Способ получения производных тирозина

i67l722

ОПИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕН ИЯ

К ПАТЕНТУ

Сова Советских

Социалистических

Респфлик (61) Дополнительный к патенту— (22) Заявлено 11.11.76 (21) 2301444/

/2418859/23-04 (23) Приоритет 17.12,75 (32) 02.04.75 (51) М. Кл е С 07 С 163/5

//А 61 К 37/02

Тосударстеениый комитет (31) 39959/75 (33) Япония (43) Опубликовано 30.06.79. Бюллетень № 24 (45) Дата опубликования описания 18.07.79

СССР

llo делам иеобретеиий и открытий (53) УДК 547.964.4.07 (088.8) (72) Авторы изобретения

Иностранцы

Тосаку Мики, Ясухиро Хосокава, Тамоцу Мива, Хироси Фудзита, Масахиде Асано и Сунзо Айбара (Япония) Иностранная ф ирма

«Дайити Сейяку Ко, Лтд» (Япония) (71) Заявятель (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ

ПРОИЗВОДНЫХ ТИРОЗИНА

-О ! соыкснссх

11lC ОК

l н ыснсоок

Изобретение относится к способу получения новых производных тирозина, обладающих физиологической активностью, которые могут найти применение в медицине.

В пептидной химии широко известны способы получения пептидов конденсацией отдельных фрагментов, например карбодиимидный, метод смешанных ангидридов, активированных эфиров и т, д. (1).

Цель изобретения — синтез новых производных тирозина, обладающих биологической активносью.

Поставленная цель достигается описываемым способом получения производных тирозина общей формулы сн, ск, ок ! / соънснсоынснсоон где R — водород или низший алкоксил, заключающихся в том, что соединения формулы где R — низший алкил, подвергают взаимодействию с соединением формулы где R имеет указанные значения, Х вЂ” галоид, оксигруппа, сложноэфир10 ная или ангидридная группа, при температуре от — 15 до +30 С в присутствии конденсирующего агента или акцептора кислоты в среде инертного растворителя с последующим гидролизом полу15 ченного соединения в присутствии кислоты или основания.

Следующие примеры иллюстрируют процесс получения предлагаемых соединений.

В примерах все аминокислоты или приме20 няемые дипептиды находятся в своих оптически активных L-формах, если не указаны другие варианты.

Пример 1. К раствору 4,4 г метил Nбензилилфенилаланил-тирозината в 50 мл метанола добавляют 23 мл 1 н. гидроокиси натрия и раствор перемешивают около 1 ч, Затем реакционную смесь нейтрализуют соляной кислотой, концентрируют и продукт экстрагируют этилацетатом. Экстракт

Зо промывают водой, сушат и упаривают до671722 суха. Остаток кристаллизуют из этилацетата, получают 3,8 г N-бензоилфенилаланилтирозина с т. пл. 191 — 192 С и выходом

87 о/о

СжНа405ХгВычислено, о/о. С 69,13; Н 5,59; N 6,48.

Найдено, о/о. С 68,98; Н 5,72; N 6,37.

Пример 2. К раствору 30 г метил N(4-метоксибензоил) -фенилаланилтирозина в

1 50 мл метанола добавляют 145 мл 1 н. гидроокиси натрия, смесь перемешивают при температуре 50 С около 2 ч.

Реакционную смесь нейтрализуют соляной кислотой, концентрируют, продукт экстрагируют этилацетатом. Экстракт промывают водой, сушат и упаривают досуха.

Остаток кристаллизуют из этилацетата, получают 23,9 г N- (4-метоксибензоил) -фенилаланилтирозина с т. пл. 198 — 200 С и выходом 82о/о.

С26Н2606Х2.

Вычислено, /о. .С 67,52; Н 5;67; N 6,06.

Найдено, /о. С 67,17; Н 5,69; N 5,95.

