Способ получения биокатализатора для определения концентрации глюкозы
СОЮЗ СО8ЕТСНИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСНИХ
РЕСПУБЛИК
С 12 1/00
1 .1 в
1,.ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Н A ВТОРСНОМ,Ф СВИДЕТЕЛЬСТВУ
ГОСУДАРСТ8ЕННЫЙ НОМИТЕТ
ПО ИЗОБРЕТЕНИЯМ И (ЛНРЬГТИЯМ
Г РИ ГКНТ СССР г (46) 30. 04.90. Бюл. Н - 16 (21) 4071823/28-14 (22) 19.05.86 (71) Институт катализа СО АН СССР (72) Г.А.Коваленко, В.Д.Соколовский и Л.Н.Рачковская (53) 612.015 (088.8) (56) Прикладная биохимия и микробиология, 1986 т.22, У 5, с. 675678.
Изобретение относится к способам получения высокостабильных биокаталиэаторов на основе иммобилизованных ферментов для использования их в аналитических системах для определения,концентрации различных соединений, в частности глюкозы, и может быть применено в клинической биохимической практике, микробиологическом производстве и пищевой промышленности.
Цель изобретения — увеличение стабильности биокатализатора на основе иммобилизованной глюкоэооксидазы. Это достигается за счет использования в качестве адсорбекта для глюкозооксидазы среднезауглероженной О -окиси алюминия с углеродным покрытием 2„8-12,8 мас.Ж
На графике приведена зависимость величины адсорбции глюкозооксидазы от начальной концентрации фермента в растворе.
„.80„„147 1 А1 (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ БИОКАТАЛИЗАТОРА ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ КОНЦЕНТРАЦИИ
ГЛЮКОЗЫ (57) Изобретение относится к биохимии. Цель изобретения — увеличен:.е стабильности биокатализатора. Сорбент заливают буферным раствором фермента.
Через 2 сут,препарат отмывают бу-. ферным раствором. Глюкоэооксидаэа, адсорбироваккая на среднезауглероженной 8 -окиси алюминия, деэактивиру" ется через 1 5-2 мес.. t ил.
Пример 1. Адсорбционная иммобилизация глюкозооксидазы на «
0-окиси алюминия.
Адсорбцию глюкоэооксицаэы из гриба Aspergillus niger на д -окиси алюминия (уд * 84 м /r) проводят
@««ь
Ъ 0 в статических условиях при 22"24 С: . ь
50 мг сорбента заливают 4 мл буфер- « 4 ного раствора фермента (0,05 М фос- О фатный буфер рН 6,0) с начальной концектрацией 70-1200 мкг/мл и выдержи- QP, . вают 2 сут., периодически помеюлзаа сорбект и раствор фермента. По виду зависимости величины адсорбции от .начальной концентрации белка в растворе (см. график) можно заключить, что адсорбция глюкозооксидазы ка среднезауглерожекной 0 -окиси алюминия — полимолекуляркал.
Полученный препарат отмывают ст несвязанного белка 3-4-кратным про. мыванием буферным раствором рН 6,СПри выдержквакин отмытого бнокатали1475151
Формула изобретени®
Составитель Л.Сабурова
Техред А .Кравчук Корректор С. Шекмар
Редактор Л.Лешкова Заказ 1695 Тираж 487 Подписное
ВНИИПИ Государственного комитета по изобретениям и открытиям при ГКНТ СССР
113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5
Производственно-издательский комбинат "Патент". r.Óæãîðîä, ул. Гагарина,101 затора в.буфере рН 6,0 и растворе субстрата десорбировавшегося с носителя фермента не обнаруживается, адсорбция прочная.
Глюкоэооксидаза, адсорбированная на среднеэауглероженной 8 -окиси алюминия, деэактивируетея через 1,52 мес. хранения при 22-24 С.
П р и и е р 2. Адсорбционная иммобилиэация глюкоэооксидазы на эауглероженной О -окиси алюминия.
Аналогичен примеру 1, только в качестве адсорбента используется 9 "окись алюминия с величиной углеродного покрытия 0,5 мас..Х (S = УУ м /г), Величина адсорбции зависит от начальной концейтрации фермента в растворе (см. график). Адсорбция в изученных условиях прочная. 20
Иммобилиэованная на таком носителе глюкозооксидаэа дезактивируется за
2 мес. хранения в буферном растворе рН 6,0 при 22-24 С.
Способ получения биокаталиватора для определения концентрации. глюкозы путем иммобилизации глюкозооксидазы на сорбенте с Последующим удалени" ем несвязанного фермента, о т л и ч а ю шийся тем, что, с целью увеличения стабильности биокатализа-. тора, в качестве сорбента используют эауглероженную ©-окись алюминия с величиной углеродного покрытия 2,812,8 мас.X.
