- , - -токоферилкарбонил-5-фторурацил, проявляющий противо- опухолевую активность

 

N -d, Е-р1-токоферилкарбонил-5- -фторурацил формулыпроявляющий противоопухолевую активность-I(Л

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

7489 (19) (И) .ОА ) у .- О

Н

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР пО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ V.0THÐ Èé (21) 2559705/23-04 (22) 23. 12. 77 (31) 154941/76 (32) 24.12.76 (33) JP (46) 07.05.81. Бюл. У 17 (71) "Эйсаи Ко., ЛТД" (JP) (72) Сизумаса Кидзима, Хироси Сионоя, Кимио Хамамура, Харуеси Араи и Нозому Коянаги (JP) (53) 547.854.4.07 (088 ° 8) (56) 1. M.Ä. Машковский "Лекарственные средства", M. "Медицина", 1967, ч. 11, с. 404.

2. А. Hoshi, "Antitumor Activity

of P ychotropic. Drugs and Their Synergic Act оп with Cyclophosphamide"

Chem. Pharm, Bull., 1969, v. 17, Ф 4, р. 848.

- СЮ 4 С .07 D 405/12, С 07 D 239/54

С 07 D 311/04,А 61 К 31/505 (54) N -d, I-d--ТОКОФЕРИЛКАРБОНИЛ-5-ФТОРУРАЦИЛ, ПРОЯВЛЯКМЦИЙ ПРОТИВООПУХОЛЕВУВ АКТИВНОСТЬ (S7) И -d, E- 1-токоферилкарбонил-5-фторурацил формулы проявляющий противоопухолевую активность

8274

О сн

С ф о

С 13

C16H 53

35

1 1 с ю

Метод применения

Соединение

40 о.ральный

4000 4000 4000

800 830 930

150 175 120

FT-207; 750

5-FU

135

Изобретение относится к новому

1 производному 5-фторурацила-N -d,lM. -токофенилкарбонил-5-фторурацилу,проявляющему противоопухолевую активность, который может найти применение в медицине.

Из ближайших аналогов предлагаемого соединения известен 5-фторурацил (1l, который находит применение в качестве противоопухолевого препарата. 10

Недостатком 5-фторурацила является высокая токсичность.

Целью изобретения является расши.рение арсенала средств воздействия на живой организм, а также снижение 15 токсичности противоопухолевых крепаратов., 1

Предлагается N -d 1-d-токоферилкарбонил-5-фторурацил формулы

Указанное соединение получают взаимодействием 5-фторурацила с d,l-c -токоферилхлорфоринатом.

Пример 1. Получение N -d 1-О ;токоферилкарбонил-5-фторурацил.

10,3 г (0,13 моль) 557-ного маслянного раствора гидрида натрия прибавляют к 100 мл диметилформамида.

Полученную суспензию охлаждают до температуры ниже 5 С и затем к ней медленно, в течение 30 мин, при перемешивании.прикалывают 150 мл раствора диметилформамида, содержащего

16,9 г (0,13 моль) 5-фторурацила.

Полученный раствор выдерживают в течение 1 ч при этих же условиях, после чего к нему медленно, по каплям, при перемешивании, в течение 30 мин добавляют раствор 100 мл диметилформамида, включающий 64,1 r (0,13 моль)

d, 1-Ы.-токоферилхлорформиата. Этот раствор нагревают до 40 С и переме-шивают еще 1 ч. После перемешивания реакционному раствору дают охладиться до комнатной температуры и затем фильтруют. Фильтрат концентрируют в вакууме. Остаток (76 г) дважды экстрагируют порциями бензола по 300 мл каждая. Бензольный экстракт .концентрируют в вакууме. Остаток

89 (71 г) перекристаллизовывают из эта- нала с получением целевого вещества в виде белого кристаллического порошка, т.пл. 119-120 С. Выход 64,7 г (85%).

Найдено, Ж: С 69,44; Н 8,70;

N 4,79.

Сs<Нь,FN О

Вычислена,X: С 69,59, Н 8,76;

N 4,77.

ИК-спектр (КВч): три адсорбционные полосы поглощения, соответствующие карбонильной группе, наблюдались в интервале 1700-1770 см

ЯМР-спектр (СОС1 ): Б 8,22 (d 1, Jz =80H, H,), 260 (t 2, J=

= 7 Н,), 2,09-2,04 (S 9, фенилметильная группа), 1,80 (t 2, J = 7 Н,), 1,60-1,18 (m 18), 0,9-0,8 (d 15).

Масс-спектр: m 586.

Ниже приведены данные по острым токсичностям и противоопухолевым ак-,, тивностям N -d,l -токоферилкарбонил-5-фторурацила согласно изобретению (называемого далее соединением А).

В качестве стандартных медикаментов выбраны N --(2 -тетрагидрофурфурил 5-фторурацил (FT-207) и 5-фторурацил 5-FU).

