедования подозрительного материала.

С первой пептонной воды холерные вибрионы обнаруживают предлагаевим способом через 6 ч при наличии в посевной дозе испражнений 1000 микробных клеток. В воде холерные вибрионы обнаруживают при концентрации

100 тысяч микробных клеток в 1 мп.

При подращивании чувствитель-ность повыаается.

Препарат лиофилизированных эритроцитов, сенсибилизнрованных гаммаглобулином, может храниться в течение полутора лет при 4О С без снижения активности.

Способ экспрессной диагностики холерных вибрионов путем добавления к . сследуемому материалу эритроцитов, сенсибилизированных специфическим гамма-глобулиноы, о т л и ч а20 ю шийся тем, что, с целью идентификации холерных вибрионов в присутствии посторонней микрофлоры, учет результатов реакции проводят под фазовоконтрастным микроскопом я5 «пс наличию специфической Реакции антиген-антитело, морфологии и подвижности вибрионов.