Способ определения антигенной активности вируса паротита

 

Изобретение относится к вирусологии . Цель изобретения - повьппение точности. Группе морских свинок вводят подкожно вирус паротита. Через 4-8 недель у животных берут кровь и в сыворотке определяют титр вируснейтрализующих антител в реакции нейтрализации с постоянной дозой эталонного штамма вируса паротита . Способ позволяет в условиях производственного выпуска паротитной вакцины контролировать антигенные свойства вакцинного штамма. 2 табл.

СОЮЗ СОВЕТСНИХ .

СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ

РЕСПУБЛИК (19) 0}) (51) 4 С 01 И 33/53

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

K A8TOPCHOMY СВИДЕТЕЛЬСТВУ (21) 3845384/28-14 (22) 17. 12. 84

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР

h0 ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (46) 30. 06. 87. Бюл. Ф 24 (71) Московский научно-исследовательский институт вирусных препаратов (72) Т.И. Капцова и О.И. Скворцова (53) 615. 373 (088. 8) (56) J, Immunol, 1969, v. 102, И 4, р. 1093-1098. (54) СПОСОБ 01П,ЕДЕЛЕНИЯ АНТИГЕННОЙ

АКТИВНОСТИ ВИРУСА ПАРОТИТА (57) Изобретение относится к вирусологии. Цель изобретения — повышение точности. Группе морских свинок вводят подкожно вирус паротита. Через 4-8 недель у животных берут кровь и в сыворотке определяют титр вируснейтрализующих антител в реакции нейтрализации с постоянной дозой эталонного штамма вируса паротита. Способ позволяет в условиях производственного выпуска паротитной вакцины контролировать антигенные свойства вакцинного штамма. 2 табл.

Таблица 1

Антигенная активность вариантов одного и того же штамма вируса паротита, отличающихся уровнем пассирования в культуре клеток

Антигенная активность вариантов вируса, изученная при разных условиях иммунизации морских свинок по примерам

Количество. пассажей

Вариант вируса в культуре клеток

) 2 I 3

3,24

4,2

3,0

1,5

1,56

2,8 (1,0 <1,0 с1,0

37 Антигениая активность выражена значением log титра ВНА в сыворотках

2 крови морских свинок, иммунизированных соответствующим вариантом вируса.

1 13

Изобретение относится к медицине, а именно к вирусологии, и может быть использовано при изучении свойств вируса паротита.

Цель изобретения — повышение точности определения антигенной активности вируса паротита.

Способ осуществляют следующим образом.

Беспородных морских свинок весом 200,0-250,0 г иммуниэируют подкожно путем однократного введения

10-100 ГАДЕ (пятидесятипроцентных гемадсорбирующих единиц) вируса паротита в объеме 1,0 мл с последующим определением титров вируснейтрализующих антител (BHA) через 4-8 недель после иммунизации.

Пример 1. tO ГАДЕ р вируса паротита каждого из исследуемых вариантов штамма вводят подкожно группе морских свинок. Через 8 недель после иммунизации у всех животных берут кровь. Сыворотку крови от животных, иммунизированных одним и тем же вариантом штамма, объединяют.

В смеси сыворотки определяют титр вируснейтрализующих антител (ВНА)

I в реакции нейтрализации с постоянной дозой (32 ГАДЕ О ) эталонного штамма вируса паротита. Антигенная активность 3-х вариантов А,Б и В

20754 2 одного и того же штамма вируса паротита, отличающихся уровнем пассирования в культуре клеток, представлена в табл. 1, пример 1.

Пример 2. Животных иммуниsHpoBaJIH как в примере 1. Для иммунизации использовали 32 ГАДЕ вируса. Кровь брали через 6 недель после иммунизации. Титр ВНА в сыво10 ротках морских свинок определяли как в примере 1. Антигенная активность

3-х вариантов А,Б и В одного и того же штамма вируса паротита, отличающихся уровнем пассирования в культу15 ре клеток, представлена в табл. 1, пример 2.

Пример 3. Иммунизацию жи— вотных и исследование сыворотки проводили как в примере 2. Для иммуниза20 ции использовали 100 ГАДЕ вируса.

Кровь брали через 4 недели после иммунизации. Результаты представлены в табл. 1, пример 3.

Данные, представленные в табл. 1, показали, что все модификации(примеры 1, 2 и 3)предлагаемого способа позволили выявить различия антигенной активности у изученных вариантов (А, Б,В) вируса паротита, полученных

30 из одного и того же штамма, но отличающихся количеством пассажей, проведенных в культуре клеток (от 7 до 37).

1320754

Клонированный Антигенная активвариант ность клонированного варианта

Г

Д ,Е

3,24

1,75 с1,0

Составитель В.Фролова

Техред M.Ходанич

Корректор В.сутяга

Редактор Е.Копча

Заказ 2655/49

Тираж 7?6 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Иосква, 7<-35, Раушская наб., д. 4!5

Производственно-полиграфическое предприятие, г. Ужгород, ул. Проектная, 4

П р и и е р 4. Иммуниэацщо животных и исследование сывороток проводили как в примере 1. Для иммунизации использовали 40 ГАДИ д вируса.

Кровь брали через 6 недель после иммунизации. Титр ВНА в сыворотках крови морских свинок, иммунизированных клонированными вариантами Г,Д,Е, полученными из популяции одного и того же штамма вируса паротита, представлен в табл. 2.

Таблица 2

Антигенная активность выражена значением log титра ВНА в сыворотках крови морских свинок, иммунизированных соответствующим вариантом вируса.

Результаты опыта, представленные в табл. 2, показывают, что использование предлагаемого способа позволило выявить различия антигенной активности вариантов вируса паротита, полученных из популяции одного и того же штамма путем клонирования методом бляшек.

Таким образ ом, исполь зов ание предлагаемого способа позволяет.более точно установить факт снижения антигенной активности, наступающей в процессе длительного пассирования вируса паротита в культуре клеток, а также установить наличие в популяции штамма вируса паротита вирусных частиц с различной антигенной

10 активностью, что свидетельствует о гетерогенности популяции по признаку антигенности. Кроме того, предлагаемый способ определения антигенной активности вируса паротита позвоf5 ляет в условиях производственного выпуска паротитной вакцины контролировать антигенные свойства вакцинного штамма, что спбсобствует повышению стабильности и стандартности.

20 свойств коммерческой вакцины;

Формула изобретения!

Способ определения антигенной активности вируса паротита путем под25 кожной иммунизации морских свинок с последующим определением титра антител в сыворотке крови, о т л ич а ю шийся тем, что, с целью повышения точности, морских свинок

30 весом 200-250 r иммунизируют однократно подкожно в дозе 10-100 АДЕ вируса паротита и определяют титр антител через 4-8 недель после иммунизации.