Способ получения ортоконденсированных производных пиррола

 

Изобретение касается ге цикЛкческих веществ, в частн соединений пирролового ряда формулы 1: ArCH-lCH t -NC-(CH CHV-3-CH-CH-CH-CH-CH-l

Изобретение касается гетероцикЛкческих веществ, в частности соединений пирролового ряда обще формулы 1:

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (511 4 С 07 D 513/04, 471/04, 487/04, ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ Щ

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ Q

К llATEHTY Sq „., (21) 3823253/23-04 (62) 3692010/04 (22) 14.12.84 (23) 12.01.84 (31) 8300454 (32) 13.01.83 (33), FR (46) 07.01.87. Бюл.М (71) Рон-Пуленк Санте (FB) (72) Жан-Луи Фабр, Даниель Фарж, Клод Жамес и Даниель Лаве (И )

А — (СН, 1„- С- СН-CH ! 0

At — СН-(СН 11 -Ж С-(СН=СЯ)Р-3где А СН, $; А Н, ниэший алкил, фенил; ш = 1 или 2; и и р = О или 1, которые как обладающие противотромбоэной активностью и низкой токсичностью могут быть использованы в медицине. Для выявления активности были получены новые вещества пирролового ряда конденсацией 2-хлоракриламида с соединением формулы II:.,80 „„1282818 А 3 (53) 547.759.4.07(088,8) (56) T.A. Benages, S.Ì.Albanico;

2-Chloracrilonitriloas а Сус1оМроlarephile in l,3-Сус1оаИition.—

Т.Org.Chem, v. 43, !978, р.4273. (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ОРТОКОНДЕНСИРОВАННЫХ ПРОИЗВОДНЫХ ПИРРОЛА (57) Изобретение касается гетероцикЛических веществ, в частности соединений пирролового ряда обще формулы 1: где А, А, ш, и р указаны выше, Про1 о цесс ведут при 75 — 95 С в среде (СН эСО) О. Получают кристаллические продукты с т.пл. 190-250 С, Ингибирующая активность по агрегированию тромбоцитов в коллагене — С1- 0

= 2,2-10 мг/л, токсичность 300—

900 мг/кг вшивого веса. табл.

128?8

Изобретение относится к способу получения новых гетероциклических соединений общей формулы (сц СОЗН2 ! N (.СН=Сй р (СИ2Ъ где А — группа -СН вЂ” или атом серы; 10

 — водород или низший алкил

1 или фенил;

m = 1 или 2 п=Оили l р = 0 или 1, 15

Целью изобретения является разработка на основе известных методов способа получения новых химических соединений, обладающих выраженной противотромбозной активностью и низ- 20 кой токсичностью.

Пример 1.. Суспензию из

21,5 г N-никотиноил-3,4,5,6-тетрагидро-2-Н-1,3-тиазин-4-карбоновой 25 кислоты и 32 г 2-хлоракриламида в э

250 см уксусного ангидрида нагревают до температуры около 75 С 15 мин, затем при температуре около 95 C 1 ч.

Затем охлаждают полученную суспензию 30 до температуры около 4 С 1 ч и отделяют кристаллы фильтрованием, промывают три раза 15 см уксусного ан3 гидрида, потом три раза 45 см диз этилового эфира и сушат Ври пониженном давлении (20 мм рт,ст.) при температуре около 20 С в присутствии гидроокиси калия в таблетках. Таким путем получают 16,1 г продукта. Этот продукт растворяют в 750 см з дистил- 40 лированной воды при температуре около 45 С, затем полученный раствор доводят до рН около 8 добавлением бикарбоната натрия. Полученную суспензию охлаждают до температуры около 4 С 70 мин и отделяют кристаллы фильтрованием, промывают три раза э

240 см дистиллированной воды, три раза за 10 см этанола и три раза всего 30 см диэтилового эфира и су- 50 шат при пониженном давлении (20 мм рт.ст.), температуре около 20 С в присутствии гидроокиси калия в таблетках. Таким путем получают 12,9 r продукта с т.пл. 220 С. Этот продукт,, 55 соединенный с 1,3 r продукта от предшествующей операции, растворяют в 800 см кипящего этанола. Полученный раствор, соединяют с 0 5 r

