Способ диагностики специфической сенсибилизации организма

 

Союз Советских

Социалистических

Республик

O Il И C A Н И (!660668

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (61) Дополнительное к авт. свид-ву— (22) Заявлено 07.02.77 (21) 2449592/28-13 (51) М. Кл, А 61 В 10/ОО с присоединением заявки Лев

Государственный нотентет

СССР!

III дедам нзобретеннй

N OTIIPbITIIII (23) Приоритет— (53) УДКЛ6!6,07 (088.8) Опх блпковано 05.05.79. Бюллетень Хе 17

Дата опубликования описания !0.05 т9 (72) Автор изобретения

В. Ф. Щеколодкин (71) Заявитель

Ялтинский территориальный Совет по управлению курортами профсоюзов (54) СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ СПЕЦИФИЧЕСКОИ

СЕНСИБИЛИЗАЦИИ ОРГАНИЗМА

Изобретение относится к onласти медицины, а именно иммунологии и может быть использовано д, !я диагностики иммуно-патологических состояний организма.

И вестен спосоо диагностики специфической сенсиоилизацпи организма, заключающийся во взятии пробы крови, культивироваHèè ее с ал. !ергенох! с последую!цим приготовлением мазков (!).

Однако известный способ не обеспечивает высокой достоверности диагностики.

Целью изобретения является повышение достоверности диагностики.

Эта цель достигается тем, что пробу крови с аллергеном культивируют на питательном агаре, готовят мазки-отпечатки через

3 — 5, 50- 60, 110 120 мин от начала культивирования и по изменению физиолого-морфологического состояния клеток в мазках в процессе и llo окончании культивирования див гносцируют и м муно-аллергическое состояние организма.

Способ поясняется следующими примерами.

При.!!ер I. Пробу крови (1,0 мл) больного с обострением хронической пневмонии, имевшего резкоположительную кожную пробу нг стрептококковый аллерген (4 Х 6см) 2 и слабоположительную реакци!о на стафплококковый аллерген (1 Х 1 c!»), разделяк>т на три равные части, две пз которых соединяют со стрептококковым и стафилококко5 вым аллергенами (по 0,1 мл аллергена, содержащего 1 кожную дозу аллергена), тр»тья часть служит контролем. Все трп части крови в пробирках ставят в термостат (—; — 37 С) на,30 мпн. После этого каждую часть крови наносят тонким слоем на поверхность 3 /0-ного мясо-пептонового агара и вновь ставят в термостат (+37 С). Через 5, 60 и 120 мин инкубирования делают мазкиотпечатки, которые после фиксации и окраски llo Романовскому-Гимза просматривают в микроскопе с подсчетом и подразделением форменных элементов белой крови по их функционально-морфологическому признаку.

Данные представлены в табл. 1.

Как видно из табл. 1, исходная картина, белой крови (после 5 мин инкубации) характеризуется следующими количественными показателями: лимфоцитов — 22 /!!, среди которых 2 /o составляли многоядерные лимфоциты, выявляющиеся только после HHкубации крови íà агаре; сегментоядерных лейкоцитов — 72 /о, из которых 3 /, нежизнеспособных и 9О/р клеток, начавших транс660668 формироваться из лимфоцитов; эозинофилов — 3/, и моноцитов — 2 /ц. По истечению 120 мин инкубации состав контрольной части крови характеризуется следующими показателями: лимфоцитов — 21 /р, из которых 7 — многоядерные клетки; сегментоядерных лейкоцитов — 65 /р, но из них 46,1 /р (31 клетка) были уже нежизнеспособными; эозинофилов — 2 /р, базофилов — 1О/р и моноцитов — 12О/, (выявлен скрытый моноцитоз). Таким образом, инкубирование крови на мясо-пептонном агаре способствует изменению картины крови в сторону активации клеток, участвующих в иммунологических реакциях, — лимфоцитов и моноцитов, что выражается в появлении многоядерных клеток и в изменении количественного состава мо- 15 ноцитов.

Культивирование крови на мясо-пептонном агаре после ее инкубации с аллергенами показало, что клетки белой крови реагируют на стрептококковый и стафилококковый аллергены различным образом. В обоих случаях отмечается значительное снижение числа лимфоцитов после 120-мин инкубации на агаре по сравнению с контролем. Выявляется определенное снижение числа жизнеспособных сегментоядерных лейкоцитов и увеличение числа данных клеток, закончивших свое существование (нежизнеспособных) .

