Способ выявления жизнеспособных и нежизнеспособных спор гриба
О П И С А Н И Е (,I) 53203I
ИЗОБРЕТЕН ИЯ
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ
Сома Соеетскня
Социалистических
Республик (61) Дополнительное к авт. свид-ву № (22) Заявлено 20.01.75 (21) 2100148/13 с присоединением заявки № (51) М. Кл. G 01N 1/30
Совета Министров СССР ло левам изобретений и открытий
Опубликовано 15.10.76. Бюллетень ¹ 38
Дата опубликования описания 14.10.76 (53) УДК Е576.8.094.81 (088.8) (72) Авторы изобретения
Л. И. Израйлет и В. Л. Мардер
Рижский медицинский институт (71) Заявитель (54) СПОСОБ ВЫЯВЛЕНИЯ
ЖИЗНЕСПОСОБНЫХ И НЕЖИЗНЕСПОСОБНЫХ СПОР ГРИБА
B EAU VERI A BASS (ANA
ГосУаарственный комитет (23) Приоритет
Изобретение относится к микробиологии и касается способа окрашивания спор грибов.
Известен способ выявления жизнеспособных спор в воздухе с помощью высева спор на питательные агаровые среды (1).
Известно применение красителей — карболового фуксина Циля и метиленовой синьки для окрашивания нежизнеспособных спор бактерий и грибов по методу Ожешки (2j.
Однако известные способы трудоемки и не обеспечивают одномоментного выявления жизнеспособных и нежизнеспособных спор.
Целью изобретения является одномоментное выявление жизнеспособных и нежизнеспособных спор гриба Beauveria Bassiana.
По предлагаемому способу к суспензии спор добавляют смесь флуорохромных красителей родамина и аурамина и дифференцируют споры по окрашиванию в люминесцентном микроскопе.
Способ осуществляют следующим образом.
В течение 3 — 5 с смешивают равные объемы, например 0,1 мл суспензия спор H 0,1 мл смеси флуорохромных красителей. Затем общей взвесью заполняют камеру Горяева, производят подсчет спор в 10 больших квадратах с помощью люминесцентного микроскопа и дифференцируют споры на жизнеспособные— зеленое свечение и нежизнеспособные — оранжевое свечение.
Для статистической обработки подсчет спор производят в трех разных пробах боверина при одном разведении препарата.
На основании полученных данных строят калибровочную кривую, определяющую количество спор в весовой единице препарата.
Применение смеси флуорохромных красителей родампна и аурамина для раздельного окрашиванпя жизнеспособных и нежизнеспособных спор гриба Beauveria Bassiana позволяет
1р получить четкое раздельное окрашивание жизнеспособных и нежизнеспособных спор гриба, значительно ускорить (в 50 — 100 раз) метод определения концентрации спор гриба Bear eria Bassiana в воздухе.
Формула изобретения
Способ выявления жизнеспособных и нежизнеспособных спор гриба Beauveria Bassiana, отличающийся тем, что к суспензпи спор
20 добавляют смесь флуорохромных красителей родамина и аурамина и дифференцпруют споры по окрашиваншо в люминесцентном микроскопе.
Источники информации, принятые во внп25 мание при экспертизе:
1. В. В. Скворцов и др. Выживаемость и индикация патогенных микробов во внешней среде, М., 1955 г., стр. 178.
2. Г. Я. Синай и др, Микробиологические
30 методы исследования при инфекционных заболеваниях, Л., 1941 г., стр. 54.