Продуцент / бчб ^•''о--^ ^ ' "" пектолитических ферментов"^^ <^-^-^^ и ; !'д

350822

ОПИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Сова COBBTCKHX

Социалистических

Рес«ублик

Зависимое от авт. свидетельства ¹

Заявлено 28.1Х.1970 (№ 1484676/28-13) с присоединением заявки ¹

Приоритет

Опубликовано 13.1Х.1972. Бюллетень ¹ 27

Дата опубликования описания 28.IX.1972

М. Кл. С 12k 3/00

С 12d 13/10

Комитет «о делам изобретений и открытий

«ри Сове1е Министров

СССР

УДК 577.15.07(088.8) Авторы изобретения

Н. М. Трофименко, Х. В. Альман и М. Е. Штейнберг

Отдел микробиологии АН Молдавской ССР

3 аявитель

ШТАММ BOTRYTlS CI NEREA ¹о 70-ПРОДУЦЕНТ

HEKTOJIHTH×EÑÊÈX ФЕРМЕНТОВ

Изобретение относится к области микробиологической промышленности, в частности и получению штамма Botrytis cinerea № 70— продуцента пектолитических ферментов, используемого в винодельческой промышленности.

Известны штамм Botrytis cinerea чс 20 и штамм Botrytis cinerea № 30, отселекционированные в условиях Крыма.

Предлагаемый штамм обладает рядом отличительных признаков: конидии крупные по всем четырем формам — овальные, яйцевидные, эллипсоидальные, шаровидные. Общая пектолитическая активность равна 7000 ед/г; кроме того, полученный препарат обладает полигалактуроназной активностью, равной

16100 ед/г, содержит пектинэстеразу (540 иг экв/,ттг нин), кислую протелиазу, равную 21200 ед/г (по методике СЭВ) и гемицеллюлазу (420 ед/г).

Штамм Botrytis cinerea ¹ 70 имеет следующую характеристику. Штамм выделен из ягод сорта Чайнак.

С у с л о — а г а р о в а я с р е д а. Колония гриба темно-серого цвета с оливковым оттенком. Воздушный мицелий развит хорошо, колонии пушистые, плодоношение обильное.

Гифы бесцветные, с возрастом приобретают оливковый оттенок. Толщина гиф 3 — 10 .чк.

Конидиеносцы отличаются от гиф вегетативного мпцелия болсс темной окраской — буроватые с толстой оболочкой, прямостоящпе, высотой 0,6 — 2,5 л;л, толщиной б — 18 нк, на вершине вильчато-разветвленные, с зернистым содержимым.

Ветви конидиеносцев почти бесцветные. Конечные ответвления конидиеносца короткие, оканчивающиеся сучковидными выступами, несущие мелкие зубчики, на которых сидят много шсленные конидип, образующие вместе с ветвями головку, В последней содержится до 300 кon»qnn.

Конпдии одноклеточные, яйцевидные с заострепнымп концамп, овальные или эллиптические (почти шаровидные) размером 9 — 15>

; 6,5 —; лтк со слегка буроватой оболочкой, в массе дымчатые, большей частью тесно скученные в плотные, быстро опадающие грозди.

Штамм обладает способностью при голодании формировать микроспороношение типа пенициллоидных кисточек, которые отчленяют мелкие шаровидные микроспоры.

С р е д а Ч а п е к а. Воздушный мицелий

25 развит слабо. Колонии светлосеро-оливковые.

Штамм образует многочисленные крупные серовато-белые, с возрастом черные склероции размером 2 — 7 льн с бугорчатой поверхностью.

Склероции расположены более или менее рав.

3р номерно по всей поверхности колонии.

3508222

Составитель Н. Ларина

Тскрсд 3. Тараненко

Корректоры: Е. Талалаева и Е. Зимина

Редактор А. Батыгин

Заказ 3218/11 Изд. М 1310 Тираж 406 Подписное

ЦИИИПИ Комитета tlo делам изобретена!! и открытий прн Совете Министров СССР

Москва, Ж,-35, Раушск!!я наб., д. 4)5

Типотра(1п!и, lip Сап чнов:1, 2

На сусло- ага ре штамм дает очень хорошо развитый воздушный мицелий, темноокрашенный. Плодоношение обильное.

На мясо-пептонном а га ре вегетативный мицелий развит слабо. Плодоношение обильное.

На голодном arape колонии слаборазвитые, паутинистые.

Оптимальная температура 25 С.

Питательная среда следующего состава: свекловичный жом — 2 /в, пептон — 1 /в (NH4) gSO4 — 0,6 /о, КНзР04 — 0,2 /о, кукурузный экстракт — 0,5 /о, обеспечивающий синтез пектолитических ферментов до 70 ед/л.п.

Пример. Двухсуточную культуру, выращенную в колбах на качалке в количестве 1 /o, вносят в ферментеры на питательную среду того же состава, где процесс выращивания продолжается еще 3 суток, при тех же условиях, но с дополнительной подачей воздуха, при избыточном давлении 0,3 — 0,4 ат,я.

Мицелий от культуральной жидкости отделяют на нутчфильтре, культуральную >кпдкость охлаждают до +5 Ñ, затем смешивают с охлажденным до 5 — 10 С с этиловым спиртом в пропорции 1:4.

Выпавший осадок фермента отделяют от жидкости центрифугированием, промывают спиртом и сушат при комнатной температуре.

Высушенный ферментный препарат размалывают, после чего он может быть использован в виноделии. Пектолитическая активность препарата 6000 — 7000 ед/г.

Предмет изобретения

Штамм Botrytis cinerea № 70 — продуцепт пектолитических ферментов.

Сусло-агаровая среда. Колонии гриба темно-серого цвета с оливковым оттенком. Воздушный мицелий развит хорошо, колонии пушистые, плодоношение обильное. Гифы бесцветные, с возрастом приобретают оливковый оттенок. Толщина гиф 3 — 10 мк.

Конидиеносцы отличаются от гиф вегетативного мицелия более темной окраской — буроватые с толстой оболочкой, прямостоящие, высотой 0,6 — 2,5 м и, толщиной 6 — 18 мк, на вершине вильчато-разветвленные, с зернистым содержимым.

Ветви конидиеносцев почти бесцветные. Конечные ответвления конидиеносцев короткие, оканчивающиеся сучковидными выступами, несущие мелкие зубчики, на которых сидят многочисленные конидии, образующие вместе с ветвями головку. В последней содержится до

300 конидий.

Конидии одноклеточные, яйцевидные с заостренными концами, овальные или эллиптические (почти шаровидные), размером 6,5—

13 мк со слегка буроватой оболочкой, в массе

20 дымчатые, большей частью жестко скученные, плотные, быстро опадающие гроздья.

Штамм способен при голодании формировать микроспороношение типа пенициллоидных кисточек, которые отчленяют мелкие ша25 ровидные микроспоры.

С р ед а Ч а п е к а. Воздушный мицелий развит слабо. Колонии светлосеро-оливковые.

Штамм образует многочисленные крупные серовато-белые, с возрастом черные склероции

30 длиною 2 — 7 м.и с бугорчатой поверхностью.

Склероцпи располо>копы более или менее равномерно IIo всей поверхности колонии.

С у с л о - а г а р, Хорошо развит воздушный мицелий — темноокрашенный. Плодоношение

35 обильное

Мясо-печтонный агар. Вегетативный мицелий развит слабо. Плодоношение обильное.

Н а голодн о м а г а р е. Колонии слабо40 развитые, паутинистые. Температура развития

8 — 27 С, оптимальная — 25 С.