Способ получения производныхурацила
ОПИСАНИЕ
ИЗОБРЕТЕНИЯ
Союз Советских
Социалистических
Республик
К ПАТЕНТУ (61) Дополнительный к патенту (22) Заявлено 18.06.79 (21)2559705/ 2778129/23-04 (23) Приоритет 23 ° 12. 77(32) 24. 12. 76 (51)М. К . С 07 0 239/54 A 61 К 31/505 Государственный комитет СССР по делам изобретений и открытий (31)154941/76 (33) Япония Опубликовано 07,0181, Бюллетень ¹ 1 (53) УДК 547. ° 854 ° . 407 (088. 8) Дата опубликования описания 09. 01.81 Иностранцы Сиэумаса Кидзима, Хироси Сионоя, Кимио Хамамура Харуеси Араи и Нозому Коянаги (Япония) (72) Авторы изобретения Иностранная фирма "Эйсаи Ко,ЛТД" (Япония) (71) Заявитель (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРОИЗВОДНЫХ УРАЦИЛА Х- 0-0 !! 0 R eel 3 (TI) Н4 О С-0 Сн5 (Ц К41 Изобретение относится к способу получения новых производных урацила, обладающих противоопухолевым действием, которые могут найти применение в медицине. Известен способ получения замещенных 5-фторурацила путем ацилирования 5-фторурацила соответствующими галоидпроиэводными(1). Целью изобретения является способ получения новых биологически активных производных 5-фторурацила.. Поставленная цель достигается описываемым способом получения производных урацила общей формулы pj, где R,,R и R> — каждый представляет собой атом водорода или метильную Группу, R4 - представляет собой насыщенную или ненасыщенную алкильную 30 группу с прямой или разветвленной цепью. Способ заключается в том,что соединение формулы (ti): где К, Й Я.и R имеют указанные выше значения, Х вЂ” представляет собой атом галогена или низшую алкоксигруппу, подвергают взаимодействию с 5-фторурацилом. Исходный реагент — 5-фторурацил может быть использован в виде соли щелочного металла. Реакцию можно проводить с использованием таких органических раство-. рителей, как диметилформамид, диметилацетамид и т.п. Реакция протекает эквимолярно и предпочтительно,нри температуре, лежащей в интервале от комнатной температуры, до, приблизительно, 50оС. Ниже приведены результаты испытания на острую токсичность и проти 795469 Соевое масло (контроль) t0 Соединение 16 100 Таблица 1 4000 2000 1000 500 3,3 250 30,4 125 64,7 77,5 4000 930 Q5 Солевой раствор (контроль) 135 150 175 120 5-FU 100 5-FU 500 (гибель) 250 125 4,3 26,4 43,3 воопухолевую активность N„ =d,f= N токоферилкарбонил-5-фторурацила (соединение A). В качестве стандартных медикаментов выбраны ЕТ-207 и 5-фторурацил (5 FU). Результаты испытания на острую токсичность В0 (мг/кг) после трехнедельного наблюдения мышей (самка, возраст 8-10 недель), приведены в табл.1. Соединение A 4000 4000 FT-207 750 800 830 Из табл. 1 можно видеть, что соединение А имеет более низкое значение острой токсичности, чем соединения FT-207 и 5-FU. Кроме этого, аналогичные результаты были получены для острой токсичности (LDgp ) у мышей 3CR/3CL. 2. Противоопухолевая активность против Sarcome-180 (5-180). Ингибирующее действие на рост 5-180 в ascite форме (внутрибрюшинное применение). Имплантация. 10 клеток S-180 внутрибрюшиннс имплантировали на мышах 3CR/JCL (самки, возраст 8-10 недель). Соединение А применяли в виде раствора в соевом масле, а 5-FU применяли в виде солевого раствора через 24 ч после имплантации. На контрольных группах применяли соевое масло в качестве контроля для оединения A. Солевой раствор применяют в качестве контроля для препарата 5-FU. Через 10 дней после имплантации опухолевых клеток измеряют общий уплотненный объем клеток (ТРСУ).