(22r)-2 @ , 3 @ -дигидрокси-20-(3 @ -изопропилизоксазолин-5- ил)-5 @ -прегнан-6-он, проявляющий фиторостостимулирующую активность и способ его получения

 

Использование: в сельском хоз-ве для , регуляции роста растений. Сущность изобретения: продукт-( а,3я-дигидрокси- 20-(3 -изопропилизоксазолин-5-ил)5а -прегнан-6-он, БФ С2уН4зМ04) ; выход 98% тпл. 110-111°С Реагент 1 пиридинийгидообромид; реагент 2. Os04.Условия реакции: в среде диметилформамида.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ .

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

НО;, НО"

НО;, НО"

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

1 (21) 4868143/04 (22) 24,09.90 (46) 15.07,92. Бюл, М 26 (71) Институт биоорганической химии АН

БССР (72) В. А. Хрипач, P. П. Литвиновская, С. В, . Драч и В. А, Стрельцова (53) 547.689.7.07(088.8) (56) Жирмунская Н. M., Зубкова Н, Ф., Овсянникова Т. В, и др, Методические рекомендации по проведению лабораторного скрининга синтетических регуляторов роста растений. Черкассы, 1985, с. 28.

Knight В. Е. — Ann, Appi. Biol, 1969, vol.

63, р. 211, Прозоровский В. Б. Фармакология и токсикология. 1978. с. 497.

Изобретение относится к новым химическим соединениям, в частности (22R)-2а,За

-гидрокси-20-(3 -изопропилизоксазолин-5-ил)

-5а прегнан-6-сну формулы который проявляет фиторостостимулирую.щую активность и может быть использован в сельском хозяйстве, и способу его получен ия.

Известны природные фиторостостимуляторы — брассиностероиды, среди которых наиболее широко применяется зпибрассинолид

Й 1747455 А1 (505 С 07 J 43/00, А 03 N 33/24 .

-471 "" o

I c

2 (54) (22R)-2а,За-ДИГИДРОКСИ-20-(3 -ИЗОПРОПИЛИЗОКСАЗОЛИН-5-ИЛ)-5а -l1PEГНАН -6-0H, ПРОЯВЛЯЮЩИИ ФИТОРО-

СТОСТИМУЛИРУЮЩУЮ АКТИВНОСТЬ, И

СПОСОБ ЕГО ПОЛУЧЕНИЯ (67) использование: в сельском хоз-ве для регуляции роста растений, Сущность изобретения: продукт-(22R)-2 a,Ça-дигидрокси20-(3 -изопропилизоксазолин-5-ил)5а

-прегнан-б-он, БФ C27H43N04I выход

98, т.пл. 110 — 111 С; Реагент 1".пиридинийгидробромид; реагент 2: Os04 Óñëîâèÿ реакции: в среде диметилформамида.

Цель изобретения — получение фиторостостимулятора, обладающего более высо-;

КоА активностью в отношении проростков фасоли и пшеницы по сравнению с известными препаратами, и способ его получения.

Поставленная цель достигается тем, что получают (220)2а, За, -дигидрокси-20-(3изопропилизоксазолин-5-ил)-5 а-прегнан-6-он формул ы (i) из (22R)-20-(3 -изопропилизокса зол ин-5-ил)-3

a„5-цикло-5а -прегнан-6-она путем изомеризации циклакетона в присутствии пиридинийгидробромида в 2-ен-производное с

1747455 последующим цис-гидроксилированием двойной связи четырехокисью осмия:

Π— Б

О

О N (lV)

НО;, H0""" о ()

Наблюдается устойчивость изоксазолинового кольца в реакциях формирования брассиностероидной функциональности колец А и В. Отмечены высокие выходы указанных стадий и отсутствие каких-либо побочных продуктов, что обеспечивает эффективность этого метода синтеза. (22R)-2а,а 3-Дигидрокси-20-(3 -изопро! пилиэоксазолин-5-ил)-5 а -прегнан-6-он вызывает стимулирующее воздействие на длину 2-го междоузлия и общую длину растения фасоли и превосходит на 10-14% стимулирующее воздействие, вызываемое эпибрассинолидом. В тесте на проростках пшеницы исследуемое вещество оказывает стимулирующее воздействие на рост корней и наземной массы, превосходящее действие эпибрассинолида на 14 — 24,(,.

Пример 1. Синтез целевого соединения. а) Получение Ь -6-кето-производного г (М

Стераидный изоксазолин (1,4 г, 0,0034 моль) и пиридинийгидробромид (1,5 r, 0,009 моль) растворяют в 20 мл диметилформамида. Реакционную смесь кипятят 2 ч. Затем добавляют воду и экстрагируют хлороформом, Органический слой промывают 5 (ным раствором Н Cl. Упаривают растворитель, очищают хроматографией на силикагеле. Получают 0,98 г (70%) (22R)-20(3 -изопропилизоксазолин-5-ил)-5а -и регнI

2-е н-6-она (И).

