Способ определения адаптированности чабанов к холодовым нагрузкам в условиях отгонного животноводства

 

Использование: физиология, биохимия и гигиена труда, оценка работоспособности человека при воздействии холода. Сущность изобретения: проводят забор крови, выделяют эритроциты, в них определяют содержание адениловых нуклеотидов. При наличии суммарного количества от 1,7 мкмоль/мл эритромассы и выше, содержании АТФ от 65% и выше и значении коэффициента отношения АТФ к АДФ 3 и выше определяют адаптированность организма чабана к холоду. 1 табл.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (19) (11) (s1)s G 01 N 33/49,33/50

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ Э

С> (Я

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4787009/14 (22) 29.01.90 (46) 23.04;92. Бюл..N 15 (71) Научно-исследовательский институт гигиены и профессиональных заболеваний

Министерства здравоохранения КазССР (72) Е.Ж.Жаркинов и Х.С.Сабырбаева (53) 612.015(088.8) (56) Якименко М.Н. и соавт. Гигиена и санитария. 1984, ¹ 1, с.79. (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АДАПТИРОВАННОСТИ ОРГАНИЗМА ЧАБАНОВ К XOИзобретение относится к физиологии, биохимии и гигиене и может быть использовано для определения адаптированности организма чабанов к холодовым нагрузкам.

Цель изобретения — упрощение способа за счет сокращения числа трудоемких операций.

Способ осуществляют следующим образом, Для определения адаптированности человека к холоду используют три показателя адениловой системы: суммарное содержание адениловых нуклеотидов в эритроцитах, которое у адаптированных лиц составляет

1,7 мкмоль/мл эритромассы и выше, а в неадаптированной контрольной группе от 0,5 до 1,6 мкмоль/мл; уровень АТФ у неадаптированных чабанов до 65%, от 65 и выше— у адаптированных лиц, а также коэффициент отношения АТФ к АДФ, имеющий у адаптированных чабанов значение 3 и выше.

ЛОДОВЫМ НАГРУЗКАМ В УСЛОВИЯХ ОТГОННОГО ЖИВОТНОВОДСТВА (57) Использование; физиология, биохимия и гигиена труда, оценка работоспособности человека при воздействии холода. Сущность изобретения: проводят забор крови, выделяют эритроциты, в них определяют содержание адениловых нуклеотидов. При наличии суммарного количества от 1,7 мкмоль/мл эритромассы и выше, содержании АТФ от 65% и выше и значении коэффициента отношения АТФ к АДФ 3 и выше определяют адаптированность организма чабана к холоду, 1 табл.

Принцип способа заключается в экстракции адениловых нуклеотидов 10%-ной трихлоруксусной кислотой, последующем их разделении методом низковольтного электрофореза и спектрофотометрией элюата в ультрафиолете.

Реактивы: бумага ленинградская быстрая, ¹ 2; 10%-ная трихлоруксусная кислота (ТХУ): 0,1М цитратный буфер рН 4,5; серный эфир, Ход анализа: кровь из вены в количестве

3-4 мл берут в охлажденные пробирки с гепарином, Определяют гематокрит суспензии отмытых в физиологическом растворе эритроцитов, К 0,5 мл эритроцитов прибавляютт 0,5 мл 10 -ной ТХУ, охлаждают 30 мин в испарителе холодильника, центрифугируют при 3000 об/мин. Надосадочную жидкость количественно переносят в чистую пробирку с притертой пробкой и очищают путем встряхивания с трехкратным объемом серного эфира. После разделения слоев эфир отсасывается пастеровской пипеткой, 1728805

* Достоверные отличия от контроля при р < О, ** То же,. при р< 0,01.

Очистку повторяют дважды. B результате очистки эфиром удаляется ряд соединений ненуклеотидной природы, имеющих линии поглощения в ультрафиолете.

Подготовленные экстракты наносят в количестве 0,1 мл на бумажные ленты для электрофореза, отступя от катодного конца ленты. Используются полосы бумаги 40х4

cM . Разделение производят при напряжении 15 Вт/см в камере для бумажного электрофореза, заполненной 0,1 М цитратным буфером рН 4,5.

После разделения фораграммы высушивают в горизонтальном положении в сушильном шкафу при 80 С 3 мин, затем просматривают на ультрахимескопе (фильтр УФ С вЂ” 1).

B качестве свидетелей используются химически чистые препараты АТФ, АДФ

АМФ в концентрации 4х10, 1,5х10, 1 10 м соответственно.

Зоны миграции свидетелей и нуклеотидов ТХУ вЂ” экстракта эритроцитов строго постоянны и характеризуются определенной подвижностью, обнаруживаемой на ультрахимескопе.

Очерченные пятна нуклеотидов вырезают, элюируют в 5 мл 0,1 N HCi при 37 С в течение 4 ч, последние 30 мин непрерывно встряхивая. Оптическую плотность элюатов регистрируют на спектрофотометре при 258 и 290 нм.

Содержание адениловых нуклеотидов рассчитывают по формуле

0,363 Е 40 100

ПГ где 0,363 — расчетный коэффициент адениловой системы; Š— разность экстинкции при 258 и 290 нм; 40 — коэффициенты пересчета на 1 мл.

Пример 1, По предлагаемому способу обследован овцевод-чабан со стажем работы 11 лет. Суммарное количество адениловых нуклеотидов в эритроцитах 1,88

5 мкмоль/мл, содержание АТФ 71, отношение АТФ/АДФ 3,0.

Пример 2. Обследован овцевод-чабан со стажем работы по профессии 12 лет. Суммарное количество адениловых нуклеоти10 дов 2,74 мкмоль/мл; АТФ 73 ; АТФ/АДФ

4,5.

Пример. 3. Обследован овцевод-чабан со стажем работы 9 лет. Суммарное количество нуклеотидов 1,7 мкмоль/мл; АТФ 65; ;

15 АТФ/АДФ 3,0, Суммарные данные, полученные для адаптированных чабанов (co стажем работы от 1 г) и неадаптированных людей (контрольных, чабанов со стажем менее 1 г) при20 ведены в таблице.

Таким образом, предлагаемый способ позволяет вместо реализации сложного исследования комплекса физиологических показателей провести значительно более

25 простой и быстрый биохимический тест.

Формула изобретения

Способ определения адаптированности организма чабанов к холодовым нагрузкам в условиях отгонного животноводства, о т30 л и ч а ю шийся тем, что, с целью упрощения способа за счет сокращения числа трудоемких операций, у испытуемых проводят забор крови из вены, отделяют эритроциты, определяют в них адениловые

35 нуклеотиды, и при суммарном их содержании 1,7 мкмоль/мл эритромассы и более, содержании АТФ 65 и более от суммарных адениловых нуклеотидов и отношении

АТФ/АДФ, равном 3 и более, определяют

40 адаптированность к холодовым нагрузкам.