Способ диагностики амилоидозов
О П И С А Н И Е < >593IGS
ИЗОБРЕТЕН ИЯ
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ
Союз Советских
Социалистических
Республик (61) Дополнительное к авт. свид-ву— (22) Заявлено 03.02.76 (21) 2320716/28-13 с присоединением заявки №вЂ” (23) Приоритет— (43) Опубликовано 15.02.78. Бюллетень № 6 (45) Дата опубликования описания 20.02.78 (51) М Кл G 01 N 1/28
Государственный комитет
Совета Министрцв СССР (53) УДК 615.475 (088.8) по аелам изобретений н открытий (72) Автор изобретения
А. Е. Сиваков (71) Заявитель Первый московский ордена Ленина и ордена Трудового
Красного Знамени медицинский институт им. И. М. Сеченова (54) СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ АМИЛОИДОЗОВ
Изобретение относится к области,медицины, а именно к терапии.
Известен способ диатноствки амилоидозов путем исследования биопсийного и аутопсийного материала (1).
Одна ко известный способ не обеспечивает дифференциальной диагностики различных форм амилоидозов.
Для дифференциальной, диагностики идиопатического, приобретенного и наследственного амилоидозов по предлагаемому способу гистологические срезы обрабатывают забуференньем гексамин-серебряньом раствором при температуре 50 — 70 С с последующей их докраской.
Способ осуществляют следующим образом.
Полученные биапсийный и аутопсийный материалы фиксируют в 10%-ном нейтральном формалине, заливают в парафин. Срезы готовят толщиной 4 — 6 лкм, наклеивают на чистые стекла, депарафинируют и доводят до воды ка к î о ыч но.
Затем готовят растворы красителей.
1. Забуференный комплекс гексагмина и азотнокислого серебра.
К 95 мл 5%-ного гексамина добавляют
5 мл 5%-ного азотнокислого серебра и 10 л л боратного буфера (рН 8,2 — 8,6), который готовят следующим образом: к 100 ил 3%-ной борной кислоты добавляют 1 каплю фенолфталеина, оттитровывают 1 н. раствором ед" кого натра до стойкой розовой окраски. При добавлении азотнэкислого серебра в растворе гексамина появляется молочный осадок, который при встряхивании растворяется. Раствор готов к употреблению.
2. Забуференный раствор конго красного.
К 100 мл раствора боратного буфера добавляют 500 мг красного конго, размешивают, 10 помещают в термостат при температуре 56 С на 30 — 60 мин до появления равномерного прозрачного окрашивания.
3. Раствор перийо дата,калия:
70 мг KIO> растворяют в 100,ил дистил15 лированной воды, добавляют 0,5 мл 35%-ной азотной кислоты.
Затем готовят 5%-ную хромовую кислоту, 0,05 — 0,1%-ный раствор хлорного золота, 1,0—
2,0%-ный триосульфат натрия.
20 Окраску гистологических срезов производят следующим образом.
Препарат ополаскивают в дистиллированной воде, обрабатывают растворам перийодата калия в течение 20 мин, затем промывают в проточной воде 10 иин и помещают в рас твор 5%-ной хромовой кислоты на 30 мин, снова промывают в проточной воде 5 мин, споласкивают в 2 — 3 сменах дистиллированЗ0 ной воды.
593168
Формула изобретения
1. БМЭ, т. 1, 1974, с. 354.
Составитель С. Малютина
Техред И. Михайлова Корректор В. Гутман
Редактор Л. Емельянова
Заказ 975/22 Изд. Хо 193 Тираж 1109 Подписное
НПО Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий
Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5
Тип. Харьк. фил. пред. <Патент»
После этого обрабатывают забуференным гексамин-серебряным раствором в течение 2—
3 ч при 56 С (контроль под микроскопом до появления однородного черно-коричневого тона). Споласкивают в двух сменах дистиллированной воды. Выдерживают в 0,05 — 0,1%нам растворе хлорного золота 3 — 5 мин (контроль,под микроскопом — волокнистые структуры черно коричневые, фон прозрачный) .
Ополаскивают,в дистиллированной воде. Затем памещают в 1 — 2%-ный раствор тиосульфата натрия на 3 мин. Про мывают в проточной ваде 2 мин, cBQJIaclKHBBIoT в дистиллированной воде. После этого докрашивают препарат в нагретом 0,5%-ном забуференном растворе;канто красного при 56 С в течение
15 мин, затем снова споласкивают в,дистиллированной воде. Днфференцируют в 70%-ном аммиачном спирте 1 — 2 с. Отмывают краситель в дистиллированной воде (контроль под микроскопом) и (проводят через .спирты, просветляют,в кислоте не более 5 мин и оканчивают как обычно.
Предлагаемый способ обеспечивает дифференциацию различных форм амилоидоза, что позволяет разработать эффективные средства борьбы с каждой формой заболева5 ния.
10 Способ диагностики амилоидозов п утем исследований биопсийного и аутопсийного материала на гистологических срезах, о т л ич а ю шийся тем, что, с целью дифференциальной диагностики идиапатическаго, приоб15 ретенного и наследственно1го амилондозов, гистологические срезы обрабатывают забуференным гекса мин-серебряным раствором при
50 — 70 С.
20 Источник информации, принятый во внимание,при экспертизе: