Питательная среда для идентификации энтеробактерии

 

Изобретение относится к медицинской микробиологии, а именно к питательной среде для идентификации энтеробактер. Пель изобретения - повышение чурк твительности среды.Среду готовят следующим образом: взвешивают нее компоненты среды, г/л - лимонно-кислый натрий 5,0-6,0; глюкозу 0,6-0,7; кали1 1 фос4)орно-кислый однозамеп1енный 0,8-1,0; пептон 1,0 - 1,2; цистеин 0,02-0,04; фосфорно-кислый аммоний 0,5 - 0,7; крезоловый красный 0,08-0,1; бромтимоловый синий 0,08-0,1, хлористьм натрий 5,0 - 7,0; растворяют в дистиллироватпшй воде (до 1 л) и подо1-ревают на водяной бане при перемешивании до полного растворения, устанавливают рН 6,3 - 6,8 и перед употреблением разливают в пробирки но 3 мл. Цвет среды желто-коричневый при росте энтеробактерий 1- зменяется на фиолетовый . Среду можно готовить в сухом виде в полистироловых план летках, для стабилизации добавляют 0,8-1,0 г/л поливинилового спирта. Среда чувствительна при работе с разведением не менее 250 млн. кл./мл. 1 табл. ю (У) со со 4;:: О со

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИН е53! С 12 q 1/04

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ! (21) 3901686/28-13 (22) 27.05.85

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (46) 15.09.87. Бюл. Ф 34 (71) Горьковский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии (72) К.Я.Соко:еона, М.И.Рябова и И.В.Соловьева (53) 576. 8. 093. 1 (088. 8) (56) Емельянов П.И. Бактерии рода шигелла и их идентификация, — М.:

Медицина, 1973, с.155.

Спраночник по микробиологическим и вирусологическим методам исследования./Под ред.. !.О.Биргера. — M.:

Медицина, 1982, с.183-215. (54) ПИТАТЕ. 1Ы!АЯ СРЕДА ДЛЯ ИДЕНТИ—

ФИКАЦИИ ЗНТЕРОБАКТЕРИЙ (57) Изобретение относится к медицинской микробиологии, а именно к питательной среде для идентификации энтеробактерий. Цель изобретения повышение чувствительности среды.Сре„„SU„„1337409 А1 ду I отовят следующим образом: взвешивают е3 се компонеееTbI средь3 Г/л .еимонно-к исль3й натрий 5, 0-6, 0; глюкозу 0,6-0,7; калий фосфорно-кислый оде3озамее3ьеннь3е! 0,8 — !, О; пептон 1, О

1,2; цистеин 0,02-0,04; фосфорно-кислый аммоний 0,5 — 0,7; крезоловый красный 0,08-0,1; бромтимолoвый синий 0,08 — 0,1, хлористьей натрий 5,0

7,0; раст33оряют н дистиллированной воде (до л) и подогревают на водяной бане при перемешинании до полного растворения, уc T!3íà!3÷EEâают рН

6,3 — 6,8 и перед употреблением разливают в геробирки по 3 мл. II!3eT среды желто †корпчнен при росте эн— теробактерий изменяется на фиолето— вый. Среду можно готовить в сухом виде н полистиролоных плане33етках, для стабилизации добавляют 0,8-1,0 г/л полив еЕееи "Тово го c IEEEpTp.. С 1)еда чувст†нительна при работе с разе3едением не менее 250 млн. кл./ Ел. 1 табл..:-!мо:«-(o —;-;,;- )ь jj

", ) i 1:"!

6,0

0 7. )«> к о 1

,,i;1Il;(ФО: ФО()((!) -".-!1«!(! ОДНО З;)в

«Г ." (ЫЙ 1»с теи»

Фосфо!>Ио-ки пый

1 М М О> 13 И й

0.7 (резоловый

О,! (Р;(С НЫИ

>ромтимолоный

ИН H Й 1;1триЙ хлозис ть:и

3О; я дистил:(изо;ai;»яя ..,v (ьтаты и

>:::)Я:-:ОНЫЕ (1 Г(п результаты

> 0 м)1» /4ик

С». . г я -- О (С>-г««« „!ЕНР

»>(сд )жкс«ДО

Р И М Р су r.

СOJ,ержание среды, г;.«О.:.- .монно-кис)пый

\ 11PиЙ

:,0 г

О

О,. 65 г о. Июкоза

Ка:ий фосфорчоХ 3 С Х1Ы Й )„!! Н О !3 - -—

:<(J;Pk(Hk>!H

0,9

1,1

0,03! еeг:тон

1ис теин

;>-)орно-ки . — «ый

i 0»»Й

)) (1 О:10:.3:Ь=.1Й,.08

0>09

««е k1щи. > P>;.. «Tk(Ì O.(Ò (-.В,i! . =и ий

". -, I) 1(1-1 - ((О-,,!) г- 1-1

::,0H синий

Натрий хлористый

ВОда ДHCTHJi>:IÈ5,0.«г .3 rk«(;)с 1,;то 1(л ронанная 1; Я»:-(Я Я.)ДИНР!КОНЫ С бы!(я н

),1 !1;> ., «)и О.1,- !-, = де»ием

)с д.:B(яс.мя

2:0 млн/мл.

