Питательная среда для выделения энтерококков

 

Изобретение относится к медицинской микробиологии и может быть использовано в бактериологической диагностике кишечных инфекций. Цель изобретения - повышение селективных свойств среды. Питательная среда содержит, г/л: триптический гидролизат соевого шрота 7,5-8,5; цитрат натрия 9,0-10.5; агар 8,5-9,5; глюкоза 9,0- 11,0; углекислый натрий 5,5-6,5; кристаллвиолет 0,0008-0,0012; дистиллированная вода 1 л, рН среды 9,8 ± 0,4. При посеве энтерококков и микробов-ассоциантов рост последних из разведения 10 отсутствует. Чувствительность среды - при посеве 100 м.кл. энтерококков отмечается их рост на среде. Рост энтероккоков через 18-24 ч инкубации при 37°С.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК

s С 12 0 1/04

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4715662/13 (22) 04.04.89 (46) 30.05.91. Бюл, N 20 (71) Научно-производственное объединение

"Питательные среды" (72) Т,Д;Шеломинская и В.С.Балаклеец (53) 576.8.093.31(088.8) (56) Седов В;И. Селективная среда для выделения знтерококка. — Лабораторное дело, 1979, N. 5, с.280 — 281. (54) ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ ВЫДЕЛЕНИЯ ЭНТЕРОКОККОВ (57) Изобретение относится к медицинской микробиологии и может быть использовано в бактериологической диагностике кишечИзобретение относится к медицинской микробиологии и может быть использовано в бактериологической диагностике кишечных инфекций.

Цель изобретения — повышение селективных свойств среды.

Питательную среду готовят следующим образом.

Пример 1. 7,5 г триптического гидролизата coeaoro шрота. 8,5 г агара, 9,5 r глюкозы, 9,0 г цитрата натрия, 5,5 r уклекислого натрия и 0,0008 г кристалл виолета растворяют в 1 л дистиллированой воды в колбе.

Среду кипятят 2-3. мин, охлаждают до

50 С и разливают в стерильные чашки Петри, По мере застывания среды чашки со средой и крышки раздельно подсушивают в термостате до высыхания конценционной влаги на крышках чашек, после чего закрывают крышками, и среда готова для использования. Цвет готовой среды бледно-желтый, рН 9,8 + 0,4, „„Я „„1652345 А1 ных инфекций. Цель изобретения — повышение селективных свойств среды. Питательная среда содержит, г/л: триптический гидролизат соевого шрота 7,5-8,5; цитрат натрия 9,0-10,5; агар 8,5 — 9,5; глюкоза 9,011,0; углекислый натрий 5,5 — 6,5; кристаллвиолет 0,0008 — 0,0012; дистиллированная вода 1 л, рН среды 9,8 0,4. При посеве энтерококков и микробов-ассоциантов рост последних из разведения 10 отсутствует.

Чувствительность среды — при посеве 100 м.кл. энтерококков отмечается их рост на среде. Рост энтероккоков через 18-24 ч инкубации при 37 С.

Пример 2. В 1 л дистиллированной воды вносят 8,0 r триптического гидролиэата соевого ш рота, 9,0 г ага ра, 10,0 r глюкозы, 10,0 г цитрата натрия, 6,0 г углекислого натрия, 0,001 r кристаллвиолета.

Пример 3. B 1 л дистиллированной воды вносят 8,5 г триптического гидролизата соевого шрота, 9,5r агара, 11,0 г глюкозы, 10,5 г цитрата натрия, 6,5 г углекислого натрия, 0,0012 г кристалл виолета.

Среду можно получать в сухом виде.

Пример 4. В шаровую мельницу емкостью 1 кг загружают 185 г триптического гидролизата соевого шрота, 209,3 г агара, 232,5 г глюкозы, 232,5 г цитрата натрия, 139,5 г уклекислого натрия, 0,02 г кристаллвиолета. Смесь перемешивают в течение 45 мин.

