Способ оценки общей антиоксидантной активности крови
Авторы патента:
Способ может быть использован в медицине, в кардиологии. Одновременно исследуют прирост 2-ТБК активных соединений (малоновый диальдегид (МДА)), уровень холестерина липопротеинов высокой плотности (ХС ЛПВП) и определяют лаг-период. По величине и соотношению у исследованных показателей оценивают общую антиоксидантную активность крови как высокую, умеренную и низкую. Способ позволяет повысить точность и уменьшить время исследования. 1 табл., 1 ил.
Изобретение относится к медицине и может быть использовано в кардиологии и терапии.
Известны способы оценки интенсивности процессов перекисного окисления липидов (ПОЛ) крови при ишемической болезни сердца (ИБС) (В.З. Ланкин, А.Н. Закирова, Б.Х. Ахметова и соавт. Перекиси липидов и атеросклероз, кардиология, 1980, N 7, с. 96 - 98); способ определения малонового диальдегида в плазме крови в сопоставлении с уровнем линолеата сыворотки липопротеинов (Атеросклероз, 1994, N 1, т. 108, с. 103 - 110), а также известно защитное действие липопротеидов высокой плотности (ЛПВП), их подфракций и ЛХАТ в перекисной модификации липопротеидов низкой плотности (ЛПНП) (А.Н. Климов, А.А. Никифорова, В. М. Плесков, А. А. Кузьмин, Н.Н. Калашникова, Т.О. Антипова//Биохимия, 1979, N 1, с. 118 - 123). Описанные способы не позволяют оценить резервную мощность общей антиоксидантной активности крови (AOA). Описан также способ оценки антиоксидантной активности крови путем исследования аскорбатзависимого перекисного окисления липидов в тканях при помощи теста с 2-ТБК (В.З. Ланкин, С.М. Гуревич, Е.Б. Бурлакова, Биоантиокислители. - М.: Наука, 1975, с. 73 - 78). Данный способ является наиболее близким к предлагаемому по технической сущности и достигаемому результату (прототипом). Однако указанный способ недостаточно точен, так как не позволяет определить лаг-период (период индукции прироста ТБК-активных соединений сыворотки крови, условно называемых малоновым диальдегидом (МДА) и не позволяет оценить резервную мощность общей антиоксидантной активности (АОА) крови, так как не позволяет определить границ, характерных для высокой, средней, низкой резервной мощности АОА крови. Целью предлагаемого изобретения является повышение точности способа. Указанная цель достигается техническим решением, представляющим собой одновременное определение концентрации 2-ТБК активных соединений в сыворотке крови и дополнительное определение лаг-периода (периода прироста ТБК-активных соединений (МДА) сыворотки крови) и холестерола липопротеинов высокой плотности (ХС ЛПВП) и при увеличении концентрации МДА с 0,1 до 0,13 мкмоль/г общих липидов (ОЛ) при значениях ХС ЛПВП в пределах 1,4 - 1,7 мкмоль/л и лаг-периоде с 9,1 до 10 мин резервную мощность общей АОА считают высокой, при увеличении МДА до 0,13 - 0,61 мкмоль/г ОЛ, уровне ХС ЛПВП в пределах 0,92 - 1,39 ммоль/л и лаг-периоде 6 - 9 мин резервную мощность общей АОА считают умеренной и при увеличении МДА до 0,62 - 2,1 мкмоль/г ОЛ, уровне ХС ЛПВП 0,61 - 0,91 ммоль/л, лаг-периоде 2 - 5,9 мин резервную мощность общей АОА считают низкой. Известно, что основной антиоксидант крови - альфа-токоферол содержится в значительном количестве в липопротеинах высокой плотности (ЛПВП). Поэтому резервная мощность АОА крови зависит от концентрации в крови ЛПВП и, следовательно, только комплексная оценка указанных выше показателей позволяет определить границы резервной мощности АОА. Новым в данном способе является дополнительное определение лаг-периода, ХС ЛПВП и при увеличении концентрации МДА с 0,1 до 0,13 мкмоль/г ОЛ при значениях ХС ЛПВП в пределах 1,4 - 1,7 мкмоль/л и лаг-периоде с 9,1 до 10 мин резервную мощность общей АОА считают высокой; при увеличении МДА до 0,14 - 0,61 мкмоль/г ОЛ, уровне ХС ЛПВП в пределах 0,92 - 1,39 ммоль/л и лаг-периоде 6 - 9 мин резервную мощность общей АОА считают умеренной и при увеличении МДА до 0,62 - 2,1 мкмоль/г ОЛ, уровне ХС ЛПВП 0,61 - 0,91 ммоль/л, лаг-периоде 2 - 5,9 мин резервную мощность общей АОА считают низкой. Каждый вновь введенный в формулу изобретения признак выполняет функцию повышения точности способа. Отличительные признаки проявили в заявленной совокупности новые свойства. Идентичной совокупности признаков в известных решениях не обнаружено. Данный способ возможно успешно использовать в клинической практике. Таким образом, данное решение соответствует критериям изобретения: "новизна", "практическая применимость" и "изобретательский уровень". В настоящее время установлена активация ПОЛ при ИБС (Ланкин В.