18 2 отбелинающего угля и фильтруют в горячем состоянии; фильтрат охлаждао, ют до температуры около 4 С 1 ч, Появившиеся кристаллы стделяют фильтрованием, промывают три раза всего

60 см этанола, охлажденного до темэ пературы около 4 С, затем три раза

60 см э диэтилового эфира и сушат при пониженном давлении (20 мм рт .ст,), температуре около 20ОС в присутствии гидроокиси калия в таблетках. Таким путем получают 12,6 г 60/-ного 7(3-пиридил)-1,2-дигидро 4Н-пирроло (1,2-с1-1,3-тиазин-5-карбоксамида в форме белых кристаллов с т,пл.

220 С

N-никотиноил-3,4,5,6-тетрагидро

2Н-1,3-тиазин-4-карбоновая кислота может быть получена следующим образом, Раствор из 37,8 г N-никотиноил3,4,5,6-тетрагидро-2Н-1,3-тиазин-4этилкарбоксилата в смеси 80 см водного раствора 5 н натрия и 80 см этанола перемешивают при температуре около 20 С 16 ч. Затем выпаривают растворитель при пониженном давлении (20 мм рт.ст.),, температуре около

50 С. Остаток растворяют в 100 см-1 дистиллированной воды и очищают пропусканием полученного раствора через

630 г смолы Дауекс 50 ЧХ-2 (50—

100 мещ), содержащейся в колонне диаметром 4,5 см. Производят элюированде 4000 смэ дистиллированной воды, затем при помощи смеси воды и метанола (по объему 50-50), потом

2000 см метанола, затем 2000 см э дистиллированной воды. Все соответствующие фракции выделяют. Шесть следующих фракций по 1000 см з каждая, образующиеся от элюирования при помощи 2 -ного водного раствора пиридина, соединяют, концентрируют досуха при пониженном давлении (20 мм рт,ст,), температуре около 50 С. Остаток поглощают в 150 см этанола и выпаривают растворитель при пониженном давлении (20 мм рт.ст.), температуре около 50 С. Эту операцию повторяют один раз. Остаток в конечном счете отбирают и растворяют в

350 см кипящей смеси этанола и воды (60-40 по объему). Полученный раствор присоединяют к 0,5 r отбеливающего угля и фильтруют в горячем состоянии; фильтрат.охлаждают до температуры около 4 С в течение часа..

1282818

Появившиеся кристаллы отделяют фильтрованием, промывают три раза 60 см э смеси этанола и воды (60-40 по объему), затем три раза 60 см Э этанола и сушат при пониженном давлении 5 (20 мм рт.ст,), температуре около

20 С в присутствии гидроокиси калия в таблетках, Таким путем получают

24,2 r N-никотиноил-3,4,5,6-тетрагидро-2Н-1,3-тиазин-4-карбоновой кислоты в форме белых кристаллог. с т. пл. 214 С, N-никотиноил-3,4,5,6-тетрагидро2Н-1,3-тиазин-4-этилкарбоксилат может получаться следующим образом. 15 !

К суспензии 37,2 г хлоргидрата

3 4 5 б-тетрагидро-2Н-1,3-тиазин-4этилкарбоксилата в 350 см хлороформа добавляют за 15 мин при температу- 20 ре около 20 С смесь 75 г триэтиламина и 100 см хлороформа. К полученному

3 раствору добавляют за 10 мин при температуре около 20 С, 50,4 г хлоргид рата хлористого никотиноила. Реакци- 25 онную. смесь нагревают при температуре около 65 С 1 ч 45 мин, затем перемешивают при температуре около 20 С

16 ч, Реакционную смесь промывают три раза 600 см дистиллированной 30 воды, затем три раза 600 см насыщенного водного раствора бикарбоната .калия, сушат на безводном сульфате магния, присоединяют к 0,5 г отбеливающего угля, фильтруют и концентрируют при пониженном давлении (20 мм о рт,ст.), температуре около 50 С.

Таким путем получают 52 г продукта.

