Селективная питательная среда для определения принадлежности исследуемых дрожжей к виду candida маlтоsа

 

Изобретенпз относится к микробиологической промышленности и медицине и может быть использовано для определения принадлежности исследуемых дрожжей к виду Candida malcosa Целью изобретения является повышение специфичности,, упрощение и ускорение исследования, а также возможность определения степени номинирования штамма-продуцента. Изобретение заключается в том, что питательная среда , приготовленная на сусло-агаре, содержит красители родамин 6Ж (11С-- 113 мг/л) и акрифлавин (10-20 мг/л)« Из исследованных видов дрожжей рода Candida на этой среде вырастают лишь штаммы C.maltosa в виде окрашенных в розовый цвет гладких колоний„ 1 табл. с « «каа %ео&

СООЗ СОВЕТСКИХ социллистичесних

РЕСПУБЛИК

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Н QQ+QPQQQQQ C TE Ц 1 @$i

ГОСУДАРСТ8ЕННЫЙ КОМИТЕТ пО изОБРетениям и ОтнРытиям

ПРИ ГКНТ СССР (21) 4689259/13 (22) 07.02.89 (46) 28.02.91. Бюл. ¹ 8 (71) Всесоюзный научно-исследовательский институт биосинтеза белковых веществ (72) И.В.Ряпис и О.С.Янушкина (53) 663.14(088.8) (56) Инструкция по микробиологическому контролю производства кормовых дрожжей БВК (паприн), утвержд. Главным управлением микробиологической промьппленности, при Совете Иинистров

СССР, М., 1985.

Аргунова Ю.С., Логина Н.li). Иетод идентификации производственных штаммов Candida guilliermondii. — Лабораторное дело. N. Медицина, 1982, ¹ 4, с. 243-245.

Изобретение относится к микробиологической промышленности и может быть использовано при микробиологическом контроле производства белкововитаминного концентрата (БВК) на парафинах нефти, а также в медицинской практике.

Цель изобретения — повьппение специфичности, упрощение и ускорение исследования, возможность определения степени доминирования штамма-продуцента.

Изобретение заключается в том, что селективная питательная среда для определения принадлежности исследуемых дрожжей к виду С.maltosa включающая

„„SU»1 310 1 А1 (51)5 С 12 0 1/04, С 12 N 1/16// (C 12 Q 1/04, С 12 К 1:72) (54) СЕЛЕКТИВНАЯ П17АТЕЛЬНпЯ СРЕДА

ДЛЯ 0ЛРЕДЕ ПЕНИЯ ПРИНАДЛЕ? Ъ| )СП ИССЛЕДУЕМЫХ ДРОЮКЕИ К ВИДУ СА п?ТЭА ИАГ.ТОБА (57) Изобретение относится к микробиологической промьппленно"TH и медицине и может быть использовано для определения принадлежности исследуемых дрохскей к виду Сапй>.da maltosa.

Целью изобретения является повьппение специфичности, упрощение и ускорение исследования я также воз 1ожнссть определения степени,;оминнрования штамма-продуцента. «iso5pетение зев ключается в том, что питательная среда, приготовленная на сусло-агаре,, содержит красители родамин 6?К (110113 мг/л) и акрифлавин (10-20 м."/л), Из исследованных видов дрожжей рода

СапйЫа на этой среде выр":стяют лишь штаммы C,maltosa в виде окрашенных в розовый цвет гладких колоний.

1 табл. сусло-агар (СА) в киде питательной основы, согласно изобретению дополнительно содержит родямин 6R и акрифла-вин при следующем соотношении компонентов на 1 л среды

Родамин бЖ i C 0- i 30 мг

Акрифлавин i0-20 мг

Сусло-агар Остал:,ное

Для приготовления среды к расплавленному СА добавляются годнь е растворы красителей до указанных конечных концентраций. Влунки матрицы 50-"íåçäного штамча-репликаторя (предварительно простерилизованного) наливают физиологический раствор..двух-трех суточные исследуемые колонии и музей7637097

10 пые культуры контрольных штаммов стеклянной палочкой переносят в лунки матрицы и суспендируют. Чашки Петри„ содержащие среду с красителями и СА (контрольная чашка), маркируют, отмечая низ чашки, соответствуюший низу матрицы. Щеткой штампа исследуемые культуры переносят на эти две чашки. Посевы инкубируют при 34 С в течение 40 ч. На чашке с СЛ вырастают все исследуемые колонии, на чашке с красителями — лишь С.maltosa в виде гладких имеюир х розовый цвет колоний, Для иллюстрации предлагаемо- 15 го изобретения на среде с красителями изучили рост промышленных и коллекционных штаммов дрожжей.

