Способ прогнозирования течения хронических заболеваний печени

 

Изобретение относится к медицине, в частности гематологии и иммуногенетике, может быть использовано в диагностике и прогнозе течения хронических заболеваний печени. Целью изобретения является снижение травматичности, трудоемкости и повышение точности прогнозирования хронических поражений печени. Сущность: указанная цель достигается тем, что определяют HLA - генетические маркеры и тип гаптоглобина. При установлении HLA - фенотипе антигена В8 в сочетании с определяют прогрессирующее течение патологического процесса. Использование предлагаемого способа повышает точность прогнозирования хронических поражений печени. 3 табл,

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (я)л G 01 N 33/53

ГОСУДАРСТВЕННОЕ ПАТЕНТНОЕ

ВЕДОМСТВО СССР (ГОСПАТЕНТ СССР) (21) 4874123/14 (22) 15.10.90 (46) 07.03.93. Бюл. N 9 (71) Всесоюзный научный центр радиационной медицины АМН СССР (72) А.А.Чумак, Ж.Н.Минченко, Е.А.Дмитренко, В.В,Талько и Д.М.Якименко (56) Авторское свидетельство СССР

М 1421309, кл. А 61 В 10/00, 1986. (54) СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ ТЕЧЕНИЯ ХРОНИЧЕСКИХ ЗАБОЛЕВАНИЙ ПЕЧЕНИ (57) Изобретение относится к медицине, в частности гематологии и иммуногенетике, Изобретение относится к медицине, в частности — гематологии и иммуногенетике, может быть использовано в.диагностике и прогнозе течения хронических заболеваний печени.

Цель изобретения — снижение травматичности, трудоемкости и повышение надежности прогнозирования за счет определения иммуногенетических маркеров.

Поставленная цель достигается тем, что проводят злектрофорез сыворотки крови и определяют тип гаптоглобина, проводят . HLA-типирование и по носительству генетического маркера Hp 2-2 в сочетании с наличием антигена HLA В8 судят о прогрессировании течения заболевания, В табл, 1 приведен сравнительный анализ существенных отличий .заявляемого . объекта и прототипа.

5Ц 1800365 А1 может быть использовано в диагностике и прогнозе течения хронических заболеваний печени. Целью изобретения является снижение травматичности, трудоемкости и повышение точности прогнозирования хронических поражений печени. Сущность: укаэанная цель достигается тем, что определяют HLA — генетические маркеры и тип гаптоглобина. При установлении HLA — фенотипе антигена В8 в сочетании с Hp 2-2 определяют прогрессирующее течение патологического процесса. Использование предлагаемого способа повышает точность прогнозирования хронических поражений печени, 3 табл, Как видно иэ табл, 1, общими являются пп, 2, 3, 4, Пп. 10 — 13 отражают положительный эффект, заключающийся в снижении трудоемкости, а и. 1 — снижение травматичности, Способ осуществляют следующим образом, У больного берут кровь иэ венй в количестве 5 мл, из которых 4,5 мл — на гепарине, 0,5 мл — в сухую пробирку, Из гепариниэированной крови центрифугированием в градиенте плотности фиколл-верографина выделяют лимфоциты, отмывают их дважды раствором Хенкса, доводят конечную концентрацию до 1 млн. клеток в 1 мл, В лимфацитотоксическом тесте устанавливают фенотип по HLA локусам А, В, С. 0,5 мл крови центрифугируют, отбирают 40 мкл сыворотки. Проводят злектрофорез в полиакриламидном геле и определяют тип гаптоглобина.

1800365

При определении в фенотипе HLA антигена В8 в сочетании с Hp 2-2 прогнозируют вероятность тяжелого течения хронического заболевания печени.

В табл, 2 и 3 приведены примеры иммуногенетического обследования пациентов с хроническими заболеваниями печени. Иэ табл. 2 видно, что различным хроническим поражениям печени соответствуют различные фенотипы и типы гаптоглобина. Приведенные случаи характеризируются благоприятным течением хронических заболеваний печени, симптомы которых вторичны в клиническом статусе пациентов.

В табл, 3 представлены случаи хронического поражения печени, при которых установлен фенотип HLA В8 в сочетании с Hp .2-2. В клинической картине представленных случаев преобладают симптомы поражения печени и, как было установлено при динамическом наблюдении, эти случаи характеризуются прогрессирующим течением. В клинике ВНЦРМ AMH СССР проведено иммуногенетическое обследование 162 пациентов с хроническими заболеваниями печени. Эти исследования позволили повысить точность прогнозирования.

Пример 1. Больной Б,К., 46 лет, номер истории болезни 431.87 поступил в терапевтическое отделение клиники с жалобами на боли в правом подреберье, общую слабость, повышенную раздражительность, утомляемость с диагнозом направления; хронический гепатит, При клинико-лабораторном обследовании диагноз подтвержден. Иммуногенетическое исследование выявило фенотип Н1 А А 1,10 В 8,19 С 4. После проведения курса лечебных мероприятий больной выписан в удовлетворительном состоянии, Однако уже через 4 месяца этот же больной вновь поступает в терапевтическое отделение (история болезни 547.87) с жалобами на сильную слабость, ощущение пол ноты в правом подреберье, желтизну склер, одышку. При пальпации печень значительно увеличена, выступает из-под реберной дуги на 7 см. Диагноз в направлении: обострение хронического гепатита, Цирроз7 При клинико-лабораторном обследовании больного с проведением в том числе и пункционной биопсии печени, установлен диагноз; цирроз печени, — как неблагоприятный исход хронического поражения печени — хронического гепатита, который был впервые установлен за 3,5 года до развития цирроза.