1. Острая токсичность

Значения LD, (мг/кг) после трехнедельного наблюдения мьппей разновидности CDF„ (самка, возраст 8-10 недель) приведены в табл. 1.

Та блица внут- внутри подривен- брюшин кожный ный ный

Из табл.1 видно, что соединение А имеет более низкое значение острой токсичности, чем соединения FT-207 и 5-FU.

Кроме того, аналогичные результа-. ты, получены для острой токсичности (ЬР, ) мышей разновидности ЛСК/JCL.

827489

П о олжение табл..3

2 I 3 4

Ь

Продолжение табл.4

Соединение А

2000 8

25 8 .50 . 8

10

148

FT-207

269

100 8

200 8

400 8

10 8

20 8

40 8

15

5-FU

156

20

63

80 т опу- 40 и (вес: ,Х) Сафлоровое масло (контроль) 100

Соединение А

62 8

125 8

250 8

500 8

106

33

1000

4000 8 . 39,0 182,6

2000 8 36,0 160, 9

1000 8 43,5 215,2

500 8 33,0 139, 1

Данные представленные в табл. 3, подтверждают то, что соединение А оказывает значительное действие при единичном применении 1/8 ?Л „

3) Влияние на рост твердой опухоли в результате орального применения. Имплантация

1,8"10 клеток S-180 имплантируют подкожно мышам разновидности JCR/JCL (самки, возраст 6-8 недель).

Применение

На испытуемой группе каждое лекарство применяют орально в виде раствора в сафлоровом масле через

3 ч после имплантации.

На контрольной группе для каждого лекарства в качестве контроля применяют сафлоровое масло.

Наблюдение

Через двадцать дней измеряют вес опухоли и рассчитывают отношение веса этой опухоли к весу опухоли к контрольной группы (Т/С,X).Ïoëó÷åí.Ные результаты представлены в табл.4

Таблица 4

Как следует из данных табл.4, минимальная эффективная доза соединения А порядка 250 мг/кг, тогда как это значение для препарата ЕТ-207 составляет 100 мг/кг, а для соединения 5-FU около 20 мг/кг. Что касает30 ся Отношения минимальной эффективИОЙ ДОзы к тОксичнОЙ ДОзе (LD ) Для . каждого из лекарств, то для соединения А это значение составляет величину менее 1/16, для FT-207 — 1/10, а для соединения 5-FU — 1/6. Поэтому соединение А более пригодно,чем два других лекарства.

3. Противоопухолевая активность на L-1210 лейкомию

1) Эффект выживания

Имплантация

10 клеток L-1210-лейкемии внутрибрюшинно имплантируют мышам разно- видности CDF (самки, возраст 8-10

45 недель).

Приме не ние

На испытуемых группах соединение

А применяют внутрибрюшинно в виде. раствора в триглицериде со средней

50 длиной цепи (МСТ) через 24 ч после имплантации

Каждое из лекарств 5-FU и FT=207 применяют также внутрибрюшинно в виде солевого раствора через 24 ч

55 . после имплантации. . На контрольной группе в качестве контроля для соединения А применяют МСТ. Солевой раствор исполь827489

Продолжение табл.2

Э

Солевой раствор (контроль) 16

100

500 8 (гибель) 5-FU

8 То же

125 8 4 3

68 8 26,4

34 8 43 3

Таблица 2

Рост опухоли. (ТРСУ:

Т/Cyg

Доза Число мг/кг животных

Приме няемое лекарство

1 3

Соевое масло (контроль) 100

16

8 0

8 0

Соединение А 4000

2000

Сре нее

ПрименяеДоза, Число мг/кг жиПроцент по сравнению с

8 0 50 мое ле1000

8 3,3 карство отзна

500 чен контрольной группой выжи вани

8 . 30,4

8 64,7

8 77,5

250

125

62

2. Противоопухолевая активность против Sarcoma-180 (S-180) !

1. Ингибирующее действие на рост

S-180 в ascite-форме (внутрибрюшинное применение).

Имплантация

10, клеток S-180 внутрибрюшинно имплантируют мышам разновидности

JCR/JCL (самки, возраст. 8-1J недель).

Применение 10

На испытуемых .группах соединение

А применяют в виде раствора в соевом масле, а 5-FU †.в виде солевого раствора через 24 ч после имплантации.

На контрольных группах использу- 15 ют в качестве контроля для соединения А. Солевой раствор применяют для соединения А. Солевой раствор применяют в качестве контроля для препарата S-FU. 20

Наблюдение

Через десять дней после имплантации опухолевых клеток измеряют общий уплотненный объект .клеток (ТРСУ) сог-25 ласно методике, описанной в .работе

Хоши с сорт. t2 7. Полученные результаты представлены в табл.2, в которой

Т/С, 7 означает отношение ТРСУ в испь1туемых группах к этому значению в контрольных группах.