Этот продукт хроматографируют на колонне диаметром 5,2 см. содержащей 10

520 r двуокиси кремния (0,063—

0,2 мм), отбирая фракции 500 см

Первую фракцию, образующуюся от элюирования смесью циклогексана и этилацетата (по объему 50-50), выделяют. g5

Три следующие фракции, образующиеся от элюирования смесью этилацетата и циклогексана(по объему 50-50)„ две следующие фракции, образующиеся от элюирования смесью этилацетата и циклогексана (по объему 70-30), и следующую фракцию, образующуюся от элюирования смесью этилацетата и циклогексана (по объему 80-20), соединяют и концентрируют досуха при пониженном давлении (20 мм рт,ст.), температуре около 50 С, Таким путем получают 37,8 г N-никотиноил-3,4,5, 6-тетрагидро-2Н-1,3-тиазин-4-этилкарбоксилата в форме желтого масла (Я вЂ”вЂ” 0,33; хроматография на тонком слое силикагеля; растворитель: этилацетат-циклогексан (80 — 20 по объему)) .

Хлоргидрат 3,4,5,6-тетрагидро2Н-1,3-тиазин-4-этилкарбоксилата получают следующим образом.

Насыщают в течение 4 ч при температуре около 20 С суспензию 47,7 г

3,4,5,6-тетрагидро-2Н-1,3-тиазин-4карбоновой.кислоты в 250 см этанола потоком сухой соляной кислоты.

Суспензию перемешивают три дня при температуре около 20 С, затем нагревают при перемешивании, температуре около 80 С три ч и 20 мин. После охлаждения полученного раствора до температуры около 4 С появившиеся кристаллы отделяют фильтрованием, промывают три раза 30 см этанола, охлажденного до температуры около

4 С, затем три раза 120 см цизтилового простого эфира и сушат при пониженном давлении (20 мм рт„ст,), температуре около 20 С в присутствии гидроокиси калия в таблетках. Таким путем получают 37,2 r хлоргидрата

3,4,5,6-тетрагидро-2Н-1,3-тиазин-4зтилкарбоксилата в форме белых кристаллов с т.пл. 185 С, Пример 2. Работая как в примере 1, но на основе И-никотиноил-4тиазолидинкарбоновой кислоты, можно получить 5-(3-пиридил)1Н, ЗН-пиррол

1.1,2-.с1-7-тиазолкарбоксамид с т. пл. 215ОС.

N-никотиноил-4-тиазолидинкарбоновую кислоту получают следующим образом.

К раствору 400 r 4-тиазолидинкарбоновой кислоты и 613 r тризтиламина в 4500 см хлороформа добавляют

3 час при 30-52 С, 534 г хлоргидрата хлористого никотиноила. Полученный раствор нагревают при температуре около 64 С 4 ч. После перемешивания при температуре около 20 С 16 ч, появившиеся кристаллы отделяют фильтрованием, промывают три раза 1500 см хлороформа, затем три раза 1500 см з диэтилового эфира и сушат при пониженном давлении (20 мм рт.ст.), температуре около 20 С в присутствии соединения калия в таблетках. Таким путем получают 403 г И-никотиноил4-тиазолидинкарбоновой кислоты в форме белых кристаллов с т.пл, 190 С.

5 12828) 8

Пример 3, Работая как в примере 1, но на основе N-никотиноил-1-пролина, можно получить 5-(3лиридил)-2,3-дигидро-)Н-7-пирролизинкарбоксамид с т.пл. при 210 С.

Пример 4. Работая как в при- 1 мере 1, но на основе N-никотиноил- .

1,4-тиазин-3-карбоновой кислоты, можно получить 6-(3-пиридил)-3,4дигидро-1-Н-пиррол t),2-с)-1,4-тиа- 10 зин-8-карбоксамид с т.пл, 192 С, N-никотиноил-1,4-тиазин-3-карбоновая кислота получается следующим образом.

