Способ выделения акти номицина д

Союз Советских

Социалистических

Республик

ОПИСАНИЕ Ш6!2

ИЗОБРЕТЕН ИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Зависимое от авт. сгндетельства ЛЪ вЂ”вЂ”

Заявлено 16.XII.1969 (№ 1385768/31-16) .Ч. Кл. А 6fk 2! 00 с присоединением заявки X2—

Комитет по делам изобретений и аткрь>тий при Совете Министров

СССР

Приоритет —Оп1 блнковагн> 12.111.! 973. Бк>ллетень ЛЪ 14 х,11х 615.((9.931 (088.8) Дата оиублико,га:iii: описания 2Х111.1973

Авторы изобретения

С. И. Денисова и P. H. Елизарова

Всесоюзный научно-исследовательский институт антибиотиков и Институт экспериментальной и клинической онкологии

Заявители

СПОСОБ ВЫДЕЛЕНИЯ АКТИНОМИЦИНА Д

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к способам выделения антибиотика, в частности, актиноминина Д.

Известен способ выделения актиномицина Д (акпи номици на Ха) из культуральной жидкосги, заключающийся в том, что мицелий продуцента экстрагируют ацетоном, а нативный раствор экстрагируют этилацетатом, .из объединенных экстрактов удаляют раствор итель при пониженном чàBëåiiè è. наносят растворенный в орI аническом растворителе остаток на колонку с сорбентом, проявляют ее смесью этилацетатацетон, извлекают целевой продукт метанолом, удаляют растворитель DpH пониженном давлении и кристаллизу>от его.

Однако известным способом .не удается полностью очистить целевой продукт от других актиномицинов и сопутствующих веществ.

Для повышения чистоты целевого продукта сорбци>о и проявление целевого продукта осуществля>от с использованием смеси бензола и четыреххлористого углерода при соот>ношении компонентов 1:3 по объему. Чистота получаемого преп а рата 90 — 96а .

П.р H м е р 1. (производственные условия).

Культуральную жидкость отделяют от мицелия. 40 л культуральной жидкости и 20 л этилацетата загружают в аппарат с работающе1 мешалкой. Смесь перемешивают 4 час и орга нический слой отделяют от водного. Операцик повгоряк>т Tpll раза. Экстракты объединяют

5 растворитель отгоняют при уменьшенном дав ленни (остаток и). 3,5 к.г мнцелия и 5л ацето на загружают в фарфоровый котел, смес оставля ют на 10 IQc Мицелий отделяют о растворителя путем фильч рации. Экстракци

10 антиопотика проводят трехкратно. Экстракть об.ьединяют и растворптель отгоняют пр> уменьшенном даьленин (остаток i>). Остат>т и и б соединяют, добавляют 2 л этилацетата. смесь перемешивают 2 час. Органический сло

15 отделяют. Экстракци>о повторяют 2 — 3 раз .

Органические ьытяжки объединяют и раство ритель отгоняют при уменьшенном давлении. ! г из полученного сырца растворяют в 18 .и смеси, состоящей из /4 бензола и /4 четырех

20 хлористого углерода, и полученный раство вносят в колонку. Предварительно колонк (h 54 с.тк d 3 с.тт) заполняют суспензией, полученной из 300 г окиси ал>оминия для хроматографии в этой же смеси растворителей. Ч25 рез адсорбент пропускают 600 ял смеси бе>эола и четыреххлористого углерода (1:3 .

Затем колонку подсушивают, окрашенну зону отделяют и антибиотик экстрагируег ацетоном. Ацетоновый экстракт фильтрую, 30 растворитель удалян>т, остаток кристалл>361612

Предмет изобретения

Со с та витез ь Г, Головина

Редактор И. Белявская Техред Е. Борисова 1-орреьтор А. Васильева

11аи . 1оот тараи I07 11о тип" ое

ЦН11ИП11 Комитета по аслам иаобретеппй и открытий при Соаете микис ров СССР

Москва, Ж-35, Раушская иаб., д. 4/5

01тп. тип. Костроиско:о упраипопип оалательста, иолирафии и киижиой торговли зуloT из 1,5 мл этилового спирта. Выход

0,3 г Е,,. .", = 189 (а),у .— — 306, Содержавшие дактиномицина 96,4%.

П р,и м е р 2 (лабораторные условия). После отделения от мицелия 1,5 л культуральной жидкости встряхивают в делительной воронке с 0,75 л этилацетата. Операци1о повторяют трижды. Экстракты объединяют, растворитель отгоняют при уменьшенном давлении (остаток а), 150 г влажного мицелия смешивают с

590 лл ацетона. Смесь оставляют на 10 час.

Мицелий отделяют и 2 — 3 раза повторяют

BtHTI16H 07Н K3 3IIOTO IIOAI. В ыт я жк и объединяют и ацетон отгоняют при уменьшенном да влении (остаток б). После соединения остатки а и б встряхивают в делительной воронке с этилацетатом три раза (по 350 ил).

Расвворитель удаляют при уменьшенном давлении. Далее обработку ведут, как описано в приьмере !.

Способ выделения актином иц ина Д путем экстракции нативного раствора и мицелия ор10 ганическим растворителем, сорбции, проявления и десорбции целевого продукта с использованием органических растворителей с последующей кристаллизацией, отличающийся тем, что, с целью повышения чистоты целе15 вого продукта, сорбцию и проявление осуществляют с использова нием смеси бензола и четьгреххлористого углерода при соотношеп и и компонентов 1:3 по объему.