««,;-г> НЬ1С: 1 я с:>ела -- »e менее

) - . Я> е» ы н

И зоб p! Te 3(He о O(H (я k(."1Р. 1111!«! (Г к:)H микр обиологии и KB(»(тся .т!11))»вЂ” р а»цияль» ОЙ дия »о Г тик )1 >3(ò(! ) )(> «! k; T(« рий.

Цель:-(зобретепия —:.с »(щи«(-!! .i у!!— сгвительности сред(i, Среду готовят следу)оп(им г>б;>»-.

Взвешивают все компоненты: pp;iь, затем приготавлинают рабочии, яс..вор.

Для зтОГО Нср ингредиен". ы пе >":(!pi»(3»»вЂ” ют при подогревании на нодяно 1 б»»е дэ полно со растворения. После,,о! î у=танавливяют рН 6 7 раствора, ."От:-:— новление рН среды 6,3 — 5>8 ;1) о»)в водят Ilp» (IOMoL(H I 07.-»ol о р 3 (»(3 О)) я

НС1 и 107.-ного р ас. -"вора N»01 i. под контролем иономера у»иверсяльногс

ЗВ-74. Среду разливают ех ед!роге н пробирки по 3 мл в каждую, 8» тем н пробирку вносят чистую кулk> T ópó ис— следуемого микроорганиз" а, .после го осуществляют инкубацию !Io е!3о при 37 3. 1 С. Учет pe=-ультатоь про (зГ« нодят через ::8-24 ч„Фиолетоьый; нет расценивают как положительнь Й, >((pr;Tc— коричневый отрица:ельный.

Пример i.,ГDTîíÿò срEду следующего состав а, г>!л .

Лимонно-кислый натрий

Гл(окоза

Калий фосфорнокисль(й однозамещенный

Пептон

Цистеин

Фосфорно-кислый аммоний

Крезоловь(Й крас»ь:й

Бромтимоповый

Испыт ание работы с реды : ров од»ли с помощью контрольного щтаH((» ) «со1:

И-17, Для исключения ",o:»Ioliо>:ожи .. PJHI — ) . ных результатов в контрсле испо:г= -)ун)т S. lie>(rkeri 8516 «(1вет среды н про— бирке с контрольным штаммом F.ОО11

М-17 изменяется из желтс-корич»е †.:.>г( н фиолетовый, н случае с S,flex»pl i

8516 — сставался желто-)i оричневьг., -.е. бе изменения.

:> " - ) - . .-:-и рж»; ие среды, По I л, спь«-аний практически имером ; оложитель1)ос<>вом разведения ирена:IHP» в ""ðîê ; 8

:ipc ro r!(пу срабатывала

«

Р мJ»рд > мл ли!пь и ри ь: !Опытаний !)рактически

-р !1-ieрам>1 «2 . Чунс- ирРды по 07»oщению к,прОТО

-)яза ныг)е„ так как сретип работал только с

» (3 ме«- Р e млрд/ мл > я

О Ч )г(3СТВИтРЛЬНОС". И СРЕДЫ таблице.

1337409

Пределы чувствительности среды в сравнении с прототипом

Концентрация микробных клеток в мл

Контрольный

Приштамм мер

Цитратной среде

Кристснсена (прототип) Цитрата натрия с глюкозой (предлагаемая среда) 1 500 250 125 млрд млн млн млн

S.flexnerz 0a.

2 Е.coli M-17

S.f.lexneri 8516

3 Е. co l i М-17

S.flexneri 8516 фосфорно-кислый однозамещенный, источник азота, источник серы, индикатор, хлористый натрий и воду дистиллированную, отличающаяся тем, что, с целью повышения чувствительности среды, она дополнительно содержит фосфорно-кислый аммоний, в качестве источника азота она содержит пептон, в качестве источника серы — цистеин, в качестве индикатора — крезоловый красный и бромтимоловый синий при следующем количественном соотношении, г/л:

Лимонно-кислый натрий 5,0 — 6,0

Глюкоза 0,6 — 0,7

Калий фосфорнокислый однозамещенный

Пептон

Цистеин

Фосфорно кислыи аммоний

Крезоловый 0,08 — 0,1 красный

Бромтимоловый 0,08 — 0,1 синий

Хлористый 5 0 — 7,0 натрий

Вода дистилли- Остальное рованная

0,8 — 1,0

1,0 — 1,2

0,02 — 0,04

0,5 — 0,7 ях.

Знак (+) в таблице означает завершение положительной реакции в срок до 24 ч, выражающийся в изменении среды в случае с цитратом натрия с глюкозой в фиолетовый цвет, а в случае цитрата Кристенсена — малиновый, 35

Знак (-) означает отрицательный результат, при котором первоначальный цвет среды остается без изменения желто-коричневый.

Предлагаемую среду можно готовить 4п в сухом виде. Для этого рецептуру среды разводят в десятикратно меньшем объеме воды и микродозируют до

0,02 мл в ячейки полимерного планшета, высушивают, стерилиэуют ультра- 4В фиолетом и герметиэируют. В этом случае для стабилизации среды добавляют поливиниловый спирт на этапе растворения в количестве 0,8 — 1 г/л ° В таком виде среда долго хранится, удобна в употреблении, что дает возможность применять ее в полевых условирмула из обретения

Питательная среда для идентификации энтеробактерий, содержащая лимонно-кислый натрий, глюкозу, калий

1 500 250 125 млрд млн млн млн