Из данных, приведенных в табл.1. и 2, видно, что ED, соединения А составляет 170 мг/кг, а его индекс безопасности (ЬВ „ /ЕВ ) составляет величину более 24, тогда как ЕП препарата 5-FU равно 25 кг/кг, а его индекс надежности составляет величину около 5. Эти результаты показывают, что соединение А менее токсично в качестве противоопухолевого агента.

2) Зффект выживания

Имплантация

10 клеток $-180 внУтрибрюшинно имплантируют мьппам разновидности

JCR/JCL (самки, возраст 6-8 недель).

Применение

На испытуемой группе соединение

А применяют в виде раствора в соевом масле через 24 ч после имплантации.

На контрольной группе в качестве контроля для соединения А используют соевое масло.

Наблюдение

Подсчитывают количество дней выживания после имплантации.

Рассчитывают увеличение продолжительности жизни (Л.S) по сравнению с контрольной группой (JLS = Т/С,7.—

100). Полученные результаты представлены в табл.3.

Та блица 3

Соевое . масло 8 138 0

827489!

О.Та блица 5

Процент по сравнению с 15

Среднее

Чис

Доза, мг/кг

Применяемое лекарство ло число дней вот конт.рольной группой ных выжи вания

MCT (контроль) 20

6 7,0

Соедине-, ние А

125 6: 7 0

250 6 8 О

500 6 9 8

1000 6 12 1

2000 . 6 12,5

4000 6 13,5

0 25

40

73

93 35

Солевой

Таблица 6

27 7,0 раствор

5-FU (солевой раствор) 15 6

30 6

25

8,8

606,97

50670

FT-207

200 6

7,1

Не применяют

7 9,1

МСТ (контроль) 0

4 9,0

8 10,3

7 !0,1

7 зуют как контрольное вещество для препаратов 5-FU FT-207.

Наблюдение

Определяют среднее число дней выживания после имплантации и рассчитывают увеличение продолжительности жизни (JLS) по сравнению с контрольной группой. Полученные результаты .представлены в таб.5 °

Из данных, приведенных в табл.5, следует, что препарат FT-207 не является эффективным соединением в количестве 1/4 от LD5- . С другой сто- 55 роны, подтверждается то, что соединение А эффективно даже при дозе

1 /7 от Ы) о

Кроме. того, при сравнении дозы соединения А с дозой соединения

5-FU, при которой наблюдается соот" ветствующее увеличение проДолжительности жизни, видно, что отношение укаэанной дозы к ЬП для соединения А меньше, чем для соединения

5-FU. Поэтому пригодность соединения А выше пригодности соединения

5-FU.

Ф

2) Длительность противоопухолевого действия.

Применение

На испытуемых группах соединение

А применяют внутрибрюшинно на мышах разновидности CDF, (самки, возраст 8-10 недель) в виде раствора в MCT перед имплантацией, как это показано в табл.6.

Каждое из соединений FT-207 и

5-FU применяют внутрибрюшинно в виде солевого раствора перед имплантацией как это показано в табл..6.

На контрольных группах МСТ применяют в качестве контрольного вещества для препарата А. Для контроля соединений FT-207 и 5-FU берут солевой раствор.

Имплантация

10 клеток L-1210-лейкемии имплантируют мышам внутрибрюшинно.

Наблюдение

Подсчитывают количество дней выживания после имплантации.

Полученные результаты приведены в табл.6.

827489

Из данных приведенных в табл.б, видно что соединение А демонстрирует эффект выживания как при использовании в день имплантации кле5 ток опухоли, так и за 1-6 дней перед имплантацией, а также, что это соединение А оказывает противоопухолевое действие в течение 6

-дней.

Продолжение табл.б

2 3 . 4

7 10,1

7 9,9

5 9,0

8 11,6

Соединение А б 13,0

8 16,4

Как отмечено выше, N -d,1-d. †òîкоферилкарбонил-5-фторурацил обладает значительно более низкой токсичностью и значительно более широким интервалом значений между токсичной и эффективной дозами, чем соединения .5-FU u FT-207. Продолжительность действия предлагаемого соединения более длительная, чем у соединений 5-FU u FT-207. С этих

I точек зрения N -d,1-d-токофврил карбонил-5-фторурацил является отличным противоопухолевым агентом.

Доза этого соединения при использовании в качестве такого агента 1200 мг/кг в день, предпочтительно

S — 100 мг/кг для взрослых осо— бей.

8 11,8

7 11,2

4 13,5 .5 8,8

Солевой раствор

9,0

5 9,0

5 8 8

FT-207 (солевой раствор)*

5 9,0

5 9,0

5 9,0

5-FU (соле.вой раствор)*

Соединение может применяться как орально, так и парентерально. Его можно использовать в виде порошков, гранул, таблеток, капсул жидкости для инъекций, свечей и ,I мазей.

5 9,0

5 8,8

*Доза соединения А; FT-207",5-РП соответственно 100; 200;

S0 мг/кг.

Составитель В. Назина

Редактор 3. Бородкина ТехредЛ.Олейник . Корректор М. Шароши

Заказ 3595 Тирах 65 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная,4