З., 1980 - 1988 гг. ), связанная со снижением общей АОА крови. В результате активации процессов ПОЛ при атерослерозе появляются модифицированные формы липопротеидов, являющихся наиболее атерогенными (Кузнецов А.С. и соавт., 1989). Поэтому оценка резервной мощности АОА крови при ИБС крайне важна для прогнозирования течения заболевания, оценки эффективности проводимой терапии. Верхняя граница резервной мощности АОА крови является пределом нормы для homo sapiens, нижняя свидетельствует о возможности срыва компенсаторных механизмов гомеостаза организма с тяжелым клиническим исходом. В настоящее время в клинической лабораторной практике отсутствуют способы определения резервной мощности общей АОА крови. Следовательно, указанный способ позволяет дополнительно к определению ЛПВП и концентрации МДА крови проводить оценку мощности общей антиоксидантной активности крови. Процессы перекисного окисления липидов (ПОЛ) оценивают по определению окрашенных продуктов реакции сыворотки крови с 2-тиобарбитуровой кислотой (2-ТБК). Популярность этого метода обусловлена его высокой чувствительностью, простотой осуществления и достаточной адекватностью получаемых результатов (Гаврилов В.Б. и соавт. Вопросы медицинской химии, 1987, N 1, с. 118 - 122). В то же время 2-ТБК может взаимодействовать с некоторыми веществами нелипидной природы. Альдегидами (моносахаридами и др.), ароматическими альдегидами, силовыми кислотами, пиримидинами, фосфоэнолпируватом, ацетальдегидом, 2-дезокси-Д-рибозой, простагландинами, желчными пигментами и т.д. (А. Н. Осипов, О.А. Азизова, Ю.А. Владимиров. Активные формы кислорода и их роль в организме. В кн.: Успехи биологической химии. - М.: Наука, 1990, т. 31, с. 180 - 208). Тем не менее спектры комплексов 2-ТБК с продуктами окисления ненасыщенных липидов организма идентичны спектру хромогена, образующегося при реакции 2-ТБК с МДА. Следовательно, в условиях выбранного нами метода МДА является продуктом окисления ненасыщенных липидов и реагирующим с 2-ТБК (Биоокислители. - М: Наука, 1975, с. 73 - 78). Поэтому для удобства изложения в тексте идет речь об МДА, а не о 2-ТБК активных соединениях. Метод основан на том, что при нагревании в кислой среде часть продуктов ПОЛ, относящихся к классу эндоперекисей, разлагается с образованием МДА, который связывается с двумя молекулами 2-ТБК. Взаимодействие 2-ТБК с МДА, исходно содержащимся в липидных системах, и с другими летучими продуктами окисления липидов в количественном отношении невелико (см. контрольные исследования). Хорошо известно, что МДА образуется при окислительной деструкции гидроперекисей в процессах ПОЛ и составляет 1 - 2% от количества МДА, образующегося в ходе теста (см. ниже) в результате нагревания исследуемой пробы в присутствии прооксидантов. Способ осуществляют следующим образом: в сыворотке крови определяют концентрацию 2-ТБК-активных соединений, а именно к 0,17 мл сыворотки крови добавляют инкубационную смесь следующего состава - 30 мМ Трис-HCl (pH 7,4), 145 мМ NaCl, 0,67 мМ аскорбиновой кислоты. Реакцию инициируют добавлением раствора Fe2SO4 до его конечной концентрации 25 мкМ. Общий объем смеси составляет 2,0 мл. Инкубация длится 5, 10 и 15 мин при 37oC. Малоновый диальдегид в пробе определяют с 10 мл 0,75%-ным раствором 2-тиобарбитуровой кислоты. Коагулированный белок отделяют центрифугированием, супернатант спектрофотометрируют при 532 нм. Исходный уровень МДА в анализируемой сыворотке определяют без предварительной инкубации в присутствии прооксидантов. До инкубации оценивают только уровень МДА, который составляет в группе контроля 0,01![](https://img.poleznayamodel.ru/chr/177.gif)
![](https://img.poleznayamodel.ru/chr/177.gif)
![](https://img.poleznayamodel.ru/chr/183.gif)
![](https://img.poleznayamodel.ru/chr/183.gif)
![](https://img.poleznayamodel.ru/chr/177.gif)
![](https://img.poleznayamodel.ru/chr/177.gif)
![](https://img.poleznayamodel.ru/chr/177.gif)
![](https://img.poleznayamodel.ru/chr/177.gif)
![](https://img.poleznayamodel.ru/chr/177.gif)
![](https://img.poleznayamodel.ru/chr/177.gif)
![](https://img.poleznayamodel.ru/chr/177.gif)
