Способ изготовления гидролизной питательнойсреды
Взамен ранее изданного
О П И С А Н И Е l7I088
ИЗОБРЕТЕНИЯ
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ
Союз Советских
Социалистических
Республик
Зависимое от авт. свидетельства №
Заявлено 29.Х1.1963 (¹ 867949/30-15) с присоединением заявки ¹
Приоритет
Опубликовано 17 1.1968. Бюллетень № 4
Кл. 301т, 6
МПК А 61k
УДК 619: 576.8.093.33 (088.8) Комитет по делам изобретений и открытий при Совете Министров
СПОСОБ ИЗГОТОВЛЕНИЯ ГИДРОЛИЗНОЙ ПИТАТЕЛЬНОЙ
СР ЕДЬ1
Изобретение относится к способам изготовления гидролизных питательных сред для выращивания микроорганизмов.
Известные способы приготовления сред, включающие гидролиз экстрагированных растительных белков пепсином и панкреатином, не позволяют получить среду, пригодную для выращивания вирусов.
Предложенный способ отличается тем, что, с целью получения среды, пригодной для выращивания вирусов, на второй стадии гидролиза добавляют химически чистый фермент трипсин, а затем вводят раствор Хэнкса и нормальную сыворотку крупного рогатого скота.
Способ изготовления гидролизной питательной среды заключается в следующем: горох или сою размачивают, а затем замачивают трижды дистиллированной водой с PH=7,8 — 8 из расчета на 1 л воды добавляют б0 г гороховой муки, крупного помола и 2,5 г химически чистой поваренной соли. Зкстрагирование белка производится в течение 24 час при помешивании и температуре 10 — 15 С. Затем надосадочную жидкость сливают сифоном в другую чистую посуду и подвергают гидролизу ферментом пепсином следующим образом: настой от гороховой муки нагревают до 50 С и добавляют 1,5 г пепсина на 1 л настоя. После этого настой помещается на 24 час в термостат при температуре 37 С, при постоянном помешивании.
По окончании гидролиза пепсином настой снова подогревают до 50 С, подщелачивают
5 едким натром до РН=8,0 — 8,2 после чего на каждый литр настоя добавляют 1,5 г трипсина и оставляют стоять 3,5 час при температуре 45 — 50 С, при постоянном помешивании.
10 По окончании гидролиза трипсином настой подвергают просветлению путем кипячения в течение 15 мин при среде, равной 5, после чего отстаивают в течение 1 час, отфильтровывают через марлевый фильтр, а затем фильтр
15 «Зейтца-ЕК-2».
Полученный гидролизат проверяют на стерильность и вводят раствор Хэнкса и нормальную сыворотку крупного рогатого скота. B готовую питательную среду добавляют антибио20 тики
Наилучшим составом для получения сплошной монокультуры из почечной ткани крупного рогатого скота оказался следующий:
Гидролизат гороха 10%
25 Раствор Хэнкса 80%
Нормальная сыворотка крови крупного рогатого скота 10%
Пенициллин 100 тыс. И. Е.
30 Стрептомицин 100 тыс. И. E.
Среда 7,4 — 7,6
171088
Составитель П. Мурый
Редактор Д. М. Груздев Техред А. А. Камышникоза Корректоры: Е. Ф. Полионова и Л. В. Наделяева
Заказ 304/2 Тираж 530 Подписное
ЦНИИПИ Комитета по делам изобретений и открытий при Совете Министров СССР
Москва, Центр, пр. Серова, д. 4
Типография, пр. Сапунова, 2
При изготовлении среды для культивирования эмбриональной почечной ткани свиней получают гидролизат сои, затем вводят раствор
Хэнкса, нормальную сыворотку крови крупного рогатого скота и амниотическую жидкость, Предмет изобретения
Способ изготовления гидролизной питательной среды, включающий экстрагирование растительных белков, обработанных гидролизным ферментом пепсином, отличающийся тем, что, с целью получения среды, пригодной для выращивания вирусов, на второй стадии гидролиза добавляют химически чистый фермент трипсин, а затем вводят раствор Хэнкса и нормальную сыворотку крови крупного рогатого скота.