Лимфоциты крови при контакте со стафил око кковым аллер геном реагируют после

60-мин инкубации появлением повышенного 30 числа многоядерных клеток и увеличением в 2 раза эозинофильных клеток. Контакт крови со стрептококковым аллергеном приводит к возрастанию почти в 2 раза числа моноцитарных клеток по сравнению с контролем и пробой со стафилококковым аллергеном и уменьшению числа жизнеспособных лейкоцитов через 60 мин после начала культивирования. Таким образом, культивирование крови, сенсибилизированной аллергенами, на мясо-пептонном агаре позволяет на 4в фоне выявляемой измененной картины белой части крови установить специфическое реагирование данных клеток на аллергены, сенсибилизировавшие организм. Различие в действии стрептококкового и стафилококкового алергена заключается в различии образования моноцитарных, эозинофильных и многоялепных лимфоцитов и может свидетельствовать о длительной сенсибилизации клеток к стрептококковому аллергену и формировании ее к стафилококковому аллергену.

Пример 2. Пробу крови больного с хронической вялотекущей пневмонией, осложненной астматоидным компонентом, у которого были отмечены слабовыраженные кожные реакции на стрептококковый (0,9 Х 00,8 см) и стафилококковый (1,1 X 1,0 см) аллергены, аналогично примеру 1, инкубируют с указанными аллергенами. Подсчет форменных элементов белой крови после инкубации ее на мясо-пептонном агаре, производства мазков-отпечатков и просмотра их в микроскопе выявил результаты, которые представлены в табл. 2.

Из табл. 2 видно, что контакт крови со стрептококковым аллергеном приводит к появлению значительного числа многоядерных лимфоцитов, резкому падению числа жизнеспособных сегментоядерных лейкоцитов и, соответственно, увеличению числа нежизнеспособных клеток данного типа лейкоцитов и наконец, увеличению числа моноцитарных клеток. Характеристика влияния стрептококкового аллергена на лейкоциты свидетельствует о специфическом его действии на функциональную способность лимфоцитов, проявляющуюся в утрате свойства трансформироваться в сегментоядерные лейкоциты, появлении значительного числа клеток моноцитарного ряда и многоядерных лимфоцитов.

Предлагаемый способ позволяет значительно повысить разрешающую способность диагностики иммунно-патологических состояний организма, вызванных различными инфекционными агентами.

Способ позволяет более точно диагностировать степень и специфичность действия исследуемого аллергена на клетки белой крови, что способствует улучшению качества проводимого лечения. о о о о о о

Ю о о

Ф

А х

1»

Ю о и

I о

И о

Ю о о

Ф ь0 х

Я х М

lO о о

Ю о о

I о х и m

Q C0 х О е е а,m

Х а ха

A

t» х х о х о

" ;

-в о х х (9 о (T) Э

l х х а

f

К о >

I„О

Э о

\\

А

Е»

И о

-в

Е х

1 о охо

1» о

Э (р й

И I

g) х О х И х в о 3

h°xa,о

m o а.а> авхх

I.O g8

1 щ х (ц х М х

on

1 1 ф и о

> o

4 к ха а.вхх

I.O 2

1 с9

2м 2

ml l h4 å хо

Kazoo

М х а х х

1.-В аохц

I о

Э И

% х о

4 х

o N o а О а охх

1«-в МИ

h I

Г» а

o z хх.а

Л к

1 х о х и х ох>

660668 а—

1 о са а

1» Ж (9 а о „ а

1 о а, о

660668

Фор.иуiгQ Ll 306PeTeH11é

Составитель С. Малютина

Техред О. Луговая Корректор В. Синицкая

Тираж 671 Подписное

Редактор Н. Грязнова

Заказ 2326I4

1j H И И П И Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж вЂ” 35, Раушская наб., д. 4, 5

Филиал ППП «Патент», г. Ужгород, ул. Проектная, 4

Способ диагностики специфической сенсибилизации организма путем отбора пробы крови, культивирования ее с аллергеном с последующим приготовлением мазков, от.гичаюи ийся тем, что, с целью повышения достоверности диагностики, пробу крови с аллергеном культивируют на питательном агаре, готовят мазки-отпечатки через 3 — 5, 50- — 60, 110 — 120 мин от начала культивирования и по изменению физиолого-морфологического состояния клеток в мазках в процессе и по окончании культивирования диагносцируют иммунно-аллергическое состояние организма.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Современная практическая аллергология. Под ред. Адо A. Д. и Польнера Л. Л.

М., 1963, с. 98 — 99.