Всесоюзная (германская демократическая республика) -..- 5.111^ тt'-^"а f^cia

37I705

ОЛИ САН И Е

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К ПАТЕНТУ

Союэ Советских

Социалистических

Респу0лик

Зависимый от патента №

Заявлено 05Л I I.1970 (№ 1412048 31-16)

Приоритет 05.III.1969, № P 30/138-379, ГДР

М. Кл. А 61k 21/00

С 12с1 9/14

С 12d 9/10

Комитет по делам иэооретений и открытий при Совете Министров

СССР

Опубликовано 22.11.1973. Бюллетень № 12

УДК 615.779.931(088.8) Дата опубликования описания 8Х.1973

Авторы изобретения

Иностранцы

Ханс Кнель, Гертрауд Драдлер, Петер Крамер, Хельмут Праузер, Вольфганг Форберг, Эберхард Штрумпф, Хайнц Фрике, Вальтрауд

Эффенбергер, Хайнц Трум и Роземари Фюгнер (Германская Демократическая Республика) Иностранная фирма

«Феб Йенафарм» (Германская Демократическая Республика) Заявитель

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ АНТИБИОТИКА JA 6599

Изобретение относится к способам получения антибиотиков.

Опособ .получения антибиотика JA 6599 в патентной литературе не описан.

Целью изобретения является получение нового антибиотика, активного в отношении грамм положительных бактерий, а также дрожжей и гри б ксхв.

Достигается это тем, что культуру Streptomyces hygroscopicus JA 6599 выращивают в аэробных условиях на среде, содержащей истсхч ники углерода, азота и м ине ральные соли, в течение 2 — 5 дней:при температуре 28—

32 С, фильтрат культуральной жидкости экстратируют ортаничеаким растворителем из грунины кетонов или эфиров не смещивающих ся с водой, например бутилацетатом, экстракт повторно экстрагируют,разба влениой кислотой или кислым буфером, водный экстракт, в,GBQIo очередь, экстрагируют орга ничеаиим растворителем из группы галоидосодержащих углеводородов или эфиров, например хлороформом, с последующим осажден|ием целевого продукта петролейным эфиро м и его хроматопрафичеакой очисткой.

Штамм JA 6599 выделен из садовой земли (перегноя) Tunghua (Кита й). Он образует беловатый, окрашенный от желтого (цвета охры) до светло-коричневого субстратный ми5 целий. Белый воздушный мицелий за крыт окрашенным от серого до коричнево-серого и местами показьавает образование влажных черных хлопьев,,возникакхщ их благодаря автолизу.

l0 Пример 1. Из 1200 л культурального раствора с 275 у/мл после охлаждения до 5 С и подкисления ща велевой кислотой до,рН 3 мицелий отделяют путем сепарации. После нейтрализации водного раствора раствором ед15 кого натра прои сходит ясное отделение, и культур алыный фильтр ат экстрагируют при рН 8 с помощью 400 л бутнлацетата. Повторную экстр акцию бутилацетатного экстракта осуществляют с IIIîìîùüþ 80 л 0,01 н. серной

20 кислоты. Нейтрализованный повторный экст|ракт сразу сгущается до 20 л, и с;помощью раствора едкого натра значение рН доводят до 8, Затем двукратно эистрагируют хлороформом в количестве 5 и 2,5 л и соединенные

25 хлороформо вые экстракты сгущают до объема

0,3 л. Благодаря добавлению хлороформово371705

Составитель T. Головина

Техред Е. Борисова Корректор Е. Денисова

Редактор Н. Спиридонова

Заказ 1271/15 Изд. Кз 1248 Тираж 467 Подписное

ЦНИИПИ Комитета но делам изобретений и открытий прп Совете Министров СССI

Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Типография, пр. Сапунова, 2

3 го концентрата при перемешиваняи в 5 л петролейного эфира выпадает ос нование антибиоти|ка JA 6599. Выход 110 г. Точка плавления 118 — 122 С.

Hip и м е р 2. 52 г сы рого основания антибиотика JA 6599 Растворяют в 200 мл ацетона, очищают с .помощью 20 г активированного угля и хроматографируют через 1 кг окиси алюминия:по Броиману с помощью ацетона в качестве элюирующе го средства. 1 л активного ацетоново го элюата выпаривают, остаток растворяют в 150 мл хлороформа, и хло роформовый,раствор добавляют при перемепгивании в 3 л пепролейно го эфира, Очищенное основание отсасывают и высушивают. Выход

41 г. Точка плавления 128 — 134 С.

Пр и мер 3. 50 г сырого основания антибиотика JA 6599 .растворяют в 150 мл ацетона, добавляют 10 г акт1ввированного угля и хроматографируют через 500 г окиси алюминия по Брокману. Активный ацетоновый элюат дает после выпа рива н ия 45 г очищенного оснolBBíèÿ в виде сухого остатка. Его вносят в 50 мл ацетона и сме;шивают с 13 г винной кислоты в 300 мл ацетона. При перемеши вании эту смесь прнкапывают в 4 л эфира, и:выпадает та ртрат антибиотика JA 6599.

Выход 35 г. Точка плавления 134 — 138 С. Из маточного раствора получают еще 7 г.

TIyiIIiM ер 4. 51 г очищенного основания анти биотика JA 6599 растворяют в растворе

13,5 г винной кислоты в 100 мл воды. Раствор обесцвечивают с,помощью 10 г активи рован5 ного угля и после фильтрования лиофильно высgIIIHtBBIoT. Выход 58 г. Точка плавления

133 — 137 С.

10 Предмет изобретения

Способ получения а нтибиотика JA 6599, отличающийся тем, что культуру Streptomyces

hygroscopicus JA 6599 выращивают в аэроб15 ных условиях на среде, содержащей источ|ники углерода, азота и минеральные воли,:в течение 2 — 5 дней IIipm температуре 28 — 32 С, фильтрат культур алыной жидкости экстратируют органическим растворителем из группы

20 кетэно в или эфиров не смешивающихся с водой, например бутилацетатом, экстракт повтор но экстрагируют разбавленной кислотой или кислым бу"фером, водный экстракт, в свою очередь, экстрагируют органическим раство25 рнтелем из IpyIIiIIII галоидосодержащих углеводородов или эфиров, на пример хлороформом, с последующим осажден нем целевого продукта петролейным эфиром и его хроматографичвской очисткой.