Штамм бактериофага кlевsiеllа рnеuмоniае для идентификации бактерий кlевsiеllа рnеuмоniае

 

Изобретение относится к медицинской вирусологии и микробиологии. Целью изобретения является штамм бактериофага для быстрой идентификации бактерий вида Klebsiella pneutnoniae. Штамм представляет собой генетически однородный клон, селекционированный из отдельных негативных колоний. Использование фага позволяет идентифицировать 93% свежевыделенных штаммов К1.рп.

СОЮЗ СО6ЕТСНИХ

СОЦИАЛИСтИЧКСНИХ

ЩСГВЬЛИН (51) С 12 N 7УОО!

Г

L ..

Г0СУД РСтвЕ 1Н1 1Й SOVmV

ПО ИЗОИРН1=НИЯМ И ОЩРЫтИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР (21) 4654415/13 (22) 20.02.89 (46) 15.04.91. Бюл. № 14 (71) Тбилисский научно-исследовательский институт вакцин и сывороток

Научно-производственного объединения

"Бактериофаг" (72) Г.Г.Джапаридзе, Е.В.Церетели и Т.Г.Чанишвили (53) 578.858.9 (088.8) .Изобретение относится к медицинской вирусологии и микробиологии, Диагностический бактериофаг К1.рп. представляет собой селекционированный клон со специфическим действием, который выделен из сточных вод г. Тбилиси в 1987 r. в лаборатории физиологии микроорганизмов ТбилНИИВС методом обогащения с "подсевом". Селекционирование специфического клона из отдельных негативных колоний про. ведено методом выделения генетически однородных популяций. Штамм депонирован в коллекции Тбилисского НИИ вакцин и сывороток под № Ф-134 и характеризуется следующими свойствами.

Морфологические признаки. Фаг

Kl.pn. состоит из головки гексагенальной формы размером 100 ° 80 нм

- и отростка с сокращающимся чехлом длиной 120 нм, фаг образует полиморфные негативные колонии диаметром

ЛК» 1641886 л ) 2 (54) ШТМ1И БАКТЕРИОФАГА KLEBSIELLA

PNEUM0NIÀB ДЛЯ ИДЕНТИФИКАЩ% БАЕТЕРИЙ К?.ЕВБТЕ1,1,А РМЕ1Л10ИТАЕ (57) Изобретение относится к медицинской вирусологйи и микробиологии.

Целью изобретения является штамм бактериофага для быстрой идентификации бактерий вида Klebsiella pneumoniae.

Штамм представляет собой генетически однородный клон, селек)1ионированный из отдельных негативных колоний.

Использование фага позволяет идентифицировать 933 свежевыделенных штаммов К1..рп.

2-3 мм, Колонии прозрачны, имеют резко очерченные края.

Бион огич еские свойства, Бактериофаг обладает высокой адсорбционпой способностью (максимальное время адсорбции 12 мин) и урожайностью

110-120 частиц на 1 инфицированную клетку на штаммах Kl.ðn. Латентный период равен 60 мин. Фаг обладает высоким показателем эффективной множественности (интенсивное размножение фага наблюдалось при множественности 1 и ниже) °

Фаг обладает высокой термоустой чивостью (нижняя граница термОинак;тивации равна — 55 С, верхняя— о

+85 С.

Специфичность. Штамм строго специфичен и не лизирует гетерологические виды микроорганизмов семейства кишечных бактерий.

1641886

Формула изобретения

1. штамм бактериофага Klebsiella

pneunoniae Тб НИИВ и С Р Ф-134 для идентификации бактерий Klebsiella р neumon iae .

Составитель О.Жакетов

Редактор Т.Лазоренко Техред М,Дндык Корректор М,Максимишинец

Заказ 1126

Тираж 367 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г.Ужгород, ул. Гагарина,101

II р и м е р. Из исследуемого материала вьщеляют культуры бактерий в чистом виде.

Вьщеленные культуры засевают в

5 бульон Мартена и инкубируют при.

37 С в течение 3 ч. После инкубации бульонные культуры наносят на чашки

Петри с агаром в виде полосок. Одно1 временно на одну чашку можно нанести 5-6 полосок исследуемых культур бактерий, затем чашки подсушивают в термостате в течение 20 мин. Вскрывают ампулы с диагностическим фагом и накалывают фаг на полоски культур тонко оттянутой пастеровской пипеткой.

После нанесения фага чашки ставят в термостат при 37 С на 3,0-3,5 ч.

После инкубации чашки вынимают из термостата и внимально просматривают полоски. В том случае, если на местах накапывания фага обнаруживают ,просветление культуры, реакция счи,тается положительной. Просветление 25 культуры говорит о взаимодействии фага с бактериальной клеткой, его обозначают: Cl — сливной лизис, SCL— полусливной лизис и +++ - отдельные негативные колонии (более 20), В случае отсутствия положительной реакции просветление полосок на местах накапывания фага не наблюдается, а отсутствие лизиса обозначается (-).

В опытах по перекрестному лизису с гетерологичными видами микроорганизмов семейства кишечных бактерий следующие (в скобках указано количество проверенных штаммов): Entегоbacter aегоgenes (145), Entегоbacter

cloacea (126), Hafnia alvei (45), Serratia marcescens (50), Salmonella — р а з ные виды (200), Sh ige 11 а

zonne i (80), Sh igel 1 a f 1 exneri (70), Shigella newcastle (60), Escherichia со1i (.1 50), Proteus (115), Citrobacter siversus (30). Чувствительность к фагу не проявляет ни один из вьппеперечисленных 1071 штамма. Из свежевыделенных 562 штаммов (Kl.ðn.) фаг лизирует 522, что составляет 92,97..