Измерение ТРСУ осуществляют согласно методике по Я Полученные результаты представлелены в табл.2,в которой Т/С означает отношение ТРСУ в испытуемых группах к этому значению в контрольных группах. 40 Из данных представленных в табл. 1 и 2, видно, что ЕО> соединения А предлагаемого изобретения составляет 170 мг/кг, а его индекс безопасности (LDeo/ED6 ) составляет величи45 ну более 24, тогда как ЕОво препарата 5-FU составляет 25 мг/кг, à его индекс надежности составляет величину около 5. Эти результаты показывают, что соединение A менее токсично в качестве противоопухолевого агента. Эффект выживания, Имплантация. 10 клеток 5-180 6 внутрибрюшинно имплантируют на мышах разновидности ICR/1CL (самки, 55 возраст 6-8 недель). Соедйнение A применяют в виде раствора в соевом масле через 24 после имплантации. На контрольной группе, в качестве контроля для 49 соединения A используют соевое масло. Подсчитывают количество дней выживания после имплантации. Рассчи.тывают увеличение продолжительности 45 жизни контрольной группы (1LS-Т/СЪ 795469 Продолжение табл. Таблица 3 500 1000 2000 ® Гт-20/ 148 Соевое масло 13,8 269 100 Соединение А 200 43 182, 6 160, 9 215,2 139,1 4000 8 2000 8 1000 .S 500 8 39,0 36,0 400 10 156 5 Р0 43,5 55 33,0 63 Таблица 4 Сафлоровое масло (контроль) 100 Соеди- . нение A 62 106 125 250 100). Полученные результаты представлены в табл.3. Данные, представленные в табл.3, подтверждают тот факт, что соедине-. ние A оказывает действие при единичном применении 1/8 LD50. Влияние на рост твердой опухоли в результате орального применения . Имплантация. 1,8х10 клеток S-180 8 имплантируют подкожно на мышах разновидности ICR/ICL (самки, возраст 6-8 недель). Каждое иэ лекарств применяют орально в виде раствора в сафлоровом масле через 3 ч после имплантации. На контрольной группе для каждого иэ лекарств в качестве контроля применяют сафпоровое масло. Через 20 дней измеряют вес опухоли и рассчитывают отношение веса опухоли к весу опухоли у контрольной группы (Т/С,Ъ). Полученные результаты представлены в табл.4. Как следует из данных табл.4, минимальная эффективная доза соединения А составляет величину порядка 3р 250 мг/кг, тогда как это значение для FT-207 составляет 100/мг/кг,а для соединения 5-FU-около 20 мг/кг, соответственно. Что касается отношений минимальной эффективной дозы у K токсичной дозе (LD5<) для каждого из лекарств, то для соединения A это значение составляет величину менее 1/16; для FT-207-1/10; а для соединения 5-FU - 1/6, соответственно.Поэтому, пригодность соединения А выше, чем у других лекарств.. Противоопухолевая активность на L-1210 лейкемию. Эффект вьвкивания. Имплантация. 106 клеток. L-1210 45 лейкемии внутрибрюшинно имплантируют на мышах разновидности CD (самки, возраст 8-10 недель). Соединение A внутрибрюшинно применяют в виде раствора триглицерида ур со средней длиной цепи (ИСТ)через 24 ч после имплантации. Каждое из лекарств 5-FU u FT-207 применяют также внутрибрюшинно в виде солевого раствора через;24 ч после имплантации. На контрольной группе в качестве контроля для соединения A применяют NCT ° Солевой раствор применяют в качестве контрольного вещества для препаратов-5-FU u FT-207. 40 Определяют среднее время выжива ния после имплантации и рассчитывают увеличение продолжительности жизни .(ILS) по сравнению с контрольной группой. Полученные результаты пред65 ставлены в табл. 5. 