Способ определения серотонина в биологических жидкостях

Авторы патента:

G01N33/50 - химический анализ биологических материалов, например крови, мочи; испытания, основанные на способах связывания биоспецифических лигандов; иммунологические испытания (способы измерения или испытания с использованием ферментов или микроорганизмов иные, чем иммунологические, составы или индикаторная бумага для них, способы образования подобных составов, управление режимами микробиологических и ферментативных процессов C12Q)

4 т .-.ъ.. >p ю?т

0пНСАННЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

33l3l2

Союз Советских

Социалистических

Республик

Зависимое от авт. свидетельства №

Заявлено 21.! 1/.1970 (№ 1428560/31-16) с присоединением заявки №

Приоритет

Опубликовано 07.111.1972. Бюллетень № 9

Дата опубликования описания 17.IV.1972

М. Кл. G 01п 33/16

Комитет по делам изобретений и открытий ори Совете Министров

СССР

УДК 616-008.84(088.8)

612. 129 (088.8) Авторы изобретения

Ю. А. И. Плюшкис и Б. К. Тваска

Заявитель

Научно-исследовательский институт экспериментальной и клинической медицины

СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СЕРОТОНИНА

В БИОЛОГИЧЕСКИХ ЖИДКОСТЯХ

Изобретение относится к биохимии и касается способа определения серотонина в биологических жидкостях.

Известны способы определения серотонина в биологических жидкостях, например, в плазме, путем перевода его в органическую фазу из тканевого гомогената, промывания, перевода в водную фазу и спектрофлуориметрирования. Эти способы, однако, недостаточно чувствительны и не исключают ошибок определения.

Целью изобретения является увеличение чувствительности и точности метода. Это достигается тем, что серотонин из тканевого гомогената непосредственно переводят в органическую фазу, а в качестве органического растворителя применяют гептиловый спирт.

Для выполнения анализа в центрифужную пробирку с 0,5 мл 3%-ного раствора трилона берут из локтевой вены 5 мл крови и осторожно перемешивают. Для подсчета тромбоцитов крови в лейкоцитарный меланжер набирают кровь до метки 0,5 и до метки 11 3 /с-ный раствор солянокислого кокаина. Кровь центрифугируют при 45 g и 0 вЂ” 5 С в течение 5 мин, 2 мл надосадочной плазмы с тромбоцитами переносят в другую пробирку, из которой аналогично забирают плазму в меланжер для подсчета тромбоцитов. Подсчет проводят через

1 вЂ” 3 час после взятия крови или плазмы.

Прп определетши серотонина в тромбоцптах отделенную плазму центрифугируют при

1600 g и 0 вЂ” 5 С в течение 20 лгин и сливают надосадочную плазму в другую пробирку.

Осадок тромбоцитов (или 2 мл плазмы в случае определения серотонина в плазме) быстро охлаждают до минус 40 С, оставляют на 3вЂ”

6 дней и оттаивают. Процедуру замораживания и оттаивания повторяют еще раз, после чего к 2 мл плазмы пли к осадку тромбоцитов добавляют бпдистиллпрованную воду до 4 мл, перемешивают и прибавляют 4 мл боратного буферного раствора (рН 10,0). Смесь насыщают поваренной солью и добавляют 12 лгл гептилового спирта. После перемешивания в течение 10 мин пробирки центрпфугируют прп

1600 g в течение 10 мин, 10 .ил орган ..ческой фазы переносят в другую пробирку с 1,2 мл

О,1 н. соляной кислоты, встряхивают 5 мин и центрифугируют при 36 g в течение 10 мин.

В кювету с 1 м г 6 н. соляной кислоты добавляют 1,0 мл водной фазы. Флуориметрпрование проводят при максимуме спектра возбуждения 295 ммк и сканнировании спектра флуоресценции (максимум при 540 It1tK) на флуоресцентном спектрофотометре. Одновременно анализу подвергают 0,5 мнг серотонпна, 4 мл бидистиллированной воды и I мл надосадочной плазмы без тромбоцитов с добавлением