Пример 3. Раствор 5,39 г N-бензоилфенилаланина, 4,1 г гидрохлорида тирозина, 2,02 г триэтиламина и 2,30 г N-гидросукцинимида в 100 мл смеси хлороформ †тетрагидрофуран (2: 1), охлаждают льдом и добавляют к нему 4,12 г N-дициклогексилкарбодиимида. Смесь перемешивают около 3 ч, затем оставляют при комнатной температуре на ночь. Выпавший осадок отфильтровывают, фильтр ат концентрируют, продукт экстрагируют этилацетатом и экстракт промывают 2о/о-ной соляной кп. слотой, 4о/о -ным бикарбонатом натрия и водой, затем сушат и упаривают досуха, Остаток кристаллизуют из смеси этилацетат — петролейный эфир, получают б,б г метил N-бензоилфенилаланилтирозината с т. пл. 188 — 190 С и выходом 74о/о.

СаоН еО 4.

Вычислено, /о. С 69,94; Н 5,87; N 6,27.

Найдено, /о. С 69,56; Н 6,01; N 6,39.

Этот эфир гидролизуют по примеру 1 с получением Х-бензоилфенилаланилти р озин а.

Пример 4. Раствор 29,9 г N-(4-метоксибензоил) -фенилаланина, 23,2 г гидрохлорида метилтирозина, 10,1 г триэтиламина и 11,6 г М-гидроксисукцинимида в

500 мл смеси хлороформ — тетрагидрофуран (2: 1) охлаждают льдом. К холодному раствору добавляют 20,6 г N,N -дихлоргексилкарбодиимида. Смесь перемешивают около 2 ч и затем выдерживают ночь при комнатной температуре. Осадок отфильтровывают, фильтрат концентрируют. Остаток экстрагируют этилацетатом, экстракг промывают 2о(о -ной соляной кислотой, 4о!о-ным бикарбонатом натрия и водой, затем сушат и упаривают досуха. Остаток кристаллизуют из этилацетата, получают

35 г метил N- (4-метоксибензоил) -фенилаланилтирозина с т. пл. 195 — 197 С и выходом 74 о/о.

СлН вОв Х .

Вычислено, %. С 68,05; Н 5,92; N 5,88. о Найдено, /о. С 67,84, Н 5,92; N 5,57.

Этот эфир можно гидролизовать до

N- (4-метоксибензоил) - фенилаланилтирозина по примеру 2.

П р и м ер 5. К раствору 10 г N-(4-ме10 токсибензоил) -фенилаланина в 100 мл тетрагидрофурана добавляют 3,4 г N-метилморфолина, смесь перемешивают при температуре — 15 С, затем добавляют 4,6 г изобутилхлоркарбоната. Перемешивание

l5 продолжают 30 мин и к реакционной массе добавляют 100 мл смеси 7,8 г гидрохлорида метилтирозина, 3,4 г триэтиламина в

100 мл хлороформа. Полученную массу перемешивают при температуре — 10 С

20 около 2 ч, затем при комнатной температуре 3 ч, Выпавший осадок отфильтровывают, фильтрат концентрируют и экстрагируют этилацетатом. Экстракт промывают 2 /о -ной соляной кислотой, 4 /о -ным

25 бикарбонатом натрия и водой, затем сушат и упаривают досуха. Остаток кристаллизуют из этилацетата, получают 9,9 г метил N-(4-метоксибензоил) - фенилаланилтирозина с т. пл. 195 †1 С и выходом

30 62 о/о

С иН вОоК .

Вычислено, ",о. С 68,05; Н 5,92; N 5,88, Найдено, о/о.. С 68,34; Н 5,77; N 5,91.

Этот эфир может быть гидролизован

З5 по примеру 2 с получением iV-(4-метокснбензоил) -фенилаланилтирозина.