795469 Таблица 5 250 б 8,0 14 500 б 9,8 40 1000 б 12,1 73 2000 6 12,5 79 4000 6 13,5 93 Не применяли 9,1 1СТ 9,0 20 (контроль) 10,3 10,1 Солевой раствор 27 7,0 0 10,1 5- F U (солевой раствор) 15 б 8,1 15 30 6 8,8 25 9,9 9,0 Соедине30 ние А 0 60 6 .9,7 38 50 б 7 0 0 11,6 FT-207 (Доза:1000 200 б 7,1 1 13,0 16,4 11,8 11,2 13,5 Солевой раствор 1 8,8 9,0 9,0 FT-207 (солевой раствор) 1 8,8 9,0 (Доза:200 мг/кг 4 9,0 5-FU,ñîëåвой раствор) 1 9,0 2 (Доза 5 мг кг 4 9,0 8,8 MCT (контроль) б 7, 0 0 Соединение A 125 б 7, 0 0 Из данных, приведенных в табл.5, следует, что FT-207 не является эффективным соединением в количестве, равном 1/4 от LDLL@. С другой стороны, подтверждается тот факт, что со- 40 единение А является эффективным даже при дозе около 1/7 от 1.0бр . Кроме этого, при сравнении дозы соединения A с дозой соединения 5-FU, при которой наблюдается соответству- 45 ющее .увеличение продолжительности жизни (11.5) видно, что отношение Указанной дозы к 1 Обе длЯ соединениЯ A меньше, чем у соединения 5=FU.Ïîэтому пригодность соединения A выше 50 пригодности соединения 5-FU. Длительность противоопухолевого действия. Содеинение A применяют внутрибрюшинно на мышах разновидности CDF< 55 (самки, возраст 8-10 недель)в виде раствора в МСТ, перед имплантацией, как это показано в табл.б. Каждое из соединений FT-207- и 5-FU применяют внутрибрюшинно в виде ф0 солевого раствора перед имплантацией, как это показано в табл.б. На контрольных группах MCT применяют в качестве контрольного вещества для препарата А. Для контро- ф5 ля соединений FT-207 и 5-FU применяют солевой раствор. Имплантация 10 клеток L-1210 лейкемии имплантируют мышам внутрибрюшинно. Подсчитывают количество дней выживания после имплантации. Полученные результаты приведены в табл.б. Т аб лица 6. 795469 Из данных, приведенных в табл.6 видно, что соединение A дает эффект выживания как при применении в день имплантации клеток опухоли, так и за 1-6 дней перед имплантацией, а также, что соединение A проявляет противоопухолевое действие в течение 6 дней. Как было отмечено выше, производные предлагаемого изобретения обладают значительно более .низкой токсичностью и значительно более широким интервалом значений между токсичной дозой и эффективной дозой, чем это имеет место у соединений 5-FU u FT-207. Продолжительность действия производных предлагаемого изобретения более высока чем у -соединений 5-FU u FT-207. Доза производных предлагаемого изобретения, когда они используются в качестве противоопухолевого агента, составляет 1-200 мг/кг в день, предпочтительно, 5-10 мг/кг для взрослых особей. Производные предлагаемого изобретения могут применяться как орально так и парентерально. В качестве форм для применения могут использоваться порошки, гранулы, таблетки, капсулы, жидкости для инъекции,свечи и мази. Такие рецептуры могут быть получены при использовании общепринятых эксипиентов обычными способами. Пример 1. Синтез и -d 1= <6 токоферилкарбонил-5-фторурацила. Получают суспензию добавлением 10,3 г (0,13 моль) 55%-ного масляного раствора гидрида натрия к 100мл диметилформамида. Суспензию охлаждают до температуры ниже 5ОС. К полученной суспензии медленно, по каплям» при перемешивании, в течение 30 мин добавляют 150 мл раствора диметилформамида, содержащего 16,9 г (0,13 моль) 5-фторурацила и полученный смешанный раствор выдерживают в течение 1 ч при этих же условиях.