Способ определения т-лимфоцитов крови человека

Авторы патента:

G01N33/53 - иммунологический анализ, анализ биоспецифического связывания, материалы для этого (препараты для терапевтических целей, содержащие антигены или антитела,A61K; гептены вообще, см. соответствующие рубрики в классе C07; пептиды, например протеины, вообще C07K)

Изобретение относится к медицине, в частности к иммунологии, и может быть использовано при оценке иммунного статуса человека. Цель изобретения - сокращение времени анализа и упрощение способа. У обследуемых производят забор крови, выделение лимфоцитов, инкубацию их с частицами меламин-формальдегидной смолы в течение 30 мин при температуре 4 °С, препараты высушивают, окрашивают и подсчитывают число розеткообразующих клеток на 100 лимфоцитов. В сравнении с прототипом сокращено в 2 раза время анализа. В результате использования частиц меламин-формальдегидной смолы упрощена процедура анализа путем исключения этапов фиксации и отмывки и, кроме того, частицы меламин-формальдегидной смолы дают одинаковые результаты в сравнении с эритроцитами барана независимо от сроков их хранения. 2 табл.

СОЮЗ СОВЕТСНИХ

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (19) (11) (ю 4 G Ol N 33 53

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ

ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И ОТКРЫТИЯМ

ПРИ ГННТ СССР

К АВТОРСКОМУ(СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 4332839/28-14 (22) 03.12.87 (46) 07.12.89. Бюл. У 45 (71) 1-й Ленинградский медицинский институт им. акад. И.П.Павлова (72) А.А.Тотолян и Н.В.Шамкова (53) 615.375 (088.8) (56) Джондал М. Лимфоциты, выделение, фракционирование и характеристика. вЂ” M.: Медицина, 1980, с. 100-111. (54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ Т-ЛИ(ФОБИТОВ

КРОВИ ЧЕЛОВЕКА (57 ) Изобретение о тиос итс я к медицине, в частности к иммунологии, и может быть использовано при оценке иммунного статуса человека. Цель изобретения вЂ” сокращение времени анализа

Изобретение относится к медицине, в частности к иммунологии, и может быть использовано при оценке иммунного статуса человека.

Целью изобретения является сокравЂ” щение времени анализа и упрощение способа.

Способ осуществляют следующим образом.

В каждую лунку микрокамеры для иммунологических реакций (планшет

Терасаки) вносят по 0,005 мл лейкоцитов в концентрации 1,0-1,5 10 /мл и

О, 005 мл суспензии частиц меламинформальдегидной смолы с диаметром частиц 5, 0 мкм в концент рации 6, 0-7, О«

«1 0 /мл. Камеры цент рифу г ируют

5 мин при 1000 об/ми», инкубируют

2 и упрощение способа. У обследуемых производят забор крови, выделение лимфоцитов, инкубацию их с частицами меламинформальдегидной смолы в течео ние 30 мин при температуре 4 С, препараты высушивают, окрашивают и подсчитывают число розеткообразующих клеток на 100 лимфоцитов. В сравнении с прототипом сокращено в 2 раза время анализа. В результате использования частиц меламинформальдегидной смолы упрощена процедура анализа путем исключения этапов фиксации и отмывки и, кроме того, частицы меламинформальдегидной смолы дают одинаковые результаты в сравнении с зритроцита- O е ми барана независимо от сроков их хранения. 2 табл.

30 мин при 4 С, фильтровальной бумагой удаляют надосадок, камеры вы,сушивают и окрашивают по Лейшману.

При микроскопировании подсчитывают количество розеткообразующих лимфоцитов на 100 лимфоцитов (эа розетку принимают лимфоцит, присоединивший

3 и более частиц меламинформальдегиднои смолы) .

Пример 1. У 16 практически здоровых людей определяют количество

Т-лимфоцитов по предлагаемому способу.

Полученные результаты приведены в табл. 1.

Пример 2. У 5 практически

0 здоровых людей из веноэной крови вы1527590

Таблица!

Обследованный

Содержание Т-лимфоцитов, %

14 !

Та блица 2

Количеств только ЕРОЛ, %

Обследо ванный

Количество

E-РОЛ и ОКТ11 лимфоцитов, %

Количество только ОКТ-11+ лимфоцитов, %

Составитель В.Литовченко

Редактор И,Горная Техред M.Äùùê Корректор A.Îáðó÷àð, Заказ 7507/51 Тираж 789 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Производственно-издательский комбинат "Патент", г.Ужгород, ул. Гагарина,101 деляют фракцию мононуклеаров, которую используют для постановки розеткообраэования с частицами меламинформальдегидной смолы. Затем полученную суспензию лейкоцитов и частиц меламинформальдегидной смолы инкубируют с моноклональными антителами ОКТ-11, меченными флюоресцеином. Определяют количество розеткообраэующих лимфо- fp цитов (Е-РОЛ) и ОКТ-11 лимфоцитов °

Полученные результаты приведены в табл ° 2.

Таким образом, в предлагаемом способе отсутствуют этапы фиксации глутаровым альдегидом (который является сильным канцерогеном) и отмывания клеток физиологическим раствором.

