Способ дифференциации риккетсий вида riккетsiа акаri от riккетsiа siвiriса

 

Использование: серологические исследования , дефференциальная диагностика, осуществление мониторинга циркулирующих в природе риккетсий группы КПЛ. Сущность изобретения: из исследуемых штаммов выделяют цельнорэстворимые антигены . Активность антигенов титруют в реакции связывания комплемента. Проводят РИГА с иммуноглобулиновым эритроцитарным диагностикумом для выявления риккетсий группы клещевой пятнистой лихорэдчи. При отрицательных результатах РИГА культуру идентифицируют как R. akarl, при положительных результатахкак R. slbirica. 1 табл.

СО!03 СОВЕ ГСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (я)5 С 12 Q 1/04 (л о

6д (л

ОО

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4824069/13 (22) 10.05.90 (46) 23.08.92. Бюл, М 31 (71) Омский научно-исследовательский институт природноочаговых инфекций (72) Н,6. Рудаков и С.Н, Шпынов (56) J. Immunol, 1965, Vol. 94, р. 883.

Здродовский П,Ф,. Голиневич Е.М, Учение о риккетсиях и риккетсиоэах. — М.: Ме, дицина, 1972, с. 121 — 122. (54) СПОСОБ ДИФФЕРЕНЦИАЦИИ РИККЕТСИЙ ВИДА RICKETTSIA AKARI ОТ

R I C KETTS IA S I B I R l CA

Изобретение относится к медицинской микробиологии и касается идентификации риккетсий группы клещевой пятнистой лихорадки (КПЛ), а именно R. akari и R, sibirica, Известен способ дифференцирования риккетсий группы КПЛ с применением цельных антигенов и мышиных сывороток. Цельные антигены, т,е. растворимые антигены, не освобожденные от риккетсиальных корпускул, получают иэ нативных суспенэий яичных культур с добавлением фенола (0.50/ ) и последующей многократной обработкой эфиром и лиофилизацией препарата.

Однако использование овокультур риккетсий для иммунизации белых мышей с целью получения иммунных сывороток приводит к образованию антижелточных антител часто в титрах, превышающих титры специфических антител, что затрудняет серологический анализ, Известна воэможность применения диагностикума иммуног. Ы2, 1756358 А1 (57) Использование: серологические исследования, дефференциальная диагностика, осуществление мониторинга циркулирующих в природе риккетсий группы КПЛ. Сущность изобретения: из исследуемых штаммов выделяют цельнорастворимые антигены. Активность антигенов титруют в реакции связывания комплемента, Проводят РНГА с иммуноглобулиновым эритроцитарным диагностикумом для выявления риккетсий группы клещевой пятнистой лихорадки, При отрицательных результатах

РНГА культуру идентифицируют как R.

akari, при положительных результатах — как

Р. sibirlca, 1 табл. лобулинавого для выявления риккетсий группы КПЛ в реакции непрямой гемагглютинации (P Н ГА) для обнаружения риккетсий и их антигенов, однако для дифференциации антигенной структуры R. akari от R, sIbirica он не применялся, Цель изобретения — повышение точности способа.

Для достижения поставленной цели способ предусматривает исследование цельных антигенов риккетсий в реакции непрямой гемагглютинации (РНГА) с диагностикумом иммуноглобулиновым эритроцитарным сухим для выявления риккетсий группы КПЛ, что позволяет дифференцировать антигенную структуру R. akarl u R. siblrica.

Сущность способа сводится к тому, что цельные антигены риккетсий исследуют в

РНГА в серийных разведениях, начиная с рабочего разведения для РСК. Цельные антигены R, akarI в отличие от антигенов R.

sibIrica,в РНГА практически не выявляются.

1756358

Составитель Н,Рудаков

Редактор Н.Рогулич Техред M.Mîðãåèòàë Корректор С.Патрушева

Заказ 3062 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного. комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г. ужгород, ул.Гагарина, 101

Пример. Для постановки РНГА в два ряда лунок планшета для иммунологических реакций вносят серийные разведения антигенов в объеме 0,025 мл, физиологического раствора, во второй ряд (контроль специ- 5 фичности в РТНГА) — по 0,025 мл иммунной сыворотки к R. slblrica. Планшеты встряхивают и выдерживают 15 мин при комнатной температуре, затем в каждую лунку добавляютт по 0,025 мл эритроцитарного иммуног- 10 лобулинового диагностикума для выявления риккетсий группы КПЛ, Планшеты встряхивают и оставляют на 2 — 3 ч при комнатной температуре, после чего учитывают результаты. Титром антигена в иссле- 15 дуемом препарате считают максимальное разведение последнего, которое еще вызывает агглютинацию эритроцитарного диагностикума не менее чем на+++.

Результаты представлены в таблице. 20

Как видно из таблицы, антигенная активность препаратов R. аЕаг1 в РСК не ниже (1:2-1;4), чем R; stbirica (1:2), однако в отличие от антигенов R, slblrlca (титры в РНГА

1:32 — 1:128) при постановке РНГА с антиге- 25 нами, полученными из штаммов R. akari

"Каплан" и "Тогер", выявляли лишь следовые реакции (не более+ или++).

Использование предлагаемого способа позволит осуществлять мониторинг циркулирующих в природе риккетсий группы КПЛ.

Формула изобретения

Способ дифференциации риккетсий вида Rickensia akari от Rickettsia slblrica, включающий приготовление из исследуемой культуры цельнорастворимого антигена с последующей постановкой серологической реакции с антителосодержащим препаратом и учетом результатов, о т л и ч а ю щ и й- с я тем, что, с целью повышения точности способа, ставят реакцию непрямой гемагглютинации, при этом в качестве антителосодержащего препарата используют эритроцитарный иммуноглобулиновый диагностикум для выявления риккетсий группы клещевой пятнистой лихорадки и при отрицательных результатах реакции культуру идентифицируют как Rickettsia akarl, а при положительных — как Rickettsia зИЫг!са.