Способ определения биологической активности нуклеозидов

Авторы патента:

G01N33/50 - химический анализ биологических материалов, например крови, мочи; испытания, основанные на способах связывания биоспецифических лигандов; иммунологические испытания (способы измерения или испытания с использованием ферментов или микроорганизмов иные, чем иммунологические, составы или индикаторная бумага для них, способы образования подобных составов, управление режимами микробиологических и ферментативных процессов C12Q)

СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ БИОЛОГИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ НУКЛЕОЗИДОВ путем, культивирования микроорганизмов на питательной среде с добавлением нуклеозидов и последующей оценкой изменения физиологического состояния культивируемых клеток, отличающийся тем, Что, с целью упрощения способа, проводят культивирование подвижных морских микроводорослей в среде Гольдберга, усиленной в 10 раз и приготовленной на морской воде соленостью 16-18%, при освещенности 6000-8000 лк и 18-2бс, а оценку изменения физиологического состояния клеток проводят через 2426 ч после внесения их в среду кульш тивирования по скорости движения (/) клеток.

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (l9) (ill

SU (21) 3627896/28-13 (22) 22 ° 07.83. (46) 15.10.85. Бюл. Р 38 (72) В. С. Злобин, В. А. Трофимов, В. В. Дырхеев и С. В. Железнякова (71) Ленинградский ветеринарный институт (53) 6!2.398.145;1(088.8) (56) Лазуркевич 3. В., Алексеев И. В.

Чернецкий В. П. Методы определения биологической активности производных и аналогов пуринов и пиримидинов на мутантах кишечной палочки. Сб. Методы молекулярной биологии. Киев.:

Наукова Думка, 1977. (54) (57} СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ БИОЛОГИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ НУКЛЕОЗИДОВ путем (5 )4А 61 K 31 52 G 01 NЗЗ 50 культивирования микроорганизмов на питательной среде с добавлением нуклеозидов и последующей оценкой изменения физиологического состояния культивируемых клеток, о т л и ч авЂ” ю шийся тем, что, с целью упрощения способа, проводят культивирование подвижных морских микроводорослей в среде Гольдберга, усиленной в 10 раз и приготовленной на..морской воде соленостью 16-18Х, при освещенности 6000-8000 лк и 18-26 С, а оценку изменения физиологического состояния клеток проводят через 24-:

26 ч после внесения их в среду куль тивирования по скорости движения клеток.

1 184

Определение активности 0,001 M инозина при разных способах его получения

2,45

Контроль

5,62

Инозин венгерский

Иноэин сорбцнонный озв ученный

3,94

Иноэин сорбционный неозвученный

2,81

Изобретение относится к медицине и медицинской промышленности, а именно к способам определения биологической и лечебной активности нуклеозидов, являющихся основой лекарственных пре- g паратов, их активным началом.

Цель изобретения вЂ” упрощение и удешевление способа.

Способ поясняется следующим примером. 10

Пример. В питательную смесь, состоящую из морской воды соленостью

177. и среды Гольдберга, усиленной в

10 раз, вносят в опытную серию инозин в количестве 0 01 М, при этом 15 для сравнительной оценки биологической активности берут венгерский и советский инозин ° В контрольную серию инозин не добавляют.

В питательную смесь опытных и 20 контрольных серий, каждая серия в трех повторностях, вносят взвесь клеток микроводорослей, обладающих подвижностью, Рlatymonas чiгiоlis ь в количестве (4-5). 10 клеток íà 2S

100 мл каждой пробы.

Опытные и контрольные пробы по мещают на световую решетку с освещенностью 7000 лк и культивируют при о температуре 22 С. Через 24 ч из каждой пробы отбирают по капле суспензии микроводорослей, помещают в камеру Горяева или Мора и определяют под микроскопом с использованием секундомера время прохождения под- вижной клеткой малого квадрата камеры, имеющего сторону, равную 1/20мм.

Вид инозина и способ получения

541 г

Общее число клеток при определении скорости движения, подсчитанное в малом квадрате, должно быть не менее

7-12 единиц. Это количество обеспечивает достаточно высокую (95X) статистическую достоверность средних величин. Так, как для советского инозина при n = 13 средняя скорость движения клеток составила (5,3+1,8)

xl0 м/с, а для венгерского инозина, -5 в .той же концентрации 0,01 M npu

n = 12 средняя скорость движения кле клеток Platymonas viriolis соответствовала (5,25+1,55)" 10 м/с, в то время как в контроле эта величина

n = 9 составляла (2,3+0,06)" 10 м/с.