Навеску вещества 4,3 г (она содержит оптимальное количество укаэанных ингре1652345

Триптический гидролиэат соевого шрота

Глюкоза

Цитрат натрия

Углекислый натрий

Кристаллвиолет

Агар

Дистиллированная вода

7,5-8,5

9,5 — 11,0

9,0 — 10,5

5,0-6,5

0,0008 — 0,0012

8,5-9,5

1л

Составитель Г.Смирнова

Техред M.Ìîðãåíòàë Корректор И.Муска

Редактор M.Ïåòðîâà

Заказ 1747 Тираж 370 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г, Ужгород, ул,Гагарина, 101 диентов) вносят в 1000 мл воды, кипятят 2-3 мин, разливают по 25 мл в чашки Петри.

Аналогично получают препараты сухих сред с содержанием миНимальных и максимальных концентраций ингредиентов. При этом навеску составляет 40 и 46 r соответственно на 1 л среды.

Пример 5. Для приготовления микробных взвесей суточной культуры тест-штаммов энтерококков, выращенный на скошенном сахарном агаре при 37 С, смывают 0,9%-ным изотоническим раствором хлористого натрия, доводят взвеси до 10 ед. по оптическому стандарту мутности ГИСК им. Л.А.Тарасевича, что соответствует 10

9 микробных клеток в 1 мл. Затем серийными десятикратными разведениями доводят до содер>кания 10 тыс. (10 ), 1 ты.. (10 ) микробных клеток в 1 мл взвеси.

Готовят также микробные взвеси микробов-ассоциантов: Staphltococcus, Proteus, E. coll, Pseudomonas. Для этого суточные культуры, выращенные на скошенном питательном агаре при 37 С, смывают

0,9%-ным изотоническим раствором хлористого натрия, доводят до 10 ед. по оптическому стандарту мутности ГИСК им.

Л.А,Тарасевича, что соответствует 109 микробных клеток в 1 мл.

Из разведения 10 и 10 каждой взвеси монокультур энтерококков высевают по 0,1 мл на чашку с испытуемыми и voíòðoëüíûми средами (среды сравнения), Микробы-ассоцианты высевают из разведения 10 по 0,1 мл на чашки с испытуемой и контрольными средами..

Контрольными средами (сравнения) служат среда Седова лабораторного изготовления и сахарный агар на кормовых дрожжах.

Учет результатов проводят через 18-24 ч инкубации посевов при 37 С.

Чувствительность, стабильность исходных биологических свойств испытуемых тест-штаммов на предлагаемой и контрольных(сравнительных) средах одного порядка ($ faecalls 1379, S.faecalls var zymogenes 7з)— отмечается рост при посеве 100 микробных клеток, 5 Проверка селективных свойств, При посеве на испытуемую среду тестштаммов микробов-ассоциантов Е.соИ 0-55, Staphllococcus aurevs 209 P, Pseudomonas

aerugenosa Z-165, Proteus rettgerl 4489 из

10 разведения 10 рост культур не наблюдается, в то время как на контрольной среде

Седова наблюдается рост стафилококков из этого же разведения. Полная ингибиция стафилококков на контрольной среде наступа15 ет из разведения 10 .

Сравнение скорости роста энтерококков показывает, что на предлагаемой среде энтерококки вырастают через 18 — 24 ч, а на среде Седова — через 36-48 ч.

20 Таким образом, предлагаемая среда обладает более выраженными селективными свойствами. обеспечивающими выделение энтерококка в чистом виде и большей скоростью роста выделяемого микроба, 25 Фо р мул а изоб рете н ия

Питательная среда для выделения энтерококков, содержащая источник азота, глюкозу, цитрат натрия, углекислый натрий, селективный агент, агар и дистиллирован30 ную воду, отличающаяся тем, что. с целью повышения селективных свойств среды, она в качестве источника азота содержит триптический гидролизат соевого шрота, а в качестве селективного агента—

35 кристаллвиолет при следующем количественном соотношении комонентов, г/л;