Раствор 2,8 г N-никотиноил-l,4- 15 тиазин-3-этилкарбоксилата в смеси

Э ь

25 см этанола и 10 см водного раствора 2 н натрия перемешивают при температуре около 20 С 3 ч. Затем выпаривают растворитель при понижен- 20 ном давлении (20 мм рт.ст.), температуре около 50 С. Полученный продукт растворяют в 50 см дистиллированной воды и очищают пропусканием этого раствора через 30 г смолы Дауекс

50WX-2(50-100 мещ), содержащейся в колонне диаметром 1,6 см. Первую фракцию, образующуюся от элюирования дистиллированной водой, вторую фракцию, образующуюся от элюирования ме- З0 танолом, и третью фракцию, образую-,.. ющиеся от. элюирования водным 2 .-ным раствором пиридина. Две следующие фракции, образующиеся от элюирования водным 2 .-ным раствором пиридина 35 соединяют и концентрируют досуха при пониженном давлении (20 мм рт,ст.), температуре около 50 С. Таким путем получают 2,3 r сырого продукта ° Этот продукт растворяют в 50 см З кипящего 40 метанола и полученный раствор охлаждают до температуры около 4 С 1 ч, Появившиеся кристаллы отделяют фильтрованием промывают два раза 100 см Э

1 з метанола, затем три раза 45 см оки- 45 си изопропила и сушат при пониженном давлении (20 мм рт.ст ° ) и температуре около 20 С в присутствии гидроокиси калия в таблетках. Таким путем получают 1,5 r N-никотиноил-1,4-ти- 50 азин-3-карбоновой кислоты в форме белых кристаллов с т.пл. 212 С.

N-никотиноил-1,4-тиазин-3-этилкарбоксилат получают следующим образом.

К раствору 8,8 r 1,4-тиазин-3этилкарбоксилата и 10,1 г триэтиламина в 125 см З хлороформа добавляют в течение 25 мин при 24 — 38 С

8,9 г хлоргидрата хлористого никотиноила. Перемешивают полученный раствор 3 ч при температуре около 20 С, затем добавляют последовательно

0,1 г триэтиламина, потом за 15 мин при 24 — 36 С 8,9 г хлоргидрата хлористого никотиноила. Полученный раствор перемешивают 16 ч при темо пературе около 20 С, затем 2 ч при кипении. Реакционную смесь охлаждают до температуры около 20 С, соединяют со. смесью 250 см З хлороформа и 100 см дистиллированной воды.Органическую фазу отделяют декантированием, промывают 100 см дистиллиро9 ванной воды, затем два раза 300 см з водного раствора 2 н натрия и два раза 200 см дистиллированной воды, сушат на безводном карбонате калия, присоединяют 0,5 r отбеливающего угля, фильтруют и концентрируют досуха при пониженном давлении (20 мм рт.ст.) при температуре около 60 С.

Таким путем получают 17,5 r сырого продукта. Этот продукт хроматографируют на колонне диаметром 6 см, содержащей 480 r двуокиси кремния (O,04-0,063 мм). Элюируют смесью этилацетата и метанола (98-2 по объему) при давлении 0,5 атм, отбирая фракции по 100 см . Первые 14 фракз ций удаляются; следующие девять фракций соединяются и концентрируются досуха при пониженном давлении (20 мм рт,ст.) и температуре около

60 С. Таким путем получают 9,6 г

N-никотиноил-1,4- тиазин-3-этил-карбоксилата в форме желтого масла.

R = 0,35; хроматография на тон1 ком слое силикагеля; растВоритель: этилацетат-метанол (98-2 по объему), Пример 5. Работая как в примере 1, но на основе N-ГЗ-(3-пиридил)-акрилоил)-4-тиазолидинкарбоновой кислоты, можно получить 5-(2(3-пиридил)-винил)-1Н, ЗН-пиррол 1,2-с)-7-тиазолкарбоксамид с т. пл, 242 С.

N-f3!.3-пиридил)-акрилоил)-4-тиазолкарбоновая кислота получается следующим образом.

К раствору 22,5 г 4-тиазолидин55 карбоновая кислота в смеси 47 см: триэтиламина и 250 см хлороформа добавляют 30 мин при 20 — 35 С

