Штамм гриба реniсilliuм sоliтuм "бежевый" - продуцент солизима

 

Изобретение относится к получению ферментов с помощью микроорганизмов, в частности к получению липолитического фермента медицинского назначения - солизима. Цель изобретения - получение штамма PENICILLIUM SOLITUM ВНИИА 37А с повышенной липолитической активностью. Изобретение заключается в том, что в качестве продуцента солизима используют штамм PENICILLIUM SOLITUM "бежевый" 317А, полученный путем ступенчатого отбора из популяции штамма PENICILLIUM SOLITUM ЛИАТ-080 после ультрафиолетового облучения. В лабораторных условиях на среде, содержащей соевую муку, минеральные соли и подсолнечное масло, штамм проявляет липолитическую активность 35000 ЛЕ/мл. В полупроизводственных условиях активность штамма составляет 22710 ЛЕ/мл.

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К, АВТОРСКОМУ СВИДИ ЕЛЬСТВУ

ГОСУДФРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

00 ИЭ06РЕТЕНИЯМ И ОТНРЫТИЯМ

ПРИ ГННТ .СССР

1 (21) 4416136/30-13 (22) 07 ° 04.88 (46) 23. 05. 90. Бюл. У 19 (71) Московское производственное объединение медицинских препаратов "Мос,медпрепараты" им. Л.Я.Карпова (72) P.Г.Фурсова, Т.Х.Иванова, Л.П.Шуваева, Е.А.Калачева, Л.Н.Романенко, Н.В.Перчихина и Н,А.Лисова (53) 663.15 (088.8) (56) Авторское свидетельство СССР

Ф 562571, кл. С 12 М 15/00, 1975.

Авторское свидетельство СССР

0- 847680, кл. С 12 N 1 5/00, 1981. (54) ШТАММ ГРИБА РЕЯ?СП ЫБМ SOI.ITS!

"БЕЖЕВЬЙ" — ПРО,ЦУЦЕНТ COJIH3HNA (57) Изобретение относится к получению ферментов с помощью микроорганиэИзобретение относится к области получения ферментов с помощью микроорганизмов и может быть использовано в медицинской промышленности при производстве липолитического фермента солизима.

Цель изобретения - получение нового штамма Penicillium solitum с повышенной липолитической активностью.

Штамм Р.solitum "бежевый" ,ВНИИА-317 А получен путем ступенчатого отбора из популяции штамма

ЛИАТ-080, подвергнутого воздействию ультрафиолетовых лучей в дозе

3000 эрг/мм .

Ф

Полученный штамм P. sol itum "бежевый" ВНИИА-317 А имеет следующие

„,SU„„1565887 А1

Й!)5 С 12 М 9/20 // (С 12 N 9/20, С 12 R 1:80) мов, в частности к получению липолитического фермента медицинского назначения — солизима. Цель изобретения — получение штамма Penicillium

so1itum ВНИИА-3 17 А с повьппенной липолитической активностью. Изобретение заключается в том, что в качестве продуцента солизима используют штамм .Penicillium solitum "бежевый"

317 А, полученный путем ступенчатого отбора иэ популяции штамма Penicillium solitum ЛИАТ-080 после ультрафиолетового облучения. В лабораторных условиях на среде, содержащей соевую муку, минеральные соли и подсолнечное масло, штамм проявляет липолитическую активность 35000 ЛЕ/мл. В полупроиэводственных условиях активность штамма составляет 22710 ЛЕ/мп.

Вию

Сл культуральные морфологические и фи- у зиолого-биохимические характеристики и липолитические свойства.

Морфолого-культуральные признаки.

На модифицированной среде РайстриЮ ка колонии 3,9-4,1 см в диаметре, войлочные, радиально-складчатые, бежевого цвета. Центр приподнят.

Зона роста белая шириной 1-2 мм.

Край волнистый. Обратная сторона ко. ричневого цвета, радиально-складчатая. вВ

На среде Чапека с глюкозой колонии 4,0-4,2 см в диаметре бежевого цвета, переходящего к краю колонии в более темный. От слегка приподнятого более пушистого центра отходят ради1565887

СаС03

Подсолнечное масло

011

0,5

0,5

0,1

1,0

0,85

0,025

О,б. Соевая мука

К НРО

МВЗО, ЫаИО

Подсолнечное масло

АС-60

0,5

0,1

5Î

Формула иэ об ре тения

1,0, 0,85

9,6

0 025

0,1

Соевая мука

К НРО

БаИОз

Hg so%

КС1 льные складки, Зона роста беловатоо цвета 1»2 мм. Край волнистый. 3братная сторона темно-коричневого цвета, радиально-складчатая.

На среде Чапека с кукурузным экстрактом колонии 3,5-3,7 см в диаметре, бледно-песочного цвета, войлочно-пушистые, центр слегка приподнят.

Край волнистый темно-песочного цвета, 1 ,сильно радиально-складчатый. Зона

S роста белая 1-2 мм. Обратная сторо,на темно-каштанового цвета, радиаль но-складчатая °

На сусле-агаре колонии 3,2-3,6 см

s диаметре, войлочные, беловатого цвета с единичными складками. Центр приподнят, пушистый," более темного цвета. Край колонии сильна радиальноскладчатый. Зона роста 1-2 мм бело2Q ватого цвета. Обратная сторона коричневого цвета, радиально-складчатая.

Физиолого-биохимические признаки.

Аэроб„ Температурный оптимум биосинтеза (2511) С. Максимум накопления фермента на 6-е сутки роста.

Молоко пептонизирует. На ломтиках картофеля растет хорошо. На клетчатке рост слабый. Крахмал гидролизует,, Желатину не разжижает., Сероводород не 30 образует. Нитраты в нитриды восстанавливает. Реакция на инверсию сахарозы отрицательная. Пигменть меланоидного типа не образует, Штамм растет на среде с глицери- 35 ном,,глюкозой, арабинозой; сахарозой, ксилозой, инозитом, маннитом, фруктовой и рамнозой в качестве единственного источника углерода.

Обладает высокой липолитической активностью при росте на жидких и твердых питательных. средах.

Пример 1. Культуру штамма

Penicillium solitum "бежевый" У 317 А . на кусочке агаризованной модифициро- 45 ванной среды Райстрика вносят в качалочные колбы, содержащие 100 мл ферментационной среды следующего состава, %:

Биосинтез при (25 1) С на качалке при 180-200 об/мин в течение 6 сут, Активность культуральной жйдкости

35000 ЛЕ/мл.

Штамм продуктивнее по липолитической активности производственного. штамма 1 И на 52%.

П р и и е р 2. Проверка нового штамма нродуцеита солизима в полупроизводственных условиях. Биосинтез ведут по схеме: флаконы с зерновым субстратом - посевной аппарат -

- ферментер. Выращивание посевной культуры и ферментацию проводят для посевных аппаратов на следующие среды 9

Соевая мука 1,0

Сахарный песок 1,0

К,НРО, 0,85

КС1 0,1

МАЗО, О, 025

NaN0 0,6

CACO 0 1

Подсолнечное масло йропинол

Для ферментера - на среде, %:

Ферментацию ведут в аппарате

500 л, коэффициент загрузки 0,5 при (25 1) С, постоянной работе мешалки

120 об/мин, ступенчатой аэрации от

0,5 до 1,0 об/об/мин н течение 4 сут.

Активность штамма в полупронзводственных условиях составляет

22710 ЛЕ/мп, превышает по активности производственный штамм на 27,5%.

Штамм Penicillium solitum "бежевый" ВНИИА-317 А — продуцент солнзиMa °