Патент ссср 278964

ОПИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ БЛЮЗ Советских

Социал истимеских

Республик

278964

Зависимое от авт. свидетельства №вЂ”

М. Кл. С 12k 5/00

Заявлено 01.111,1968 (№ 1222974/31-16) с присоединением за явки №

Приоритет

Опубликовано 17,1Х.1973. Бюллетень № 37

Дата опубликования описания 17.1.1974

Государственный комитет

Совета Министров СССР па делам изаоретений и открытий

УД К 615.371/372:616.915 (088.8) Авторы изобретения О. Г. Анджапаридзе, Е. М. Доссер, В. M. Дорофеев, И. С. Колянова, М. Н, Ермакова, Ю. А, Свежинина, А. T. Кравченко, А. Д. Альтштейн, Е. С. Воронин, Е, А. Щекочихина и Н. Н. Васильева

Заявитель

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ЖИВОЙ КОРЕВОЙ ВАКЦИНЫ

Изобретение относится к области медицины, в частности, к способу получения профилактического препарата, Известен способ полученйя жйвой коревой вакцины путем культивирования вакционпого штамма вируса кори в культуре ткани, например культуре клеток почек морской свинки it нротопластов эмбрионов безлейковых кур.

Однако при таком способе ограничен уровМь размножения вируса в культуре клеток почек морских свинок и недостаточна устой чивость этой культуры в бессывороточной среде.

С целью повышения устойчивости культуры клеток в бессывороточной среде и увеличения выхода готового продукта используют культуру клеток эмбрионов японских перепелок.

Одноклеточные культуры клеток могут длительно сохраняться в бессывороточной среде, а вирус кори легко адаптируется в этой ткани и дает высокое накопление вируса.

Пример. Берут 9 — 12-дневные эмбрионы японских перепелок, обеззаражнвают поверхность яйца, извлекают эмбрионы, измельчаюг и трипсинизируют обычным методом.

Клетки суспендируют в неболь шом произвольно взятом объеме питательной среды.

В густую клеточную взвесь (8 — 10 млн клеток на 1 мл) добавляют вирусную суспензию, тщательно перемешивают и оставляют при комнатной температуре на 2 час, затем раз= водят питательной средой до концентрации

500 тыс. клеток на 1 мл и засевают в матрасы.

5 Пигательная средй, используемая для Bttращивания клеток, включает 0,5% гидролнззта лактальбумина на ))астворе Хэнкса с до:бавлением 5 — 10% сыворотки крупного рогатого скота и антибиотиков. Ма грасы инкуби.

10 руют при 32"С. Через 3 — 4 дня питательнук) среду выливают из матрасов, промывают сформировавшийся монослой раствором Хснкса для удаления следов сыворотки, и дальнейшее культивирование ведут в среде 199

15 без сыворотки.

Матрасы наблюдают ежедневно и при наступлении выраженной дегенерации клеток (поражение около половины клеток монослоя) сливают содержащу!о вирус питатель20 ную среду и заменяют ее свежей того же состава.

Возможны повторные сборы вируссодержащей жидкости с одной и той же однослойнлi культуоы с интервалом в 1 — 2 дня, а также

25 извлечение внутриклеточного вируса путем замораживания — оттаивания. После определения стерильности и биологической активности отдельные сборы вируссодержащей жидкости объединяют, дооавляют

30 стабилизатор и высушивают, 278961

Составитель В. Муравьева

Техред Т. Курилко Корректор Е. Миронова

P еда кто р В. Новоселова

Заказ 3706/2 Изд. № 3 Тираж 467 Подписное

ЦНИИПИ Государствевного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открыпий

Москва, Ж-36, Раушская наб., д. 4/5

Типография, пр. Сапунова, 2

В качестве продуцента можно использова ть любой вак|цинный штамм вируса кори, адаптированный к культуре клеток эмбрионов японских перепелок.

Предмет изобретения

Способ получения живой коревой вакцины путем культивирования вакцинного штамма вируса кори в культуре ткани, отличающийся тем, что, с целью повышения устойчивости культуры клеток в бессывороточной среде и увеличения выхода готового продукта, ис5 пользуют культуру клеток эмбрионов японских перепелок.