34,1 г хлоргидрата хлористого 3-(3пиридил)-акрилоила.Реакционную смесь! 282818

7 нагревают при флегме 16 ч, затем концентрируют досуха при пониженном давлении (20 мм рт,ст.). Полученный з остаток., соединенный с 500 см дистиллированной воды, поддерживают при флегме. После присоединения 1 r отбеливающего угля смесь фильтруют в горячем состоянии и фильтрат охлаждают до 4 С 16 ч. Появившиеся кристаллы отделяют фильтрованием, промывают два раза всего 100 см дистиллиэ рованной воды, и один раз 30 см этанола, потом сушат при пониженном давлении (20 мм рт.ст.) в присутствии гидроокиси калия в таблетках. при температуре около 20 С, Таким путем получают 21,1 г сырого продукта с т.пл. 173 С. Этот продукт растворяют в 400 см кипящего этанола. Полу3 ченный раствор соединяют с 1 r отбеливающего угля и фильтруют в горячем состоянии. Фильтрат охлаждают до температуры около 4 С 16 ч. Появившиеся кристаллы отделяют фильтрованием, промывают два раза всего 40 см этанола и сушат при пониженном давлении (20 мм рт,ст.) при температуре около 20 С в присутствии гидроокиси калия в таблетках, Таким путем получают 13,5 г Н-(3-(3-пиридил)-акрилоил)-4-тиазолидинкарбоновой кислоты с т.пл, 176 С, Хлоргидрат хлористого 3-(3-пиридил)-акрилоида получают следующим образом.

200 см >хлористого тионила добавляют 15 мин к 50 г 3-(3-пиридил)акриловой кислоты. Затем реакционную смесь нагревают при флегме 5 ч, Избыток хлористого тионила подвергают перегонке, затем концентрируют реакционную смесь досуха после присоединения 300 см безводного цикло3 гексана. Эта последняя операция повторяется один раз. Полученный остаток соединяют с 200 см хлороформа и нагревают при флегме 15 мин. После охлаждения кристаллы отделяют фильтрованием, промывают один раз 50 см з хлороформа и два раза 200 см гексаЭ на, затем сушат при пониженном давлении (20 мм рт.ст.) в присутствии гидроокиси калия в таблетках при температуре около 20 С. Таким путем получают 55 r хлоргидрата хлористого

3-(3-пиридил)-акрилоила с т,пл.

187 С.

Пример 6. Работая как в примере 1, но на основе N-никотиноил2-фенил-4-тиазолидинкарбоновой кислоты, можно получить 3-фенил-5-(3-пиридил)-1Н,ЗН-пиррол 1.1,2-c ) 7-тиазол карбоксамид с т.пл, 250 С, N-никотиноил-2-фенил-4 -тиазолидинкарбоновая кислота получается сле1Р дующим образом.

К раствору 94,2 г 2-фенил-4-тиазолидинкарбоновой кислоты и 100 г триэтиламина в 1120 см хлороформа доз

f5 бавляют в течение 20 мин при 32

54 С 88,1 г хлоргидрата хлористого никотиноила. Полученный раствор нагревают при температуре около 63 С

5 ч, затем перемешивают при темпера20 туре около 20 С 16 ч. Продукт кристаллизуют. Суспензию охлаждают до температуры около 4 С ч. Появившие. ся кристаллы отделяют фильтрованием, промывают три раза 300 см хлоро3

25 форма и сушат при пониженном давлении (20 мм рт.ст.) и температуре о, около 20 С в присутствии гидроокиси калия в таблетках. Таким путем получают 145 г сырого продукта с т.пл.

30 150 С. Этот продукт суспендируют в

750 см дистиллированной воды. Крис3 таллы отделяют фильтрованием, промывают три раза всего 750 см дисз тиллированной воды и сушат на воздухе.

35 Таким путем получают 90,9 г продукта с т.пл. 182 С. 15 r этого продукта з растворяют в 200 см кипящего этанола. Полученный раствор присоединяют к

0,5 г отбеливающего угля и фильтру40 ют в горячем состоянии. Фильтрат о охлаждают до температуры около 4 С

1 ч. Появившиеся кристаллы отделяют фильтрованием, промывают два раза всего 50 см этанола и три раза

45 всего 75 см диэтилового простого эфира и сушат при пониженном давлении (20 мм рт.ст.) при температуре около 20 С в присутствии гидроокисй калия в таблетках, Таким путем по50 лучают 11,4 г N-никотиноил-2 †фенил4-тиазолидинкарбоновой кислоты в форме белых кристаллов с т.пл. 186 С, Пример 7. Работая как в при мере 1, но на основе N — никотиноил-2метил-4-тиазолидинкарбоновой кислоты, можно получить 3-метил-5(З-пиридил)-1H,ЗН-пиррол11,2-с1-тиазолкарбоксамид с т.пл, 170 С.