Кроме того, более чем в 10 раз сокращена длительность этапа приготовления 20 суспензии индикаторных частиц, общая длительность способа составляет не более 60 мин, в то время как длительность известного способа 120-135 мин.

Кроме того,при хранении эритроци- 25 ты барана теряют свою активность (срок хранения не более 2 недель), частицы меламинформальдегидной смолы ,дают одинаковые результаты независимо от сроков хранения. 30

Формула изобретения

Способ определения Т-лимфоцитов крови человека, включающий забор крови, выделение лимфоцитов, инкубацию их в присутствии индикаторных частиц, подсчет числа розеткообразующих клеток,отличающий с ятем, что, с целью сокращения времени анализа и упрощения способа, в качестве индикаторных частиц используют частицы меламинформальдегидной смолы.

Изобретение относится к медицине, а именно к внутренним болезням, и может быть использовано, в частности, для определения эффективности традиционного лечения воспалительных заболеваний

Способ определения аллергических реакций на лекарственный препарат // 1527588

Изобретение относится к медицине и может быть применено для диагностики побочных иммунологических и неиммунологических реакций на нестероидные противовоспалительные препараты и ненаркотические аналгетики

Способ определения неполных антител // 1525578

Изобретение относится к иммунологии

Способ оценки фагоцитоза // 1522923

Изобретение относится к медицине, в частности к иммунологии, и может быть использовано для улучшения качества анализа фагоцитоза, например, чумного микроба

Способ диагностики активного течения хронического гломерулонефрита // 1522105

Изобретение относится к медицине, а именно к иммунологии, и может быть использовано для диагностики активного течения хронического гломерулонефрита

Способ диагностики заболеваний печени // 1522104

Изобретение относится к медицине, в частности к иммунодиагностике заболеваний печени

Способ выделения плазмоцитов из почечной ткани в эксперименте // 1522071

Изобретение относится к медицине, а именно к иммунологии

Способ определения нарушений специфического т-клеточного иммунитета // 1520447

Изобретение относится к лабораторной иммунодиагностике в медицине и ветеринарии и позволяет дать четырехстепенную классификацию выраженности нарушений клеточного иммунитета на основе дифференцированной оценки уровня антигенраспознающей функции Т-лимфоцитов и сохранности акцепторной функции Т-лимфоцитов в отношении эндогенного и экзогенного трансфер-фактора

Способ диагностики хронического алкоголизма // 1520446

Способ получения иммуносорбента // 1517545

Изобретение относится к медицине, в чааности к иммумохимик и может быть иаюльэовано для выделе мя с помощью аффимюй хроматографии иммуноглобутмна G, а также FC-фрагментов и иммунных комплексов из крови и других биолсгическихжидкоаей

Способ диагностики ранних отклонений в иммунном статусе новорожденных детей // 2101707

Изобретение относится к медицине, а именно к педиатрии, и может быть использовано для диагностики ранних отклонений в иммунном статусе новорожденных

Способ выявления высокоаффинных поли- и моноклональных антител к водонерастворимым гаптенам // 2102080

Изобретение относится к области биотехнологии, а именно к методам иммунохимического определения гаптенов (ксенобиотиков) в образцах биологического происхождения и объектах окружающей среды, и может быть использовано для выявления высокоаффинных поли- и моноклональных антител к водонерастворимым гаптенам

Иммуногенная композиция против боррелиоза лайма, способ иммунизации млекопитающего против боррелиоза лайма, способ получения белка pc borrelia burgdorferi, диагностический агент для обнаружения b.burgdorferi и способ обнаружения антител к b.burgdorferi // 2102081

Изобретение относится к предотвращению болезни Лайма у млекопитающих

Устройства для автоматического проведения иммуноанализа за несколько последовательных этапов по меньшей мере одного биологического вещества из множества биологических образцов, способ и реактив для применения указанных устройств // 2102758

Изобретение относится к устройству для автоматического проведения иммуноанализа за несколько последовательных этапов по меньшей мере, одного биологического вещества из множества биологических образцов, а также к способу и реактивам для использования указанного прибора

Способ обнаружения или количественного определения аналита в образце // 2102759

Изобретение относится к анализам и, в частности к катализируемому осаждению репортера через активированный конъюгат для усиления детектируемого сигнала, вследствие чего улучшается детекция и/или количество аналита в образце

Способ обнаружения или количественного определения аналита в образце // 2102759

Способ определения биологически активных веществ в жидкостях и устройство для его осуществления // 2102760

Изобретение относится к области медицины, медицинской техники, ветеринарии, экологии и может быть использовано для определения биологически активных веществ в любых биологических жидкостях, окружающей среде, пищевых продуктах, в частности в диагностике вирусных, бактериальных, паразитарных и соматических заболеваний, а также для контроля эффективности лечения

Способ диагностики спаечной болезни брюшины у детей // 2103689

Изобретение относится к медицине, а именно к детской хирургии и клинической иммунологии, и может быть использовано для диагностики спаечной болезни брюшины у детей, оперированных по поводу острого аппендицита

Способ определения функциональной активности лейкоцитов при беременности // 2103690

Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству и может быть использовано для оценки состояния иммунной системы беременной женщины

Способ диагностики хронического простатита // 2103691

Изобретение относится к медицине, а именно к урологии, и может быть использовано для диагностики хронического простатита