К суспензии 3,79 г метилгидрохлорида фенилаланилтирозина и 0,53 г карбоната натрия в смеси 10 мл воды и 50 мл хлоро4о форма добавляют по каплям 1,75 г 4-метоксибензоилхлорида одновременно с 10 мл, раствора карбоната натрия (0,75 г) при перемешивании и охлаждении льдом. После

2 ч, перемешивания хлороформенный слой

45 отделяют, промывают 5 /о-ной соляной кислотой и водой, сушат и упаривают досуха. Остаток кристаллизуют из этилацетата.

Получают 3,9 г метил N-(4-метоксибензоил) -фенилаланилтирозината с т. пл.

195 — 197 С и выходом 82 /о.

СпН вОоИ .

С 68,05; Н 5,92; N 5,88.

Найдено, /о. С 68,12; Н 6,08; N 5,74.

Полученный эфир может быть гидролизован по примеру 2 до V- (4-метоксибензоил) -фенилаланилтирозина.

Пример 7. Раствор 3,28 г фенилаланилтирозина в 20 мл 1 н. гидроокиси натрия охлаждают льдом. К холодному раствору добавляют по каплям 1,7 г 4-метоксибензоилхлорида и 10 мл 1 н. раствора гидроокиси натрия. После 2 ч перемешивания смесь нейтрализуют соляной кислотой и экстрагируют этилацетатом. Экстракт

671722 промывают водой, сушат и концентрируют досуха. Остаток кристаллизуют из этилацетата, получают 2,6 г N-(4-метоксибензоил) -фенилаланилтирозина с выходом

56%.

Пример 8. К раствору 0,9 г N-(4-метоксибензоил) -фенилаланилтирозина в 10 мл этанола добавляют 10 мл воды, рН доводят до 8,1 гидроокисью натрия и смесь концентрируют досуха.

Получают N- (4-метоксибензоил) -фенилаланилтирозинат натрия в виде порошка, Пример 9. К раствору 20 г N-бензоилфенйлаланилтирозина в 400 мл смеси вода — изопропанол (1: 1), нагретому до .до 40 С, добавляют 200 мл изопропанольного раствора, содержащего 18,8 г изопропилокси алюминия, при перемешивании. Смесь перемешивают при температуре 40 С около 1 ч, затем выдерживают ночь и центрифугируют. Образовавшуюся наверху жидкость сливают, концентрируют и остаток растворяют в изопропаноле. Раствор центрифугируют вновь и всплывшую жидкость отделяют и концентрируют досуха. Остаток растворяют в изопропаноле и водой осаждают 10 г N-бензоилфенилаланилтирозина алюминия в виде порошка с т. пл. 287 С (разложение).

П р и м ер 10. В смеси 80 мл этанола и

30 мл пиридина растворяют 6,54 г метил

N- (3,4-диметоксибензилоксикарбонил) - тирозината. К раствору добавляют 4,41 г дигидрата хлорида кальция. Затем к смеси постепенно добавляют при перемешивании при комнатной температуре 2,27 г борогидрата натрия. Перемешивание продолжают около 3 ч и затем смесь нейтрализуют 3%-ной соляной кислотой. После добавления 250 мл воды реакционную смесь концентрируют в вакууме и осадок экстрагируют этилацетатом. Экстракт промываюг водой, сушат и упаривают досуха. Остаток обрабатывают этилацетатом, получают

3,82 г N- (3,4-диметоксибензилоксикарбонил)-тирозина. Продукт после перекристаллизации из этанола выпадает в виде небольших игольчатых кристаллов с т. пл.

152 — 155 С.

СиНязКОе

Вычислено, %: С 63,14; Н 6,42; N 3,88.

Найдено, %: С 63,30; Н 6,29; N 3,99.

Пример 11. К раствору 733 мг сложного эфира бензоилфенилаланина и N-гидроксисукцинимида в 30 мл тетрагидрофурана добавляют 390 мг метилтирозината при охлаждении льдом, смесь подвергают энергичному перемешиванию при комнатной температуре в течение 3 ч.