9 128281

N-никотиноил-2-метил-4-тиазолидинкарбоновую кислоту получают следующим образом.

К суспензии 44,1 г 2-метил-4тиазолидинкарбоновай кислоты и з

Ф

6l,8 r триэтиламина в 500 см хлороформа добавляют 25 мин, при 47 С

53,4 г хлоргидрата хлористого никотиноила. Полученную суспензию нагревают при температуре около 65 С 2 ч 10 и 45 мин затем полученный раствор перемешивают при температуре около

О

20 С 16 ч. Растворитель выпаривают при пониженном давлении (20 мм рт,ст.) при температуре около 50 С и полу- 15 ченный остаток суспендируют в

300 см ацетона. После 2 ч перемешивания около 20 С появившиеся кристаллы отделяют фильтрованием проз

Э мывают два раза 400 см ацетона 20 и сушат при пониженном давлении (20 мм рт,ст,), температуре около

20 С в присутствии гидроокиси калия в таблетках. Полученное твердое вещество суспендируют в 250 см диск тиллированной воды и появившиеся кристаллы отделяют фильтрованием, промывают три раза 450 см дистиллиз рованной воды и три раза 60 см ацетона, сушат при пониженном давле- 30 нии (20 мм рт,ст.) и температуре около 20 С в присутствии гидроокиси калия в таблетках. Таким путем полуФ чают 36,5 г N-никотиноил-2-метил-4тиазолидинкарбоновой кислоты в форме кристаллов кремового цвета с т.пл.

190 С.

Пример 8. Работая как в примере 1, но на основе N-никотино-,щ ил-2-пиперидинкарбоновой кислоты, можно получить 3-(3-пиридил)-5,6,7, 8-тетрагидро-1-имидолизинкарбоксамид с т.пл. 184 С.

N-никотиноил-2-пиперидинкарбоновую кислоту получают следующим образом, Раствор 34,1 г N-никотиноил-2этилпиперидинкарбоксилата в смеси

130 см водного раствора 2 н натрия 0

3 и 325 см этанола перемешивают при о температуре около 20 С 16 ч, Растворитель выпаривают затем при пониженном давлении (20 мм рт.ст,), температуре около 60 С. Полученный оста- 55 ток растворяют в 250 см дистиллированной воды. Полученный мутный раствор присоединяют к .0,5 г отбеливающего угля и фильтруют. Фильтрат, 8 l0 поддерживаемый при 20 С доводяг до рН около 3 добавлением 60 см з водного раствора 4 н соляной кислоты. Полученную суспензию перемешивают при температуре около 20 С 1 ч и кристаллы отделяют фильтрованием, промывают з четыре раза 200 см дистиллированной воды, три раза !50 см ацетона и один раз 50 см здиэтилового эфира, затем сушат при пониженном давлении (20 мм рт.ст.), температуре около

20 С в присутствии гидроокиси калия в таблетках. Таким путем получают

14,8 г N-никотиноил-2-пиперидинкарбоновой кислоты в форме белых кристаллов с т.пл, 194 С, N-никотиноил-2-этилпиперидинкарбоксилат получают следующим об— разом.

К раствору 72,9 г 2-пиперидинэтилкарбоксилата в 1120 см хлороформа добавляют сначала 182 г триэтилами на при 20 — 31 С, затем 35 мин при

26 — 50 С 160,2 г хлоргидрата хлористого никотиноила. Полученную суспензию перемешивают при температуре около 20 С 16 ч, затем промывают пять раз всего 1500 см дистиллированной

3 воды, сушат на безводном сульфате магния, присоединяют 0,5 r отбеливающего угля, фильтруют и концентрируют досуха при пониженном давлении (20 мм рт,ст,) при температуре около 60 "С. Таким путем получают 174 г сырого продукта, который хроматографируют на колонне диаметром 8 см, содержащей 1,740 r двуокиси кремния (0,063-0,2 мм), элюируя смесями циклогексана и этилацетата и отбирая фракции 1000 см . Первые пять фракэ ций, образующиеся от элюирования смесью циклогексана и этилацетата (80-20 по объемам), следующие пять фракций, образующиеся от элюирования смесью циклогексана и этилацетата (70-30 по объемам), следующие семь фракций, образующиеся от элюирования смесью циклогексана и этилацетата (60-40 по объемам), и следующую фракцию, образующуюся от элюирования смесью циклогексана и этилацетата (50-50 по объемам), удаляют. Следующие восемь фракций, образующиеся от элюирования смесью циклогексана и .этилацетата (50-50 по объемам), и следующие семь фракций, образующиеся от элюирования чистым этилацетатом, соединяют и концентрируют досуха при

