Способ получения гриппозного диагностикума

(61) Дополнительное к авт. свид-ву (22) Заявлено 16.07 74 (21)2044803/28-1 с присоединением заявки № (23) Приоритет (43) Опубликовано 15.04.78. Бюллетень №1

{45) Дата опубликования описания 20.03.78 (51) М. Кл.

А 61 К 39/18

Гооударстввнный ноинтвт

6оввтв Моннстров СИР

flo гонон нооорвтоннй н открытой (53) УДК 576.8. .077 (088,8) (72) Авторы изобретения

Р. И. Авророва и E. П. Москаленко (71) Заявитель

Ростовский государства ный медицинский институт (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ГРИППОЗНОГО

ДИАГНОСТИКУМА

Изобретение относится к медицине и может быть применено при серологическнх исследованиях на грипп.

Известен способ получения вирусного диаг- 5 ностикума путем выращивания при 37 С вируса гриппа на культуре клеток с последующим отделением вируссодержашей жидкости. Однако такой способ трудоемок и сложен по технологиии. .10

С целью упрощения процесса вирус ипкубируют с дрожжевой культурой Ы сс)1атол цсив

c6l eYisLo. течение З-5 суток, пересевают на мясо-пептонный агар и культивируют 15 в течение 2-3 суток.

4-5 мл трехчасовой бульонной культуры дрожжей Sacchavomgces cepevisiae добавляют

0,5 мл аллантоисной жидкости, содержащей вирус гриппа А> с геммагглютинирующим титром 1/80-1/160, выращивают в течение З-5 суток при 3-5 суток при 35-37 С, . затем выросшую культуру пересевают на мясо-пептонный агар и.выдерживают в течение 2 - 3 суток прп той же температуре.

Агаровую культуру смывают физиологическим раствором и готовят взвесь, содержащую

10 млрд микробных тел в 1 мл (по оптическому стандарту). Полученная взвесь яв ляется гриппозным диагностикумом, пригодным для постановки серологических реак ций.

При совместном ннкубировании с вирусом гриппа А дрожжи оСтсйататусво Cefevievcte, приобретают сохранившуюся в пассажах ,способность склеиваться и специфически расклеиваться гомологичной гиппозной сыворот кой, что позволяет использовать их в реакции расклеивания дрожжей с целью определения антител к вирусу гриппа Аъ в массовых исследованиях.

Диагностикум применяют следующим образом.

К, 0,2 мл разведенной на физиологическом растворе исследуемой сыворотки добавляют 0,2 мл диагностикума и оставлятот на

602 183

Составитель С. Малютина

: Редактор Л. Волкова Техред 3. фанта. Корректор А. Власенко

Заказ 1690/3 Тираж 703 П одпис нсе

ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб„д. 4/5

Филиал ППП Г1атент, г. Ужгород, ул. Проектная, 4

2-3 ч при 20-22оС. Реакцию ставят в пласгйнах из пле:сигласа, установленных на темном фоне. Дрожжи, взаимодействуя с антителами к вирусу гриппа Ао, специфически расклеиваются, а при взаимодействии с антителами к вирусам гриппа А,, А и В это явление не наблюдается. По осадку на дне лунки в виде диска или колечка с ровными краями определяют наличие антител к вирусу гриппа А о . Осадок в виде зо тика свидетельствует об отсутствии антитрл к вирусу гриппа А .

Ф ормула изобретения

Способ получения гриппозного диагностикума путем инкубации вируса гриппа с чувствительной системой с последующим отделением вируссодержашей жидкости, о т л и— ч а ю ш и и с я тем, что, с целью упрощения процесса, вирус инкубируют с дрожжевой турой Saccharo qces cerew è(È в течение 3 > суток, пересевают на мясо-пептонный агар и культивируют в течение 2-3 суток.