Фаг ро29, лизирующий бактерии рrотеus мirавilis и рrотеus vulgaris
Изобретение относится к вирусологии , а именно к лечебным бактериофагам . Целью изобретения является фаг Р029, имеющий широкий спектр литического действия в отношении бактерий Proteus mirabilis и Proteus vulgaris. Указанный фаг выделен из сточных вод. Впем.1 абсорбции данного фага на бактерии-хозяине равно 25 мин, латентный период длится 55 мин, при максимальном выходе фага из одной клетки в количесгье 115 части;;. Фаг лиэирует 48%, отделенных от больных штаммов Proteus mirabilis и Proteus vulgaris. 2 таОл. о (Л
СОЮЗ СОЕЕТСНИХ
СООИАЛИСТИ"1ЕСКИ Х
РЕСПУБЛИК
С 12 N 7/10
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
К ABTOPCHOMY СВИДЕТЕЛЬСТВУ
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ
ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТНРЫТИЯМ
ПРИ ГКНТ СССР (21) 4 707614/13 (22) 19.06.89 (46) 07 06.91. Бюл. »"- 21 (71) Тбилисский научно-исследовательский институт вакцин и сыворо ок Научно-производственного объединения
"БактериоАаг (72) З.Д.Чали»пвили, И.А.Чолокашвили, M.Ã.Äçóëèaøâèëè, Н.Н.Бллардж»»»»ви»»н, К.К. Гачечиладзе и Т.Г Чани»пв»»ли (53) 576.858.9(088.8) (56) Proresky О. W. e t . а1 . The mc r>holopy of Proteus Ьасг.е. iop1»age.
J Gen Microbiol 1965, 41.
Taubeneck. U° . Feinstruktur von
Proteus Hacreriophagen. â€,1. Арр1.
Microbiol 1968, 8.
Изобретение относится < вирусологии,а именно к лечебным »»»ar;
Целью изобретения является д.аг
Р029, имеюг»ий иироки»» спектр литического действия в отношении бактерий
Proteus mirabilis u Proteus vul8aris.
Культурально-морфологические признаки. При посеве двуслойньп; методом на агаре Мартена величина негативных пятен равна 0,5-1 мм в диаметре, колонии прозрачные, край ровный. В бульоне Мартена при посевной дозе и х
»»10 микробных клеток на 1 мл среды и множественности 0,1, при инкубации при температуре (37+1) С в течение
4 ч накапливается в количестве до и 1») ROE/мл.
„„SU„„1654334- А 1 (54) пА1 Р029, .1111311Р:»,ОЩ111 БАКТЕРИИ
PROTEUS HIRkBILIS И PROTEUS KVLGARIS (57) Изобретение относится к вирусологии, а именно к лечебным бактериофагам. Целью изобретения является Aar
Р029, имеющий п»ирокий спектр литического действия в отношении бактерий
Proteus mirabilis »» Proteus vulgaris.
Указанньп» bar вь»делен из сточных вод.
Ppe»» . а,".сорб»»и»» данного» »ага на бактерии-хозяине рав»»о 25 мин, латентный нерио; длится 55 мин, при максимальном выходе Лага иэ одной клетки в колич«с"г»»е 115 част»ц. Фаг лиэирует 48% °
-ве.:е» ыделе»»;»ь»х от больных штаммов
Рго еus mirabilis и P ote«s vulgaris.
2 табл, Ф»»эиологнчес»»ие признаки. Титр Лага, то есть максимальное разведение, при котором определяется литическое г действие Аага, равен n ° 1 " БОЕ/ют.
Время адсорбции 25 мин, латентный период 55 мин. Урожайность 115 частиц на одну иАи»»ированную клетку.
Спектр литического действия. Фаг лиэирует 48% свежевыделенных от больных штаммов Proteus mirabilis u Proteus л»18аг»з.
Серологические признаки.
Путем иммунизации трех кроликов получают специфическую антиАаговую сыворотку. При этом первую инъекцию делают внутримышечно (2 мл с содержанием 1 10 SOF./мл вместе с полным
1654334
Таблица1
Штамм Разведения фаэовой суспензии на питательном бульоне
Фаг
Титр фаговых частиц, БОЕ/мл
10 е 10 т 10
Р029 P.vulgaris 6605 410
4 10
39 адъювантом Фрейнда), а затем через
1 мес вводят внутривенно 2 мл фага
1 ° 10ц БОЕ/мп, а на 10-й день после последней инъекции кроликов обескров5 лнвают и иэ крови получают сыворотку.
Кинетику скорости нейтрализации определяют по методу М.Адамса, равна К
=1400 1/мин.
Морфологические признаки. Посредством электронного микроскопа устанавливают морфологию и размеры фаговых частиц. Вактериофаг Р029 имеет гексогональную головку и сократимый отросток.
На конце отростка отмечается наличие некоторого утолщения. Размеры AaroaoA головки 78 нм х 18 нм. Отростка
340 нм х 22 нм, отростка в сокращенном виде 140 нм х 26 нм, свободного стержня 1 18 нм х 13 нм, шейки 17 нм.
Фаг Р029 обладает широким спектром литического действия на бактерии
Proteus mirabilis u Proteus vulgaris, дополняет известную коллекцию и используется для изготовления лечебного 25 препарата бактериофага протеус, Пример. Фаговую суспенэию разводят десятикратным разведением до .уровня 10, Из каждой пробирки берут пробу по 1 мп фаговой суспенэин и добавляют смыв 18-часовой агаровой культуры в объеме О, 1 мл. К этой смеси о добавляют расплавленный до 46 С
О, 1Х-ный агар-агар на питательном бульоне, содержимое пробирки выпивают на предварительно приготовленные чашки Петри с твердым слоем 1,5Х-ного агар-агара на питательном бульоне.
Чашки оставляют до застывания верхнего слоя, Затем их переворачивают дном вверх и в таком положении инкубируют в термостате при 37 С 18 ч. На следующий день становится возможным подсчет стерильных пятен в виде прозрачных эон на непрозрачном фоне бактериального роста.
Определение диапазона литического действия, 1,5Х-ный твердый слой агар-агара на питательном бульоне обрабатывают этиловым спиртом для сдерживания роения исследуемой культуры и чашки
° о высушивают в термостате при 37 С в течение 30 мин. После высушивания на поверхность агар-агара наносят полоски 4-часовой бульонной культуры.
Полоски подсушивают и на них наносят суспенэию фага в виде капли.
Содержимое чашек инкубируют при 37 С в течение 4-13 ч. Лизирующне участки наблюдаются на полоске бактериального роста в области нанесения капли фага °
Результаты опытов представлены в табл. 1 и 2.
Как следует из табл. 1 и 2, фаг обладает по отношению к штаммам Proteus mirabilis u Proteus vulgaris высокой активностью литического действия .
Формула и э о бр ете ния
Фаг РО29 У Ф-138, лизирующий бактерии Proteus rnirabil is u Proteus
vulgaris.
I! 65433й
Таблица 2
Доля лизированных игаммов, Х
Количество
Фаг оличество лизированных штамоверенных пггяммов, шт. ов, шт.
48,4
748 362
Р029
Производственная поливалентная раса 748
Производственная поливалентная раса с добавлением фага Р029 748
21,9
164
52,0
389
Составитель С.Светлышев
Редактор Н.Гунько Техред Л.0лийнык Корректор А.0бручар ф
Заказ 1930 Тирах 369 Подписное
ВНИКЛИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР
113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5
Производственно-издательский комбинат "Патент", г.ушгород, ул. Гагарина,101
