Способ приготовления проб липидов

Авторы патента:

G01N33/48 - биологических материалов, например крови, мочи (G01N 33/02-G01N 33/14,G01N 33/26,G01N 33/44,G01N 33/46 имеют преимущество; определение всхожести семян A01C 1/02); приборы для подсчета и измерения клеток крови (гемоцитометры) (подсчет клеток крови, распределенных по поверхности, путем сканирования этой поверхности G06M 11/02)

G01N1/44 - Исследование или анализ материалов путем определения их химических или физических свойств (разделение материалов вообще B01D,B01J,B03,B07; аппараты, полностью охватываемые каким-либо подклассом, см. в соответствующем подклассе, например B01L; измерение или испытание с помощью ферментов или микроорганизмов C12M,C12Q; исследование грунта основания на стройплощадке E02D 1/00;мониторинговые или диагностические устройства для оборудования для обработки выхлопных газов F01N 11/00; определение изменений влажности при компенсационных измерениях других переменных величин или для коррекции показаний приборов при изменении влажности, см. G01D или соответствующий подкласс, относящийся к измеряемой величине; испытание

G01N1/38 - Исследование или анализ материалов путем определения их химических или физических свойств (разделение материалов вообще B01D,B01J,B03,B07; аппараты, полностью охватываемые каким-либо подклассом, см. в соответствующем подклассе, например B01L; измерение или испытание с помощью ферментов или микроорганизмов C12M,C12Q; исследование грунта основания на стройплощадке E02D 1/00;мониторинговые или диагностические устройства для оборудования для обработки выхлопных газов F01N 11/00; определение изменений влажности при компенсационных измерениях других переменных величин или для коррекции показаний приборов при изменении влажности, см. G01D или соответствующий подкласс, относящийся к измеряемой величине; испытание

ОПИСАН И Е

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

00 542932

Союз Советских

Социалистических

Ресгублик (61) Дополнительное к авт. свид-ву (22) Заявлено 26.05.75 (21) 2138675/13 с присоединением заявки № (23) Приоритет

Опубликовано 15.01.77. Бюллетень № 2

Дата опубликования описания 21.03.77 (51) М. Кл."- G 01N 1/28

Государственный комитет

Совета Министров СССР по девам изобретений и открытий (53) УДК 616.153.915 (088.8) (72) Авторы изобретения

К. М. Синяк, И. И. Даниленко, 3. П. Васюренко и В. И. Крук

Киевский научно-исследовательский институт эпидемиологии, микробиологии и паразитологии (71) Заявитель (54) СПОСОБ ПРИГОТОВЛЕНИЯ ПРОБ ЛИПИДОВ

Формула изобретения

Изобретение относится к микробиологической промышленности и может найти применение в медицинской практике.

Известен способ приготовления проб лппидов, который требует предварительного высушивания клеток, предварительной экстракции липидов, их концентрации, гидролиза и метилирования 3%-ной НС1 в метаноле в течение

3 ч, экстракции метилированных эфиров жирных кислот петролейным эфиром, отмыв экстракта водой, с последующим высушиванием над безводным сульфатом натрия и концентрированием в вакууме (1).

Однако известный способ является трудоемким.

Целью изобретения является упрощение технологии приготовления липидов для анализа в газовом хроматографе. Эта цель достигается тем, что используют отмытые микробные клетки без предварительной экстракции липидов, обрабатывают их в течение 20вЂ”

30 мин раствором серной кислоты в метаноле при температуре около 80 С, а полученные продукты дважды экстрагируют смесью гексана с эфиром.

Способ осуществляют следующим образом.

Пример. Проводят приготовление проб липидов клеток стрептококков и стафилоккоков для газохроматографического анализа с целью идентификации.

Клетки, выращенные в течение 1 сут в мясопептонном бульоне, отмывают, путем цен; трифугирования физиологическим раствором, осадки переносят в пробирки с завинчивающимися пробками, заливают 5 мл 1,5%-ной серной кислоты в метаноле и прогревают

20 мин в водяной бане при 80 С. За 5 мин до окончания прогрева добавляют 3 мл дистиллированной воды. После охлаждения эфиры

10 жирных кислот дважды экстрагируют смесью гексана с эфиром (1: 1), упаривают и анализируют в газовом «роматографе.

Двукратная экстракцпя смеси гексана с эфиром (1: 1) обеспечивает полную экстрак15 цию всех метиловых эфиров жирных кислот, а также эфиров стеринов и холестерина. Время, необходимое для приготовления проб липидов, 20 вЂ” 30 мин.

Использование предлагаемого способа при20 готовления проб липидов (жиров) микроорганизмов для проведения газохроматографического анализа отличается быстротой исполнения по сравнению с существующими способами.

Способ приготовления проб липидов, заключающийся B одновременном гидролизе липи30 дов и метилирования жирных кислот, о т л и542932

Составитель С. Малютина

Техред Л. Гладкова

Корректор Н. Аук

Редактор Т. Девятко

Заказ 219/2 Изд. № 159 Тираж 1054 Подписное

ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, 7К-35, Раушская наб., д. 4/5

Типография, пр. Сапунова, 2 ч а ю шийся тем, что, с целью упрощения технологии приготовления липидов, используют отмытые микробные клетки, которые непосредственно обрабатывают в течение 20вЂ”

30 мин раствором серной кислоты в метаноле при температуре около 80 С, а полученные продукты гидролиза дважды экстрагируют смесью гексана с эфиром.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе:

5 1. Jap. j. Ехр. Med, 1964, 84, 6, 36 (прототип).