Способ определения днк в клетках
Изобретение относится к цитохимии и предназначено для количественного определения ДНК в клетках микроорганизмов методом проточной цитофлюорометрии. Цель изобретения - повышение чувствительности определения ДНК в клетках путем устранения флуоресценции не связанного с ДНК люминесцентного красителя, содержащего a шнoгpyппy в хлороформной группировке . Для этого клетки Е. coli или Вас. subtil is фиксируют 70%-ным этанолом 1 ч, затем центрифугируют 5 мин при 1500. Осадок промывают в дистиллированной воде и обрабатывают 1 ч раствором РИКаэы (0,1% раствор втрисбуфере рН 7,2 10 ммоль MgCl.g) при . Затем клетки подвергайт кислотному гидролизу в б NHC1 до полной депуринизации ДНК. Для раствора красителя берут 10 мг бромистого этидяя на 100 мл воды, добавляют О,1 мл хлористого тионила, С зачетом растворимости sbj получают в растворе эквимолярные концентрации красителя и сернистого газа. 1 табл. (Л 00 СХ) О5