Патент ссср 235244

ОПИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

235244

Союз Советсних

Социалистических

Республик

Зависимое от авт. свидетельства №

Кл, 30h, 6

Заявлено 19.VI I.1967 (№ 1174004/31-16) с присоединением заявки ¹

Приоритет

Опубликовано 16.1.1969. Бюллетень № 5

Дата опубликования описания 23Х.1969

МПК, С 12k

УДК 615.779.9(088.8) Комитет по делам изобретений н открытий ори Совете Министров

СССР

Авторы изобретения

Л. А. Дешиц, С. Ю. Гольдат, С. Л. Бринберг, Л. В, Смирнова, В. Д. Кузнецов и А. М. Козина

Всесоюзный научно-исследовательский институт антибиотиков

Заявитель

ШТАММ ЛС-В-241 Ф. У. АСТ1ЫОМУСЕ$ ORIENTALIS

ПРОДУЦЕНТ ВАНКОМИЦИНА а емкостью среды сле3

0,25

0,1

0,2

Известен штамм № 685 Actinomyces orientalis продуцент ванкомицина.

Предлагаемый штамм ЛС-В-241 Ф. У. Ас(1nomyces orientalis продуцент ванкомицина получен из исходного штамма № 685 Actino-

myces orientalis путем селекции и воздействия актинофага № 1. Штамм ЛС-В-241 от,шчается от исходного продуктивностью, а также некоторыми морфологическими признаками.

Штамм ЛС-В-241 Ф. У. Actinomyces orientalis на гороховой агаризованной среде образует конусообразные складчатые колонии диаметром 4 — 5 мм, розовато-белого цвета, обильно спорулирующие, имеющие в центре кратерообразное углубление, субстратный мицелнй бледно-желтого цвета; на соевой агаризованной среде — сильно спорулиру.ющие конусообразные колонии диаметром 3 — 4 мм, воздушный мицелий белый, субстрактный мицелий обильный, желтый; на среде ¹ 6, агаризованной с кукурузным экстрактом, — колонии диаметром 4 — 5 мл, конусообразные, розоватобелого цвета, слабо складчатые, вершина «онуса срезана, субстратный мицелий бледножелтый, пигмента в среду не выделяет; на синтетической среде Чапека — колонии диаметром 1,5 — 2 мм, плоские, плотные, центр колоний с растрескивающейся вершиной, тонкий субстратный мицелий беловато-серого цвета, воздушный мицелий белый; на синтетической среде № 11 с кракмалом — колонии диаметром 1 — 1,5 лтлт, паутинообразные, сильно спорулнруют, белые, субстратный мицелнй белый, пигмента в среду не выделяет; антибиотнческая активность штамма в лабораторнык условиях 1000 — 1200 лткг/лт.т; в ферментерах 825 мкг/лы.

Пример 1. В колбу Эрленмейр

10 750 мл наливают 100 лл посевной дующего состава,,:„: соя глюкоза

СаСО.

15 кукурузный экстракт (на сухой вес) (на сырой вес) Среду засевают споровым материалом

20 штамма ЛС-B-241 Ф. У., хранившсгося на пшене, и выращивают посевной материал в течение 72 час прн t+28 С на качалках со скоростью вращения 220 об/ман. Ферментацню проводят в колбе Эрленмейера объемом

25 750 лл, содержащую 50 лтл ферментацнонной среды,,:,: обработанный кукурузный экстракт (или 2,о экстракта на сухой вес) глюкоза 1

30 меласса 1

235244

0,1

0,25

2,5

0,5 мочевина

СаСОа крахмал кашалотовый жир

Предмет изобретения

Редактор Н. Н. Торопова

Корректор С. М. Сигал

Заказ 653/15 Тираж 465 Подписное

ЦНИИПИ Комитета по делам изобретений и открытий при Совете Министров СССР

Москва, Центр, пр. Серова, д. 4

Типография, пр. Сапунова, 2

Крахмал заваривают при 70 С.

Обработку кукурузного экстракта ведут следующим образом: 10 г СаСОз, 200 г кукурузного экстракта и 400 г воды нагревают до кипения, доводят рН до 7,2, кипятят 30 мин.

Отстоявшуюся жидкость отфильтровывают, Объем фильтрата доводят до 500 мл.

Среду стерилизуют при 0,8 атм в течение

30 мин текучим паром.

В колбу с ферментационной средой вносят

4 /о посевного материала. Ферментацию проводят в колбах на качалках, вращающихся со скоростью 220 об/мин при 28 С.

Количественное определение ванкомицина проводят биологическим методом диффузии в агар при использовании в качестве тест-культуры Вас. subtilis 66 — 33.

Средняя антибиотическая активность культуральной жидкости составляет 1000—

1200 мкг/мл.

П р им ер 2. Колбы, содержащие 100 мл посевной среды (состав, как в примере 1), засевают споровым материалом ЛС-В-241 Ф. У. и выращивают культуру 72 час при 28 С в колбах на качалке со скоростью вращения

220 об!мин. В ферментер с 25 л той же среды добавляют 300 мл мицелиальной культуры, выращенной в колбах. Посевной материал доращивают в аппарате при i 28 С 48 час, а затем передают в ферментер.

В аппарат объемом 100 мл, содержащий

60 л ферментационной среды (состав, как в

4 примере 1), вносят 6 л (10о, ) посевного материала. Ферментация продолжается 120 час, культуральная жидкость содержит 825 мкг/мл ванкомицин..

Штамм ЛС-В-241 Ф. У. Actinomyces onen10 talis продуцент ванкомицина, отличающийся тем, что на гороховой агаризованной среде образует конусообразные складчатые колонии диаметром 4 — 5 мм, розовато-белого цвета, обильно спорулирующие, имеющие в центре

15 кратерообразное углубление, субстрактный мицелий бледно-желтого цвета; на соевой агаризованной среде — сильно спорулирующие конусообразные колонии диаметром 3 — 4 мм, воздушный мицелий белый, субстратный ми20 целий обильный, желтый; на среде № 6, агаризованной с кукурузным экстрактом, — колонии диаметром 4 — 5 мм, конусообразные, розовато-белого цвета, слабо складчатые, вершина конуса срезана, субстратный мицелий бледно-желтый, пигмента в среду не выделяет; на синтетической среде Чапека — колонии диаметром 1,5 — 2 мм, плоские, плотные, центр колоний с растрескивающейся вершиной, тонкий субстратный мицелий беловато-серого цвета, воздушный мицелий белый; на синтетической среде № 11 с крахмалом — колонии диаметром 1 — 1,5 мм, паутинообразные, сильно спорулируют, белые, субстратный мицелий белый, пигмента в среду не выделяет; антибиотическая активность в лабораторных условиях 1000 — 1200 мкг/мл, в ферментерах—

825 мкг/мл.