30 0,5 миг серотонина в качестве внутреннего

331312

Предмет изобретения

Составитель В, Таратута

Техред 3, Тараненко

Корректор E. Исакова

Редактор Д. Пинчук

Заказ 919/11 Изд. № 342 Тираж 448 Подписное

ЦНИИПИ Комитета по делам изобретений и открытий при Совете Министров ССС1

Москва, 7К-35, Раушская наб., д. 4/5

Типография, пр. Сапунова, 2 стандарта. Неспецифическую флуоресценцию реактивов вычитают. Для внесения добавочной поправки на неспецифическую флуоресценцию в кювету с исследуемым раствором добавляют каплю концентрированной перекиси водорода и после смешения смесь повторно сканнируют. Измерение интенсивности флуоресценции плазмы без тромбоцитов и внутреннего стандарта позволяет определить содержание серотонина в исследуемой плазме или осадке тромбоцитов. При подсчете тромбоцитов в крови и плазме можно полученный результат пересчитать на концентрацию.

Способ определения серотонина в биологических жидкостях, например, в плазме, путем перевода его в органическую фазу из тканевого гомогената, промывания, перевода в водную фазу и спектрофлуориметрирования, отлича ощийся тем, что, с целью увеличения чувствительности и точности метода, серотонин из тканевого гомогената непосредственно переводят в органическую фазу, а в качестве органического растворителя применяют гептиловый спирт.

Оксигемограф // 283670

Электрохимический датчик для измерения напряжения кислорода в потоке жидкости'?наяliaf // 277290

Способ количественного определения углеводородов в содержащих их продуктах // 265041

Устройство для биохимического анализа крови // 254136

Способ определения севина в биологическихобъектах // 250536

Способ определения в почве малых количествгербицидов // 246915

Оксигемометр // 163784

Патент 162626 // 162626

Способ качественного определения сарколизина и продуктов его гидролиза в крови и солевом водном растворе // 142075

Способ определения галактозы в сыворотке крови // 2101705

Изобретение относится к биохимии и ветеринарии и касается способа определения гексоз, например галактозы, в сыворотке крови для ранней диагностики нарушений минерального обмена

Способ определения мочевины и креатинина в биологических жидкостях // 2101706

Изобретение относится к медицине и касается видов патологии или состояний организма, связанных с нарушениями азотистого обмена, особенно при различных видах почечной патологии, обширных хирургических ранах, ожогах

Способ прогнозирования течения ишемической болезни сердца // 2102756

Изобретение относится к медицине и может быть использовано в кардиологии, терапии

Способ оценки состояния больного // 2103692

Изобретение относится к медицине, а именно к клинической биохимии и может быть использовано для диагностики и прогнозирования состояния больного в послеоперационном периоде и при развитии острого воспалительного процесса

Способ прогнозирования продолжительности жизни онкологических больных четвертой стадии заболевания после диагностических хирургических вмешательств // 2104536

Изобретение относится к медицине, в частности к онкологии, и может быть использовано при проведении больным с неблагоприятным прогнозом адъювантных методов терапии

Способ диагностики сахарного диабета // 2104537

Изобретение относится к медицине, в частности к эндокринологии, и может быть использовано для проведения дифференицальной диагностики инсулинзависимого и инсулиннезависимого диабета, состояния их компенсации

Способ прогнозирования цирроза печени у больных с хроническими диффузными заболеваниями печени // 2104538

Изобретение относится к медицине, а именно гепатологии, и предназначено для прогнозирования цирроза печени у больных с хроническими диффузными поражениями органа

Способ оценки микросомальной системы печени при действии ксенобиотиков алкилирующего типа // 2104539

Изобретение относится к области исследования или анализа материалов особыми способами, а именно к способам исследования крови при действии ксенобиотиков, и может быть использовано для оценки микросомальной системы печени после воздействия малых доз иприта и люизита при реальных путях поступления ОВ (отравляющих веществ) в организм, а также при решении задач по уничтожению ХО (химического оружия) в районах военно-химических объектов, в частности по обследованию здоровья населения и обслуживающего персонала в местах по хранению и уничтожению ХО

Прибор для мониторинга параметров взвешенных частиц // 2106627

Изобретение относится к оптико-электронной промышленности и может быть использовано для комплексного исследования параметров взвеси частиц микронных и субмикронных размеров (10-8 - 10-4 м): распределения частиц по группам с определенными размерами, химического состава частиц, скоростей изменения этих характеристик

Способ лечения ишемической болезни сердца // 2107910

Изобретение относится к медицине, в частности, к кардиологии, и может быть использовано для лечения любых клинических вариантов ишемической болезни сердца