Способ получения эталона токсичности знтомопатогенных бактерий

204831

СПИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Союэ Советскит

Социалистических

Республик

Зависимое от авт. свидетельства №вЂ”

Заявлено 02.И.1966 (№ 1080945/30-15) с присоединением заявки №вЂ”

Кл. 45l, 15/00

МПК А 01п

УДК 632.937.12 (088.8) Приоритет

Комитет по делам изобретений и открытий лри Совете Министров

СССР

Опубликовано 20.Х.1967. Бюллетень № 22

Дата опубликования описания 8.1.1968

Авторы изобретения

А. И. Машанов и А. Б. Гукасян

Институт леса и древесины Сибирского отделения

Академии наук СССР

Заявитель

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ЭТАЛОНА ТОКСИЧНОСТИ

ЭНТОМО ПАТО ГЕН Н Ъ|Х БАКТЕРИ й

Предлагаемый способ может быть использован в химической промышленности, а также в микробиологических лабораториях при производстве бактериальных препаратов.

Известны способы получения эталона токсичности в виде микробной взвеси спор и включений, основанные на биологических тестах.

Однако получение эталона токсичности энтомопатогенных бактерий в чистом виде до настоящего времени не удавалось.

Предлагаемый способ имеет целью получить токсин в чистом виде. Для этого растворенные кристаллы включений энтомопатогенных бактерий подвергают высаливанию хлористым натрием или солями сернокислого аммония.

Получение токсина в чистом виде позволяет точно определить миллиграмм токсичности кристаллов-включений, а также дает возможность контролировать производство бактериальных препаратов промышленным способом.

Культуру Вас. insect ys Gyk. выращивают на картофельном arape при температуре 26—

27 C в течение 96 — 120 час до полного формирования спор и параспоральных телец (кристаллов) . После этого производят смыв культуры с поверхности картофельного агара. 1олученную суспензию разделяют на центрифуге. Верхний слой жидкости удаляют, а нижний — бактериальную массу — заливают стерильной водой. Температура воды от 4 до 5 С.

Суспензию доводят щелочью до рН 9,0 — 10,0.

Путем микроскопирования устанавливают полноту растворения параспоральных включений — кристаллов. Полученную суспензию снова центрифугируют. В верхнем слое жидкости содержатся растворенные кристаллы

10 включений. Из этого раствора производят высаливание токсина хлористым натрием или солями сернокислого аммония. Высаливание производят из расчета 700 — 900 г на 1 л культуральной жидкости. Нижний слой удаляют, 15 а верхний фильтруют через бумажный фильтр в холодильнике. Полученный фильтрат снова растворяют в воде, имеющей температуру от

4 до 5"-С и добавляют ацетон, охлажденный до — 10 С, до выпадения осадка. Осадок от20 фильтровывают на бумажном фильтре. Полученный порошок высушивают в эксикаторе над слоем прокаленного хлористого кальция в холодильнике.

Предмет изобретения

Способ получения эталона токсичности энтомопатогенпых бактерий, основанный на получении микробной взвеси спор и включений, отличающийся тем, что, с целью получения

30 токсина в чистом виде, растворенные кристал204831

Составитель М. Дранишников

Редактор С. И. Тимофеева Техред Л. Я. Бриккер Корректоры: А. П. Татаринцева и М. П. Ромашова

Заказ 4196/4 Тираж 535 Подписное

ЦНИИПИ Комитета по делам изобретений и открытий при Совете Министров СССР

Москва, Центр, пр. Серова, д. 4

Типография, пр. Сапунова, 2 лы включений энтомопатогенных бактерий подвергают высаливанию, например, хлористым натрием или солями сернокислого аммония до получения порошка из расчета 700—

900 г на 1 л,культуральной жидкости при рН 9,0 — 10,0.