Способ получения анти-антигемоцитарной сыворотки
О П И С А Н И Е (tt)56562I
ИЗОБРЕТЕНИЯ
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ
6отоз Сенатских
Социалистических
Республик (61) Дополнительное к авт, свид-ву (22) Заявлено 14.04.76 (21) 2346183/15 (51) М. Кл.в
А 61К 39/00 с присоединением заявки №
Государственный комитет (23) Приоритет (43) Опубликовано 30.01.79. Бюллетень № 4 (53) УДК 576.8.097.5 (088.8) ло делам изобретений и открытий (45) Дата опубликования описания 30.01.79 (72) Авторы изобретения
Ю, Б. Валюкас, М. А. Бабянскас и П. А. Заянчкаускас
Институт зоологии и паразитологии AH Литовской ССР (71) Заявитель (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ АНТИ-АНТИ ГЕМОЦИТАРНОЙ
Cbl ВО POT К И
Изобретение относится к сельскому хозяйству, в частности к защите растений от насекомых-вредителей.
С целью повышения активности водорастворимых белков против насекомыхвредителей по предлагаемому способу антиген берут из клеток тела насекомого и вводят их животным, из крови которых получают антигемоцитарную сыворотку для последующего введения ее в тело насекомого, и из клеток тела насекомого выделяют затем анти-антигемоцитарную сыворотку.
Предлагаемый способ основан на новом
;принципе, который заключается в использовании иммунох имических свойств насекомых.
В качестве антигена используют клетки гемоциты насекомых Ga!1eria тпе11опе1!а L, которые вводят подкожно белым крысам 4 раза с интервалом 5 дней. Во время каждой инъекции вводят по 0,2 мл 50% -ной суспензии гемоцитов. Первую иммунизацию проводят подкожно, вводя каждой крысе по 0,2 мл 50%-ной суспензии в смеси с
0,04 мл адъюванта Фрейнда. Последующие иммунизации проводят внутримышечно, вводя по 0,2 мл 50%-ной суспензии в смеси с 16666 и. е. пенициллина для предотвращения возможного инфекционного процесса. Перед первой иммунизацией берут кровь для определения наличия у крыс естественных антител против гемоцитов гусениц. Спустя 7 дней после последней им5 мунизации крысы обескровливаются. Полученную антисыворотку инактивируют при
56 С в течение 30 мин и хранят при 20 С.
В результате получают ряд антигемоцитарных сывороток. Титр гемоцитоаглютининов
1р 1: 256 — 1: 2048.
Полученную антигемоцитарную сыворотку вводят гусеницам G. mellonella L. в пер|иод их развития V — VI возрастов однократно в дозе 0,25 — 0,50 мкл каждой. Через 24 ч. после инъекции удаляют гемолимфу и пищеварительный тракт. Затемтело гусениц промывают физиологическим раствором 0,8% -ного хлористого натрия в дистиллированной воде.
gp Для получения анти-антигемоцитарной сыворотки гусениц гомогенизируют ii разбавляют физиологическим раствором в соотношении 1; 1. Полученную массу многократно замораживают и оттаивают с целью разрушения клеток. Затем в течение 15 мин центрифугируют при
8000 об/мин. Полученную надосадочную жидкость (анти-антигемоцитарную сыворотку) хранят при — 20+-2 С.
56562!
Формула изобретения
Составитель В. Косовеи
Редактор Е. Месропова Техред А. Камышникова Корректор И. Позняковская
Заказ 2832 1 Изд. Plo 139 Тираж 680 Подписное
1-!ПО Государственного комитета СССР по делам изооретений и открытий
113035, Москва, К-35, Раушская паб., д. 4/5
Типография, пр. Сапунова, 2
Надосадочная жидкость — «нти-антигемоцитарная сыворотка имеет светло-коричневый цвет со слабо выраженным запахом, присущим запаху гусениц G. mellone)la L.; кожных реакций при попадании на тело человека не вызывает.
При попадании в тело насекомого антиантигемоцитарная сыворотка повышает патогенные свойства бактерий, что подтверждается микроскопическим анализом при усилении роста энтомопатогенных бактерий
Вас, thuringiensis.
Способ получения анти-антигемоцитарной сыворотки, отличающийся тем, 5 что, с целью повышения активности водорастворимых белков против насекомых-вредителей, антиген берут из клеток тела насекомого и вводят пх животным, из крови которых получают аптигемоцитарную сы-!
О воротку для последующего введения ее в тело насекомого, и из клеток тела насекомого выделяют затем анти-антигемоцитарную сыворотку,