![](https://img.poleznayamodel.ru/chr/177.gif)
Третья группа с низкой резервной мощностью АОА (n = 24):
уровень МДА до инкубации пробы 0,1
![](https://img.poleznayamodel.ru/chr/177.gif)
уровень МДА после инкубации пробы 0,9
![](https://img.poleznayamodel.ru/chr/177.gif)
ХС ЛПВП 0,76
![](https://img.poleznayamodel.ru/chr/177.gif)
лаг-период 4,1
![](https://img.poleznayamodel.ru/chr/177.gif)
Формула изобретения
РИСУНКИ
Рисунок 1, Рисунок 2
Похожие патенты:
Изобретение относится к медицине, а именно к прогнозированию развития аллергических заболеваний среди детского населения
Способ определения токсичности крови рыб // 2108580
Способ лечения ишемической болезни сердца // 2107910
Изобретение относится к медицине, в частности, к кардиологии, и может быть использовано для лечения любых клинических вариантов ишемической болезни сердца
Изобретение относится к оптико-электронной промышленности и может быть использовано для комплексного исследования параметров взвеси частиц микронных и субмикронных размеров (10-8 - 10-4 м): распределения частиц по группам с определенными размерами, химического состава частиц, скоростей изменения этих характеристик
Способ оценки микросомальной системы печени при действии ксенобиотиков алкилирующего типа // 2104539
Изобретение относится к области исследования или анализа материалов особыми способами, а именно к способам исследования крови при действии ксенобиотиков, и может быть использовано для оценки микросомальной системы печени после воздействия малых доз иприта и люизита при реальных путях поступления ОВ (отравляющих веществ) в организм, а также при решении задач по уничтожению ХО (химического оружия) в районах военно-химических объектов, в частности по обследованию здоровья населения и обслуживающего персонала в местах по хранению и уничтожению ХО
Способ прогнозирования цирроза печени у больных с хроническими диффузными заболеваниями печени // 2104538
Изобретение относится к медицине, а именно гепатологии, и предназначено для прогнозирования цирроза печени у больных с хроническими диффузными поражениями органа
Способ диагностики сахарного диабета // 2104537
Изобретение относится к медицине, в частности к эндокринологии, и может быть использовано для проведения дифференицальной диагностики инсулинзависимого и инсулиннезависимого диабета, состояния их компенсации
Изобретение относится к медицине, в частности к онкологии, и может быть использовано при проведении больным с неблагоприятным прогнозом адъювантных методов терапии
Способ оценки состояния больного // 2103692
Изобретение относится к медицине, а именно к клинической биохимии и может быть использовано для диагностики и прогнозирования состояния больного в послеоперационном периоде и при развитии острого воспалительного процесса
Изобретение относится к технологии анализа биологических материалов, а именно к способам определения фракционного состава (ФС) липопротеинов (ЛП) в плазме крови методом малоуглового рентгеновского рассеяния (МУРР) для последующей диагностики состояния организма человека
Изобретение относится к медицине и может быть использовано для определения иммунореактивности организма человека, степени антигенности возбудителя заболевания, оценки тяжести и прогноза вариантов течения исходов заболевания, контроля за эффективностью проводимых лечебных мероприятий, диагностики иммунодефицитных состояний
Способ оценки состояния здоровья // 2111490
Изобретение относится к медицине, а именно в вариологии, и может быть использовано для оценки состояния здоровья
Изобретение относится к области медицины, а именно к методам клинических лабораторных исследований
Изобретение относится к медицине, а именно к диагностике онкозаболеваний, и позволяет по 0,05 мл крови, взятой из вены пациента, установить наличие онкологического заболевания, путем выявления изменений в спектре многократного нарушенного полного внутреннего отражения (МНПВО) в инфракрасной области в сравнении с МНПВО ИК-спектром крови здорового человека (донора)
Изобретение относится к медицине, а именно к способам выделения шока при хирургической патологии, а также оценки тяжести состояния больного и контроля за эффективностью проводимого лечения
Изобретение относится к медицине, в частности к онкологии, и может быть использован при диагностике злокачественных новообразований