Сравнение указанных величин с использованием критерия Стьюдента показало достоверность различия с уровнем значимости 99,9X (t = 5,8 и

5,4 соответственно) .

Из данных, представленных в таблице видно, что наибольшей активно1 стью обладает инозин озвученный, полученный медным способом, Таким образом, предложенный способ позволяет эффективно и достоверно по скорости движения микроводорослей оценивать биологическую эффективность нуклеозидов, например инозина, без дорогостоящих испытаний на мутантах кишечной палочки или животных, выбирать оптимальную технологию и отвергать способы, приводящие к получению неактивных форм лекарственных веществ.

1!84541

Продолжение таблицы

Инозин озвученный, полученный медным способом

6,79

Инозин неозвученный, полученный медным способом

6,69

Заказ 6298/5 Тираж 721 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, И-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул, Проектная, 4

Составитель Н. Гуляева

Редактор Н, Горват Техред А.Ач Корректор М. Демчик

Способ определения биологической активности нуклеозидов

Способ определения метаболитов в биологическом материале // 1157459

Способ определения фибронектина // 1138742

Биоспецифический полимерный адсорбент для выделения протеиназ (его варианты) // 1137388

Способ получения иммуносорбента // 1125549

Способ выделения фибронектина // 1124230

Способ извлечения иммуноглобулинов из биологических жидкостей // 1121619

Способ количественного определения формальдегида // 1097955

Способ определения антиоксидантной активности веществ // 1097264

Способ получения растворимой @ -атфазы // 1070479

Способ определения галактозы в сыворотке крови // 2101705

Изобретение относится к биохимии и ветеринарии и касается способа определения гексоз, например галактозы, в сыворотке крови для ранней диагностики нарушений минерального обмена

Способ определения мочевины и креатинина в биологических жидкостях // 2101706

Изобретение относится к медицине и касается видов патологии или состояний организма, связанных с нарушениями азотистого обмена, особенно при различных видах почечной патологии, обширных хирургических ранах, ожогах

Способ прогнозирования течения ишемической болезни сердца // 2102756

Изобретение относится к медицине и может быть использовано в кардиологии, терапии

Способ оценки состояния больного // 2103692

Изобретение относится к медицине, а именно к клинической биохимии и может быть использовано для диагностики и прогнозирования состояния больного в послеоперационном периоде и при развитии острого воспалительного процесса

Способ прогнозирования продолжительности жизни онкологических больных четвертой стадии заболевания после диагностических хирургических вмешательств // 2104536

Изобретение относится к медицине, в частности к онкологии, и может быть использовано при проведении больным с неблагоприятным прогнозом адъювантных методов терапии

Способ диагностики сахарного диабета // 2104537

Изобретение относится к медицине, в частности к эндокринологии, и может быть использовано для проведения дифференицальной диагностики инсулинзависимого и инсулиннезависимого диабета, состояния их компенсации

Способ прогнозирования цирроза печени у больных с хроническими диффузными заболеваниями печени // 2104538

Изобретение относится к медицине, а именно гепатологии, и предназначено для прогнозирования цирроза печени у больных с хроническими диффузными поражениями органа

Способ оценки микросомальной системы печени при действии ксенобиотиков алкилирующего типа // 2104539

Изобретение относится к области исследования или анализа материалов особыми способами, а именно к способам исследования крови при действии ксенобиотиков, и может быть использовано для оценки микросомальной системы печени после воздействия малых доз иприта и люизита при реальных путях поступления ОВ (отравляющих веществ) в организм, а также при решении задач по уничтожению ХО (химического оружия) в районах военно-химических объектов, в частности по обследованию здоровья населения и обслуживающего персонала в местах по хранению и уничтожению ХО

Прибор для мониторинга параметров взвешенных частиц // 2106627

Изобретение относится к оптико-электронной промышленности и может быть использовано для комплексного исследования параметров взвеси частиц микронных и субмикронных размеров (10-8 - 10-4 м): распределения частиц по группам с определенными размерами, химического состава частиц, скоростей изменения этих характеристик

Способ лечения ишемической болезни сердца // 2107910

Изобретение относится к медицине, в частности, к кардиологии, и может быть использовано для лечения любых клинических вариантов ишемической болезни сердца