Способ определения азалептина

 

согоз советских

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

Р Г СптЛЛК (ч) с G 01 М 21/64 госудюствень<ы<1 комит ет

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (2 1) 4898235/25 (22) 03,01.91 (46) 07,11,92. Бюл. N. 41 (71) Курский государственный медицинский институт (72) Л,А.Котова (56) Люминесцентный анализ,/Под ред, М.А.Константиновой-Шлезингер, М.: Гос, иэ-во физ.мат. лит. 1961. с. 304-306.

Фармокопейная статья 42-391-87 (лепонекс. азалептин. клозапин).

Изобретение относится к аналитической химии, а именно к способам качественного и количественного определения азалептина.

Известен способ качественного определения азалептина, основанный на использовании ТС-хроматографии препарата и просмотре зоны локализации в УФ-свете при поглощении Л =254 нм, Недостатком данного способа является недостаточная чувствител ь ность (В Ф С 42-391-87).

Известен способ количественного определения азалептина, основанный на растворении анализируемой пробы в смеси хлороформа и метанола (8,2), с последующим добавлением хлористоводородной кислоты и измерении оптических характеристик полученного раствора спектрофотометрическим методом (ВФС 42-391-87)

Недостатком данного способа является недостаточная избирательность.

Целью изобретения является — повышение чувствительности и избирательности способа.,, АЗ„„1774235 А1 (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АЗАЛЕПТИНА (57) Способ определения азалептина заключается в том, что в качестве химических реагентов используют формальдегид и кон центрирован ную серную кислоту. взятых (30:70), обработку которыми проводят последовательно. После этого измеряк<т интенсивность флуоресценции получел ного раствора при максимуме возбуждения флуоресценции 365 нм и максимул1е излучения флуоресценции 410 нм. 6 табл.

Поставленная цель достигается эа счет обработки анализируемой пробы формальдегидом и концентрированной серной кислотой, взятыми в соотношении (30:70), обработку которыми проводят послецовательно, после чего измеряют интенсивность флуоресценции полученного раствора при максимуме возбуждения флуоресценции

365 нм и максимуме излучения флуоре< .ценции 410 нм.

Существенными отличиями предлагаемого способа является то, что в качестве фь. химических реагентов испoJ<ьзуют формаль- Я дегид и концентрированную серную кисло- (1 ту, взятых в соотношении (30:70); у обработку проводят последовательно; измерение интенсивности флуоресценции полученного раств <ра осуществля<от при максимуме возбуждения флуоресценции 365 нм и максимуме иэлу ««ия флуо<зесценции 410 нл1.

При изучении оптимаnhн<<к у<. ресце <ц«<л не изменяется в те <е<ия ." < .<л««с<лмость

1774235

30

Ах В

Х= — — —, Бху

АхРхС

Н х 1000000 интенсивности флуоресценции от времени приведена в табл. 1.

Найдена зависимость интенсивности флуоресценции r i соотношения взятых химических реагентов; формальдегида и концентрированной серной кислоты табл. 2, Прослежена зависимость интенсивности флуоресценции от вида растворителя, применяемого для выяснения конечного эффекта данной реакции табл, 3, последовательности добавления химических реагентов: фармальдегида и концентрированной серной кислоты табл. 4.

Пример 1. Качественное определение азалептина в субстанции. 1-2 мгазалептина обрабатыва от последовательно формальдегидом и концентрированной серной кислотой в соотношении (30:70), яркая фиолетовая флуоресценция, свидетельствующая о наличии азалептина в пробе, наблюдается в результате облучения полученного раствора ультрафиолетовым светом, Пример 2. Количественное определение азалептина ь таблетках, 0,05 r (точная навеска) растертых таблеток вносят в мерную колбу вместимостью 100 мл, обрабатыва, ат 30 мл фпрмальдегида и доводят концентированной серной кислотой до метки(р-р A). В ряд пробирок помещают 0,2; 0,4;

0,6; 0,8; 1,0: 1.2; 1,4; 1,6 мл стандартного раствооа А с концентрацией препарата 1000 мкг/мл и доводят растворы до 10 мл .этилавым эфирам уксуснал кислоты соответственноо.

Полученные растворы перемешивают и флуориметрируют одновременно с испытуемыми растворами при длинах волн возбуждения флуоресценции 365 нм и излучения флуоресценции 410 нм.

Расчет найденного количества азалептина в — àáëåòêàõ "Азалептин" в r осуществляют по формуле: где Х вЂ” содержание азалептина, г;

С вЂ” средняя масса таблетки. г;

Р— обьем (мл), до которого раэбавля)от лсходную навеску:

Н вЂ” исходная навеска, r:

1000000 -. перевод мкг в r.