Агрегация в коллагене

CI мг/л

so

При- Токсичность мер (мыши)Ал

-мг/кг п.о.

300-900

300-900

300-900

2,2

0,5

) 900

4,5

300-900

300-900

100-300

300-900

0,7

11 128281 пониженном давлении (20 мм рт.ст,), при температуре около 60 С. Таким путем получают 99,3 r Б-никотиноил2-этилпиперидинкарбоксилата в форме оранжевого масла, -5 (B = 0 46 хроматография на тонком слое силикагеля; растворитель: . этилацетат).

Фармакологические испытания °

Описание тестов, 10

Изучение in vitro ингибирования агрегации тромбоцитов, вызванной коллагеном, Агрегирование тромбоцитов, богатой тромбоцитами плазмы кролика, 15 вызванное суспенэией коллагена при

37 С при перемешивании, измеряется по увеличению светопропускания через смесь;

Свежую и содержащую цитрат кровь 20 кролика центрифугируют при 100 0

20 мин при 15 С. Таким образом получают обогащенную тромбоцитами плазму .(ОТП), которая содержит минимально

600000 тромбоцитов/мм з

Вводят 0,2 см ОТП в трубку иэ поз листирола, содержащую силиконизированный стержень из мягкого железа, и добавляют 0,035 см з буфера трис-HCt.

0,05 М (рН = 7,4). Содержимое трубки интенсивно перемешивают и инкубируют 10 мин при 37 С. После этой предварительной инкубации добавляют

0,025 см суспензии коллагена концентрации 25 мг/л. Светопропускание ОТП 35 измеряется в агрегаметре 10 мин.

Рассчитывают разницу TN между пропусканием плазмы до начала агрегирования и пропусканием плазмы, которое наблюдают во время t максимума пропуска- 40 ния кривой агрегирования.

Для изучения янгибирующей активности продукта по отношению к агрегированию тромбоцитов, вызванному 45 коллагеном, 0,025 см эбуфера трисНС1 0,04 M (рН = 7,4) заменяют из

0,025 см исследуемого продукта, растворенного в том же буфере. После предварительной инкубации 10 мин при 37 С добавляют суспензию коллагена.

Для каждой концентрации С исследуемого продукта рассчитывают различия ьТс(пропускание до начала агрегиро- 55 вания минус пропускание во время С).

Тогда рисуют кривую, дающую .ггТс в зависимости от с, выраженной в кг/л реакционной среды. Точка кривой

8 12 д Тс = f(c), ордината которой равна

ЬТИ/2, соответствует абсциссе с

С1, которая означает концентрацию продукта, вызывающую ингибирование 507. агрегации, вызванной коллагеном °

Изучение токсичности, Определяют дозу продукта ЛД которая, введенная мышам перорально, вызывает гибель 507. их. Результаты испытаний представлены в таблице.

Формула и э о б р е т е н и я

Способ получения ортоконденсированных производных пиррола общей формулы;

@, С0 Н

1 : N t (СД, Д (СH=СH) p где А — группа -СН д или атом серы;

R — водород или низший алкил

1 или фенил;

m= l или2; п=Оили1; р=Оили1, о т л и ч а ю щ и и я тем, что соединение общей формулы

Ъ с00Н

N г (сйг п сО-(СН= СН) р

1282818 14 действию с 2-хлоракриламидом в уксусном ангидриде при 75-95 С.

l3 где А, R,, m, п и р имеют вышеука,э эанные значения, подвергают взаимоСоставитель Б.Горин

Редактор Г.Гербер Техред И.Попович Корректор О. Луговая

Заказ 7292/60

Тираж 371 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д.4/5.Производственно-полиграфическое предприятие, г.ужгород, ул.Проектная,4