Перечень использовнных штаммов представлен в таблице., 20

Пример 1. Указанным способом на CA и чашку с красителями: родамин

6Ж 120 мг/л, акрифлявин 15 мг/л, посеяны штаммы, представленные в таблице. При учете результатов через двое суток на чашке с СЛ вырастают все исследованные штаммы. На чашке с красителями — лишь культуры С.maltosB. Рост остальных видов исследованных дрожжей Р.Сап;7ida отсутствует.

Пример 2. Для посева культур используют среду, содержащую красители в.минимально допустимых концентрациях, мг/л: родамин 6Ж i 10, акрифлавин 10.

Через двое суток наблюдают рост дрожжей С.maltosa и очень слабый рост дрожжей С.rugosa в виде сухого сероватого налета.

Пример 3. Для посева культур используют среду, содержащую,расители в максимально допустимых концентрациях, мг/л: родамин 6Ж 730. акрифлавин 20.

Через двое суток наблюдают ингибированный рост штаммов С.maltosa.

Рост других штаммов отсутствует. . Таким образом, среда с красителями проста в употреблении, дает возможность в течение 2 сут получить результаты, на одной пластинке агара можно изучить до 50 культур дрожжей, среда высоко специфична. Оптимальная концентрация красителей в среде: родамина 6Ж-120 г/л, акрифла- 55 вина.15 мг/л, Пример 4. Для посева исследуемой коллекции используют среды содержащие красители в следующих концентрациях, мг/л: родамин 6Ж 100, акрифлавин 5.

При учете через 2 сут набгюдают рост штаммов С. maltosa, С.rugosa, С.scottii т,е, среда утрачивает свою специфичность.

H p и м е р 5. Посев осуществляют на среду. содержащую красители в концентрациях, мг/л: родамин 6Ж

135, акрифлавин 25.

При учете через 2-4 сут рост исследуемых штяммов, в том числе

С.maltosa отсутствует, т,е. повышение концентрации красителей приводит к выраженному ингибирующему эффекту.

Таким образом, предлагаемая среда является селективной для основного продуцента БВК на парафинах неф— тп — дрожжей С,maltosa. Оня проста в употреблении и приготовлении, позволяет в течение 2 сут, определить принадлежность исследуемых дрожжевых культур к виду С. maltosa. Использование 50"гнездного штамма-репликатора дает возможность провести широкий скрининг исследуемых культур и определить уровень доминирования дрожжей С.та1tosa непосредственно в практических лабораториях (без подключения дополнительных исследований — изучения утилизации.и асиммиляции углевЬдов).

Формула и з о б р е т ения

Селективная питательная среда для определения принадлежности исследуемых дрожжей к виду Candida maltosa, включающая сусло-агар как питательную основу, отличающаяся тем, что, с целью повышения специфичности, упрощения и ускорения исследования, а также возможности определения степени доминирования штамма-продуцента, среда дополнительно содержит красители родамин 6Ж и акрифлавин при следующем содержании компонентов на 1 л среды, мг:

Родамин бЖ 110-130

Лкрифлавин 10-20

Сусло-агар Остальное

1631091

Видовая принадлежность штаммов

Коллекционные номера штаммов

С.maltosa

С.tropicalis

С.rugosa

С.utilis

С,albicans

С.krusei

С.valida

С.lambica

С ° scottii

ВКМ-У-1493, ВКМ У-2328, ВСБ-825

ВСБ-579 (ЦМПМ У-264) ВСБ-665, ВСБ-770, ВСБ-880!

Составитель В. Голимбет

Редактор N. Недолуженко Техред Л. Сердюкова Корректор Т,Палий

Заказ 524 Тираж 363 . Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г.Ужгород, ул. Гагарина,101

Ф+

% 4 +— %% 1 —

ВКМ -1506, ВСБ -569 (ЦМПМ) У-241), ВСБ-744, ВСБ-774 (ЦМПМ-У-197), ВСБ-777 (ЩПЖ У-194), 788 (ЦМПМ У-195), ВСБ-779 (7МПМ v-196), ВСБ-855 (НП-4), ВСБ-899, ВСБ-905, ВСБ-930

ВСБ-166(К-41), BCB-167(К-155) ВСБ-637, ВСБ-909 (ЦМПМ У-291), ВСБ-928 (ЦМПМ У-444), ВСБ-932, ВСБ-933, ВСБ-934, ВСБ-935

BKH У-67, РКМ У-1151, ВСБ-558, ВСБ-576, ВСБ-845, ВСБ-892,. ВСБ-925, ВСБ-926

ВКМ ) -33, ВКМ У-74, ВКМ У-766, ВСБ-651 (ЦМПМ У-277), ВСБ-726 (IN У-.263).

+If Ì.Ф

ВКМ У-2085, ВКМ У-2085 (Р-форма) ВКПГ -4337

ВСБ-896 (ЦМПМ У-286), ВКПГ-2134

Всесоюзная коллекция микроорганизмов, Музей живых культур ВНИИсинтезбелок, Центральынй музей промьппленных микроорганизмов.

Всесоюзная коллекция патогенных грибов.