К этому раствору, медленно, по каплям, . при перемешивании,в течение 30 мин добавляют раствор 100 мл диметилформамида, содержащий 64,1 г (0,13 моль) d,l-g -токоферилхлорформиата. Этотг раствор нагревают до 40 С и перемешивают еше в течение 1 ч. После перемешивания реакционному раствору дают охлаждаться до комнатной температуры, затем фильтруют. фильтрат концентрируют при пониженном давлении. Полученный в результате остаток в количестве 76 г дважды экстрагируют порциями бензола, по 300 мл каждая. Бензольный экстракт. концентрируют при пониженном давлении. Полученный в I результате остаток в количестве 71 r перекристаллизовывают из этанола с получением целевого вещества в виде белого кристаллического порошка, имеющего температуру плавления 119120 С. Выход64,7 г, 85%). ЭлементарО ный анализ соединения, имеющего предположительную формулу С34 Н Гйд06 5С дал следующие результаты: Вычислено,%: С 69,59; Н 8,76; М 4,77. 15 . Найдено.%: С 69,44; Н 8,70; N 4,79 ° ЙК-спектр: (КВч).Три абсорбционные полосы поглощения соответствующие карбонильной группе, наблюда2О лись в интервале 1700-1770 см Спектр ЯМР: (СОС1 ) : + 8,22 (d=1,Ç ь =8,0; Н Нь); 2,60 (t=2; 3 =7HZ); 2,09-2,04 (S=9 фенилметильная группа); 1,80 (t=2, Л =7HZ);1,601,18(m=18); 0,9-0,8(d=15). Массспектр: М =586. Пример 2. Синтез Н -(2 2 5, 7,8-пентаметилхроманил-б-карбонил)— ЗО 5 фторурацила 2,47 r (0,019 моль)-5-фторурацила и 5,13 г (0,019 моль) 2,2,5,7,8пентаметилхроманил-6-хлорформиата подвергают реакции и последующей обработке согласно методике, описанной в примере 1. В результате полу-. чают целевое вещество в виде белого кристаллического порошка, имеющего температуру плавления 208-210 С. 40 Выход 4,9 r (68,5%) Элементарный анализ соединения предполагаемой формулы С Н FN 0 Вычислено,%: С 60,63; Н 5,60; И 7,40. 45 . Йайдено,%: С 60,75; Н 5,58; И 7,41. ИК-спектр:(КВч): три полосы аб.сорбции, соответствующие карбонильной группе, наблюдали в интервале частот 1700-1770 см . Спектр ЯМР: (дейтеропиридин) d 8,24(d=l ) .ь8,0; Н, Н,); 2 62 (t=2 Ë =7Hz); 2,08-2 04 (S=9 фенилметильная группа),1,82 (t=2,37Hz) 1,32(5=6,метильная группа). В табл. 7 даны соединения примеров 3-8 ° 795469 3 ГЧ ГЧ ГЧ с мм Р3 Ю M C«3 с с мм CO C33 Ю с3 с с с 3 ММ с3 сй «с3 М с с мм и мо ф О1 с с Ф сй ««Г CV Г M с с с О") IA Г- Г3 Г CO с с сй с3 « СО CO f с с Г Г «.О «-« 3 с с CO CO Г3 О ГГ3 оо с с с ф ф «-Ч О1 3 ГЧ с с г- г«,0 «33 г««; II О1 "Ф Сс« «3 Ь ° «« У3 F67 ««« l«3 н э! Т.Э «Г3 «О «9 z ц О О ««3 IC« . 3«Ъ 33 х. х х х х 0 0 О х О 0. ««Ъ ф р« О х х 0 0 ю х IA II3 ь «D ° 3. Ct -с Е «3, Z g 3I 3« ° «ч 1 3 х .Ю б Л Д О3 333 ь Cl т UЛ «.3 W «3« х С3 О, ««3 О3 0— О\ « «Г3 Г с C3«Ch «.О «.О 3п ь с « Z м т 333 I х д м 0 (с3 In м.м с с оо Г Г ln Ю Я г LI. O — Ч «ГФ f . ч ««3 795469 Формула изобретения 0-C(?) СН3 В 2 Я Составитель В. Назина Редактор Н. Потапова Техред И.Дсталощ Корректор Н. Бабинец Заказ9490/6 Тираж 454 Подписное ВННИПН Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035,.Москва, Х-35, Раушская наб., д. 4/5 Филиал ППП"Патент", r. Ужгород, ул. Проектная,4 Способ получения производных урацила, общей формулы 1: где R, R<Ä R> каждый, представляют собой атом водорода или метильную группу; R4 представляет собой насыщенную или ненасыщенную алкильную группу с прямой или разветвленной цепью, отличающийся тем, что соединение общей формулы (II): R 3 sa R4. имеют значения укаэанные вьиаеу Х- представляет атом галогена или низшую алкокси группу, подвергают взаимодействию с 5-фторурацилом. Источники информации, принятые во внимание при экспертизе 1. Патент СНА Р 3954760, кл. 260-260, опчблик.май 1976. 2. Hoshi А. "Antitumor Activity of Psychotropic Drugs and Their Synergic Action wIth Cyclo phos phamide" Chem.Pharm. Bull I969, 17(4), р. 848-850.