ПМР-спектр(С0С!з, д, м.д.): 0,71 с. (18 и

19-Ме); 0,86 д. (ЗН, 21-Ме); 1,15 д (6Н, 26 и

27-Ме); 2,32 м. (1Н, С Н); 2,66 м. (ЗН, Сг и

С H); 4,62 м. (1Н, Сг Н); 5,33 м.; (1Н, С Н);

5,64 м. (1Н, С Н).

6) Получение целевого соединения (I).

К раствору 0,9 г(0,0022 моль) кетона (IV) в 50 мл ацетона добавляют 0,045 г (0,00011

Контроль — питательный раствор без препарата. Питательный раствор готовят на водопроводной воде с добавлением следующих солей, г/л: Са(МОз)г 1,35; КНг РО4 0,33;

MgSC4 0,17. В каждый сосуд высаживают 10 проростков, 2 сосуда на вариант. Условия выращивания: освещение 4-6 тыс.люкс, световой день 16 ч, температура моль) Оз04 и раствор 0,5 г(0,0036 моль) N-метилморфолина в 2 мл воды. Перемешивают при комнатной температуре 5 ч. К реакционной смеси добавляют насыщенный раствор

5 МагСОз, Осадок отфильтровывают, фильтрат упаривают. Экстрагируют хлороформом.

Органический слой промывают 0,5Я>-ной

HCl и раствором NaCI, Упаривают, Получают 0,95 r (98 ) (22R)-2а,3а -ди10 гидрокси-20-(3 изопропилизоксазолин-5-ил)

-5 а-прегнан-6-она (I). Т.пл. 110-111ОС.

ИК-спектр (v, см ): 3430, 1715, 1040, ПМР-спектр (CDCI3Ð, м.д.): 0,70 с. (ЗН, 18-Ме); 0,76 с. (ЗН, 19-Ме); 0,87 д, (ЗН, 2115 Ме)г 1,17 д. (6Н, 26 и 27-Ме); 2,68 м. (ЗН, С з и С Н); 3,78 м. (1Н, С Н); 4,08 м. (1 Н, С Н);

4,64 м. (1Н, СггН).

Масс-спектр (m/z): 445 (М)+, 430 (МСНз), 402, 358, 334, 315.

20 Пример 2. Испытание биологической активности.

Исследования проводят в лабораторных условиях на растениях фасоли и пшеницы, эталоном служит эпибрассинолид.

25 Для определения фиторостостимулирующей активности используют тест на проростках фасоли, Обработку проводят тогда, когда 2-е междоузлие (между первой парой листьев и

30 первым тройчатым листом) находится в самом начале роста и не превышает 1 — 2 см.

Учет проводят через 2 нед после обработки препаратами.

Результаты исследований представле35 ны в табл. 1, Тест на проростках пшеницы предназначен для обнаружения ретардантов для однодольных и одновременно дает возможность выявить стимуляторы роста

40 надземной массы и корней.

Семена пшеницы равномерно раскладывают в кюветы на влажную фильтровальную бумагу, покрытую писчей бумагой, накрывают стеклом и выдерживают в термо45 стате 3 сут при 24 С, Одинаковые проростки пшеницы высаживают в отверстия крышек на сосуды с водойроводной водой объемом

500 мл. Через 3 — 4 сут воду в сосудах заменяют питательным раствором с добавлени50 ем препарата.

1747455

1. (22R)-2а, За - дигидрокси-20-(З -изоI пропилизоксазолин-5-ил)-5а "прегнан-6-он формулы О вЂ

НО;, Таблица 1

Таблица2

Составитель И.Федосеева

Техред М.Моргентал Корректор П.Гереши

Редактор А.Orap

Заказ 2471 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г. Ужгород. ул.Гагарина, 101

22 — 24 С. Измерения проводят через 20 дн от начала опыта.

Полученные результаты приведены в табл. 2.

Острую токсичность соединения определяют по методу Прозоровского. Для опытов используют самок мышей. Исследуемое вещество вводят животным внутрижелудочно в виде водной эмульсии. Наблюдения за животными проводят в течение 14 сут.

Показатель LD, определенный по таблице Проэоровского: LDx = 720 (450 «+ 230) мг/кг при р < 0,05.

Таким образом, (228)2а,За- дигидрокси-20-(З изопропилизоксазолин-5-ил)-5а прегнан-6-он проявляет фиторостостимулирующую активность, превосходящую на 12-24ф активность эпибрассинолида, Формула изобретения

HO 0

10 проявляющий фиторостостимулирующую акгивность.

2. Способ поп. 1, отл ича ю щи йс я тем, что (22R)-20-(3 -изопропилизоксазолин1

15 5-ил)-За,5-цикло-5 а -прегнан-6-он обрабатывают пиридинийгидробромидом с последующим цис-гидроксилированием полученного (22гц-20-(3 -.изопропилизоксазолин-5-ил)-5-прегн-2-ен-6-она четырех20 окисью осмия.