Способ дифференциальной диагностики туберкулеза и саркоидоза легких

 

Изобретение относится к медицине, а именно к фтизиатрии, и может быть использовано для дифференциальной диагностики туберкулеза и саркоидоза легких. Цель изобретения - повышение точности способа, сокращение времени диагноспики. У больного берут бронхоальвеолярный смыв, центрифугируют, подсчитывают количество альвеолярных макрофагов и одну пробу клеток инкубируют в течение 55-65 мин с 35-40 мкг/мл туберкулина, вычисляют индекс стимуляции адгезии по отношению к пробе без туберкулина и при его величине,равной 25- 35%, диагностируют туберкулез легких, а при величине индекса меньше 25%.- саркоидоз легких. По сравнению с прототипом сокращается время диагностики в 3-4 раза, а точность возрастает до 96,7%.

СОЮЗ СОВЕТСКИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК ((9) () I) (я)5 6 01 N 33/53

1

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГКНТ СССР

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4745063/14 (22) 03.10.89 (46) 15.02.92. Бюл. М 6 (71) Киевский научно-исследовательский институт фтизиатрии и пульмонологии им. акад. Ф. Г. Яновского (72) О. А. Венгерова, Т, И. Гавриленко, Л. В.

Кузнецова и Е. И, Линева . (53) 615.375(088.8) (56) Авторское свидетельство СССР

Ф 1183074, кл. А 61 В 10/00, 1980. (54) СПОСОБ ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНОЙ ДИАГНОСТИКИ ТУБЕРКУЛЕЗА И САРКОИДО3А ЛЕГКИХ (57) Изобретение относится к медицине, а именно к фтизиатрии, и может быть испольИзобретение относится к медицине, а именно к фтизиатрии, и может быть использовано для дифференциальной диагностики туберкулеза и саркоидоза.

Целью изобретения является повышение точности способа и сокращение времени диагностики.

Способ осуществляют следующим образом.

Бронхоальвеолярный смыв (БАС), полученный методом бронхоальвеоля рного лаважа во время проведения бронхоскопии, в объеме 8 — 10 мл помещают в пластиковую пробирку с 1-2 каплями гепарина и хранят на льду(при 0-4 С), затем содержимое пробирки центрифугируют в течение 10 мин при

1500 об/мин при 0 С, снимают надосадочную жидкость. Полученный осадок ресуспендируют в 1 мл культуральной среды 199, заправляют в камеру Горяева для подсчета зовано для дифференциальной диагностики туберкулеза и саркоидоза легких. Цель изобретения — повышение точности способа, сокращение времени диагностики. У. больного берут бронхоальвеолярный смыв, центрифугируют, подсчитывают количество альвеолярных макрофагов и одну пробу клеток инкубируют в течение 55-65 мин с 35-40 мкг/мл туберкулина, вычисляют индекс стимуляции адгезии по отношению к пробе без туберкулина и при его величине, равной 2535 g, диагностируют туберкулез легких, а при величине индекса меньше 25ф .— саркоидоз легких. По сравнению с прототипом сокращается время диагностики в 3 — 4 раза, а точность возрастает до 96,7oj общего количества клеток в 5 больших квадратах, делают мазок на клеточный состав

БАС (для подсчета процентного соотношения АМ, лимфоцитов и нейтрофильных гранулоцитов): для выявления туберкулиновой аллергии на опытное стекло с лункой сте- М рильной пипеткой наносят 0,05 мл раствора Q) туберкулина РРД, затем в лунки контрольного и опытного стекол наносят по 0,1 мл (ф клеточной взвеси. После 55 — 65 мин инкубации при 37 С тщательно отмывают стекла в культуральной среде 199, резиновым шпа- . телем аккуратно отделяют от стенок лунок юаюЬ прикрепившиеся клетки, добавляя по 0,1 мл среды, заправляют камеру Горяева, под микроскопом производят подсчет количества прикрепившихся под действием антигена клеток, а также и в контроле, в пяти больШих квадратах определяют адгезию по формуле

1712878 х= Х10, В ХС где А — абсолютное количество альвеолярных макрофагов (АМ), прикрепившихся к стеклу (х105),  — процентное содержание альвеолярных макрофагов в цитограмме БАС;

С вЂ” абсолютное количество клеток, выделенных из БАС; х, — относительное число альвеолярных макрофагов, способных к адгезии.

В результате проведенных исследований установлено, что при стимуляции адгезии ЛМ БАС в пределах 25-35 диагностируют туберкулез, менее 25 — саркоидоэ.

При осуществлении предлагаемого способа не было зафиксировано случая стимуляции АМ БАС при 55 — 65-минутной стиМуляции с туберкулином свыше 35%.