Фенотип HLA А 110 В 8,19 С4, Hp 2-2.

Пример 2, Больной B.Ñ., 36 лет.

Поступил в терапевтическое отделение клиники с жалобами на общую слабость, чувство тяжести в правом подреберье. При осмотре больного обнаружена умеренно увеличенная (около 1,5 см ниже реберной дуги) печень, чувствительная при пальпа15 ции, по констистенции несколько более плотная, чем в норме, По результатам клинико-лабораторного исследования (история болезни 496.87) установлен диагноз: хронический персистирующий гепатит, Из анам20 нестических данных следует, что больной страдает этим заболеванием в течение 8 лет, по поводу обострений находился трижды на стационарном лечении, При иммуногенетическом обследовании определен

25 фенотип HLA А 3,9 В 8,15, С 2; Hp 2 — 1. После проведения курса лечения больной выписан в удовлетворительном состоянии и в течение последующих трех лет по поводу обострений хронического гепатита в лечебные

30 учреждения не обращался.

Пример 3, Больная К.С., 35 лет.

История болезни 655.88. Поступила в терапевтическое отделение клиники с диагнозом: хронический персистирующий гепатит.

После лечения выписана в удовлетворительном состоянии. Иммунофенотип HLA А 1,2 В

5,7 С4, Hp 1-1. При обследовании спустя 3 года жалоб на функцию печени не предъявляла.

40 Формула изобретения

Способ прогнозирования течения хронических заболеваний печени путем исследования венозной крови, о т л и ч а к> щ и йс я тем, что, с целью снижения травматич45 ности, трудоемкости и повышения точности способа, определяют HLA-генетические маркеры крови и тип гаптоглобина и при установлении в HLA-фенотипа В8 и типа гаптоглобина Hp 2 — 2 прогнозируют про50 грессирование патологического процесса.

18003 б5

Таблица 1

П ототип

ММ пп.

ММ пп.

То же

7.

10

Заявляемый объект

Производят забор 5 мл периферической венозной крови/4,5 мл на гепарине и 0,5 мл — в сухую пробирку

Центрифугируют в градиенте плотности фиколл-верографина, выделяют лимфоциты

Выделенные лимфоциты дважды отмывают раствором

Хенкса, доводят конечную концентрацию до 10 млн. клеток в

1 мл

Осуществляют Н А-типирование общепринятым способом (лимфоцитотоксический тест)

Центрифугируют 0,5 мл крови, отбирают 10 мкл сыворотки

Проводят электрофорез в полиакриламидном геле с определением типа гаптоглобина

При определении в фенотипе антигена Hl А В8 и гаптоглобина Hp 2 — 2 прогнозируют вероятность тяжелого течения хронического заболевания печени

Проводят многоступенча гую биопсию печени под общим наркозом

Производят забор 2-4 мл печеночной крови

Производят забор 2 — 4 мл веноэной крови

То же, но отмывание производят фосфатным буфером

В пробирки берут 50 мкл конечной взвеси, добавляют 10 мкл коньюгированных с флюоресцином моноклональных антител реагирующих со специфическими рецепторами натуральных киллеров (К вЂ” клеток)

Взвесь инкубируют 1 ч при 4 С

Делают нативные мазки и исследуют их с помощью флюоресцентного микроскопа

Определяют относительное содержание К-клеток в печеночной периферической крови, на основании чего устанавливают прогрессирующий или непрогрессирующий патологический процесс

1800365

Таблица 2

Тип гаптоглобина

Н1 А-фенотип

hL исследования

Диагноз

11

А23 В 57 С4

А3,9 В 8,15 С2

90/5194

90/5211

90/5475

Hp 2-2

Hp 2-1

Hp 1-1 А 10,19 В 14,38 С 2

Hp 2-1

Н 2-1

90/5767

90/5857

А 19,25  — С4

А2 В 14,17 С2

Таблица 3

Составитель А,Чумак

Редактор С.Кулакова ТехредМ.Моргентал Корректор О,Кравцова

Заказ 1161 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета. по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР 113035, Москва, М-35, Раушская наб., 4/5

Производственно-изДательский комбинат "Патент", r. Ужгород„ул.Гагарина, 101

2

4

6

8

10

90/3322

90/3659

90/3676

90/3800

90/3972

90/4553

90/4559

90/4560

90/5117

90/5120

Хр. гепатит

Хр. гепатохолит

Хр. гепатохолит

Хр. гепатит

То же м

Хр. гепатохолит

То же

Хр. гепатит

Хр; персистирующий гепатит

Хр. гепатит

Хр, персистирующий гепатит

Хр. персистирующий гепатит

Хр. гепатохолит

Х . гепатит

Нр 2-1

Нр2 — 2

Hp 2-1

Но 2-2

Hp 2-2

Hp 2-1

Hp 1-1

Hp 2-1

Hp 2-1

Hp 2-2

А 2,11

А 1,2

А 1,10

А 1,11

А 9,10

А1,10

А1

А 1,10

АЗ

А 1,2

В 13,1702

В 14,19 С 1,2

В 13,17 С2,1

В 13,19 С13

В 5,38 С 1,2

814 С35

В 27,35 С 2

В 18,38 СЗ

В 13,15 С2

В935 С—