Сравнение предлагаемого способа и прототипа по избирательности и чувствлтельности в табл. 5.

Результаты количественного определения азалептина в таблетках на модельных смесях обработаны статистически и представлены в табл, б.

Пример 3. Качественное и количественное определение азалептина в воздухе рабочей зоны. Исследуемый воздух со ско ростью 10 л/мин аспирируют через два последовательно соединенных сосуда прибора Зайцева, Проба обрабатывается формальдегидом и концентрированнои серной кислотой (30;70), Для определения азалептина отбирают 1 мл, добавляют до 10 м.: этилового эфира уксусной кислоты соответственно, Полученные растворы перемешивают и g)ëóoðèìåòðèруют.

И,нтенсивность флуоресценции полученных растворов измеряют соответственно градуировочным растворам по сравнени о с контролем; которые готовят одновременно и идентично пробам. Для чего в ряд пробирок вносят 0,2, 0,4, О,б: 0,8;

1,0; 1,2; 1,4 и 1.6 мл стандартного раствора азалептина с содержанием вещества

1000 мкгlмл, добавляют до 10 мл этилового эфира уксусной кислоты соответственно; перемешива от и флуориметрируют при длинах волй возбуждения флуоресценции

365 нм и излучения флуоресценции 410 нм.

Расчет концентрации азалептина в 803 духе рабочей эоны осуществляют по формуле: где А — концентрация вещества в анализируемом растворе пробы. найденная относительно стандартного раствора,мкг/мл;

 — общий объем пробы, мл;Б — обьем раствора пробы, взятый на анализ, мл;

У вЂ” о бьем в оздуха, л, ото б ра н н ы и дл я анализа и приведенный к стандартным условиям.

Формула изобретения

Способ определения азалептина, включающий обработку анализируемой пэобы хлмическими реагентами с последук щим измерением оптических характеристик полученной смеси, по которым проводят спределение, отличающийся тем, что, с целью повышения чувствительности и избирательности способа, в качестве химических реагентов использу от формальдегид и концентрированную серную кислоту, взятых в соотношении 30:70. обработку которыми проводят последовательно, после чего измеряют интенсивность флуоресценции полученного раствора при максимуме возбуждения флуоресценции 365 нм и максимуме излучения флуаресценции 410 нм.

1774235

Таблица 1

Таблица 2

Зависимость интенсивности флуоресценции от соотношения взятых реагентов, Таблица 3

Зависимость интенсивности флуоресценции от вида растворителя, применяемого для выяснения конечного эффекта данной реакции

Интенсивность флу" оресценции>

Вид растворителя

Вода дистиллированная

Иетанол

Пропанол

Диоксан

Хлороформ

Толуол

10,3

8,7

Реакция не вдет

Реакция не идет

Этиловый эфир уксусной кислоты

17 5

6,7

Ди>летилформамид

Гексан

Бенаиловый спирт

Ацетон

Ксилол

Этаноп

Реакция не идет

11>7

Реакция не идет

7,6

Зависимость интенсивности флуоресценции от времени протекания флуоресцентной реакции.

1774235

Т а б л и ц а Й

Зависимость интенсивности Флуоресценции от последовательности добавления химических реагентов. C > „= 100 мкг/мл

Формальдегид, мп

Формальде" гид,мл

30 5,0

П р и м е ч а н и е. Для выяснения конечного эффекта реакции берут

1 мл 100 мкг/мл доводят до 10 мл этиловым эфиром уксусной кислоты

Таблица 5 .Сравнения заявляемого способа и прототипа по избирательности и чувствительности

Заявляемый способ

Прототип

По избирательности

Определению не меыают:лудиомил, бефол, анафранил, наблюдаетсяя ярко-Фиолетовая флуоресценция

"h -- 3й м;

Я= 2/4 нм

Я= 410 нм

По чувствительности ! мкг/мл

100 мкгlмл!

<онцентрированная серная кислота, мл!

<онцентри" рованная серная кислота,мл

Интенсивность флуоресценции, с;

"оу сро

Интенсивность флуоресценции, (i), ср.

Иеыают: лудиомил, анафранил, бефол и др. антидепрессанты

1774235

Таблица с

Результаты количественного определения азалептина в таблетках,на модельных смесях: и=7, Р=95ь

11/Г Найдено, r Найдено, 4

Метрологические характеристики

S-= х

6

Составитель Л.Котова

Техред M.Ìîðãåíòàë . Корректор

Редактор

Заказ 3922 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035. Москва, Ж-35. Раушская наб., 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г, Ужгород, ул.Гагарина, 101

О, 027

О, 026

О, 024

О, 026

0,027

О, 026

О, 026

108,0

104,0

96,0

104,0

108, О

104i 0

104,0

104,0

4,000

1 5122

3,7048

3,56