Затем концентрируют пр-> пониженном давлении и продукт экстрагируют этилацетатом. Экстракт промывают 2%-ным водным раствором соляной кислоты, затем

4%-ным водным раствором бикарбоната и далее водой, сушат и упаривают досуха.

Зо

35 ты, 4%-ным водным раствором бикарбоната натрия и водой, сушат и упаривают

Остаток перекр исталлизовывают яз смеси этилацетата и петролейного эфира.

Получают 833 мг метил-N-бензоилфенилаланилтирозината с т. пл. 188 †1 С и выходом 932о >.

Пример 12. В 30 мл эфира растворяют 1,86 г,N-бензоилфенилаланилбензойного ангидрида. К раствору добавляют

0,98 г метилтирозината и 15 мл насыщенного водного раствора бикарбоната натрия. смесь энергично перемешивают при комнатной температуре в течение 4 ч. Слой эфира удаляют, промывают 2%-ным водным раствором соляной кислоты и водой после чего сушат и упаривают досуха. Остаток чистят хроматографией на силикагеле (для элюирования используют хлороформ).

Получают 1,16 г метил-N-бензоилфенилаланилтирозината.

П р и м ер 13. В 50 мл смеси хлороформа и тетрагидрофурана (2: 1) растворяют 2,99 г N- (4-метоксибензоил) -фенилаланина, 2,46 г этилтирозинатгидрохлорида, 1,01 г триэтиламина и 1,16 г N-сукцинимида. Смесь охлаждают льдом. После добавления 2,06 г N,N -дициклогексилкарбодиимида смесь перемешивают в течение

2 ч, после чего оставляют на ночь при комнатной температуре. Выпавший осадок отфильтровывают, маточник концентрируют и продукт экстр агируют этилацетатом

Слой этилацетата отделяют и промываюг

2%-ным водным раствором соляной кислодосуха. Остаток перекристаллизовывают.

Получают 3,45 г этил-N-(4-метоксибензол)-фенилаланилтирозината с т. пл. 177—

181 С.

С зНзоОойя.

Вычислено, %: С 68,55; Н 6,16; N 5,71.

Найдено, %: С 68,29; Н6,31; N 5,54.

К раствору 3,0 г этил-N-(4-метоксибензоил)-фенилаланилтирозината в 15 мл ме танола добавляют 14,5 мл водного 1 н. ра. створа гидрата окиси натрия. Смесь пермешивают при 50 С в течение 2 ч. Затем реакционную массу нейтрализуют соляной кислотой и продукт экстрагируют этилацетатом. Экстракт промывают водой, сушат и упаривают досуха.

Остаток перекристаллизовывают с целью отделения этилацетата, получают 2,12 г

N-(4-метоксибензоил)-фенилаланина с т. пл. 198 — 200 С и выходом 78%.

Формула изобретения

1. Способ получения производных тирозина формулы сн; сн, ок — 1 / >-СОЪНСНСО1ЧНСНСООН

671722 нс он нрснсоок

В, I сокнснсск

Составитель В. Волкова

Техред Н. Строганова

Корректор И. Симкнна

Редактор Т. Никольская

Заказ 457/828 Изд, № 381 Тираж 520 Подписное

НПО Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, )К-35, Рауя ская наб., д. 4Д

Тип. Харьк. Фил. пред. сПатеит» где R, — водород или низший алкоксил, отличающийся тем, что соединения формулы где R — низший алкил, подвергают взаимодействию с соединением формулы

10 где R имеет указанные значения, Х вЂ” галоид, оксигруппа, сложноэфирная, ангидридная группа, при температуре от — 15 до +30 С в присутствии конденсирующего агента или акцептора кислоты в среде инертного рас.творителя с последующим гидролизом по- лученного соединения в присутствии кислоты или основания.

Источник информации, принятый во внимание при экспертизе:

1. Шредер 3, Любке К. Пептиды, ч. I, М., «Мир», 1967.