Пример 1. Больная Д., 62-х лет, поступила в отделение терапии туберкулеза и неспецифических заболеваний легких (НЗЛ) 03.06,86 r. с диагнозом: диссеминированный процесс в легких неясной этиологии, Из анамнеза было известно, что

02.03.86 г. при профосмотре обнаружены изменения в легких, по поводу чего больная направлена для обследования и лечения в противотуберкулезный диспансер, где находилась в течение 2,5 мес. Так как состояние не улучшалось, больная была направлена в Киевский НИИ фтизиатрии и пульмонологии (КНИИФП).

Данные обследования: Нв — 126 г/л; л. =

4,1х10 г/л; э. — 1о ; n. — 1, с. — 52%; л,—

37 ; м, — 12%; CO3 — 9 мм/ч. Общий анализ мочи — без особенностей. В мокроте микобактерии туберкулеза (МБТ) не обнаружены. Проба Манту с 2ТŠ— Зх3 мм. Р-графия; на верхушках обоих легких — полиморфные очаги с неровными контурами и инфильтрацией. Фибробронхоскопия (ФБС) — без патологиии.

Иммунологические исследования БАС, полученного при ФБС, выполнены согласно предлагаемому способу: определена адгезия (a процентах) AM

БАС при 55-минутной инкубации без взаимодействия с туберкулином, определена адгезия (в процентах) АМ

БАС при 55-минутной инкубации с туберкулином в концентрации 35 мкгlмл; сопоставлены результаты и определена стимуляция адгезии AM БАС (в процентах).

Таким образом, при постановке реакции адгеэия AM БАС без взаимодействия с туберкулином равнялась 26, при взаимодействии-32;5$. Стимуляция адгезии AM

БАС составила 25, что подтверждает диагноз туберкулеза у данной больной. Время выполнения способа дифференциальной диагностики — 1 ч 40 мин.

Пример 2, Больной T., 32 х лет, 5 поступил в клинику КНИИФП.

Иммунологические исследования БАС выполнены согласно предлагаемому способу: определена адгезия (в процентах) АМ

10 БАС при 60-минутной инкубации без взаимодействия с туберкулином; определена адгезия (s процентах) AM

БАС при 60-минутной инкубации с туберкулином РРД в концентрации 40 мкг/мл;

15 сопоставлены результаты и определена стимуляция адгезии AM БАС (в процентах), Таким образом, при постановке реакции адгезия AM БАС без взаимодействия с туберкулином равнялась 28%, при взаимо20 действии с туберкулином — 30,8%. Стимуляция адгезии АМ БАС составила 10,0%, что позволяет исключить наличие туберкулезного процесса и подтвердить диагноз сарко. идоза. Время выполнения способа

25 дифференциальной диагностики — 1 ч 59 мин.

Всего обследовано по 30 больных различными формами туберкулеза и саркоидоза легких, 30 Индекс стимуляции адгезии АМ БАС без и при взаимодействии с туберкулином РРД у больных туберкулезом легких равен 25—

35, что является дифференциально диагностическим критерием в определении

35 туберкулезного процесса.

При величине индекса стимуляции адгезии AM БАС при взаимодействии с туберкулином РРД ниже 25 у больных диагностируютт саркоидоз.

40 Таким образом, для дифференциальной диагностики туберкулеза и саркоидоза необходимо вычислить индекс стимуляции адгезии АМ БАС при инкубации с туберкулином РРД в концентрации 35 — 40 мкг/мл в

45 течение 55-65 мин.

Изобретение позволяет сократить время дифференциальной диагностики до 1,5-2 ч путем исключения 5-6-часового этапа приготовления реактивов непосредственно пе50 ред каждым опытом, упростить методику комплекса проведенных диагностических тестов за счет использования минимального количества общедоступных реактивов и способа учета результатов и повысить точ55 ность дифференциальной диагностики туберкулеза и саркоидоза до 96,7%.

Формула изобретения

Способ дифференциальной диагностики туберкулеза и саркоидоза легких, включающий забор материала, исследование его

1712878

Составитель В.Литовченко

Техред M.Моргентал Корректор И.Муска

Редактор А.Лежнина

Заказ 533 Тираж Подписное

ВНИИПИ Государственного. комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", r Ужгород, ул.Гагарина, 101 после инкубации с туберкулином, о т л и ч ею шийся тем, что, с целью повышения точности способа и сокращения времени диагностики, исследуют макрофаги бронхоальвеолярного смыва, причем одну пробу инкубируют в течение 55-65 мин с 35 — 40 мкг/мл туберкулина с последующим вычислением индекса стимуляции адгезии макрофагов по отношению к пробе без туберкулина и при его величине, равной 25 — 35,äèàãíîñòèðóþò туберкулез лег5 ких, а при величине индекса меньше 25 диагностируют саркоидоз легких,