Способ качественного определения глютаминовой кислоты или цистеина
СПОСОБ КАЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ ГЛЮТАМИНОВОЙ КИСЛОТЫ ИЛИ ЦИСТЕИНА путем o6j . работки водного раствора анализируемой пробыцветореагентом с последующим фиксированием окрашивания полученного раствора, отличающийся тем, что, с целью повышения специфичности определения , в качестве цветореагента используют бис-
СОЮЗ СОВЕТСКИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ
РЕСПУБЛИК
m 4 G 01 N 21/78
АРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР (21) 3795570/23-04 (22) 28.09.84 (46) 15.11.85. Бюл. № 42 (71) 1-й Московский ордена Ленина и ордена Трудового Красного Знамени медицинский институт им. И. M. Сеченова (72) H. А. Овеснова и М. H. Колочевская (53) 543.432 (088.8) (56) Зальцберг В. Х. Живописцев В. П., Богословская О. Н. Использование аминона при анализе лекарственных соединений. В сб.: Пиразолоны в аналитической химии. Пермь, 1974, с. 39.
Шрайнер P. и др. Идентификация органических соединений. M.: Мир, 1983, с. 273.
„„SU„„1191791 (54) (57) СПОСОБ КАЧЕСТВЕННОГО
ОПРЕДЕЛЕНИЯ ГЛЮТАМИНОВОЙ
КИСЛОТЫ ИЛИ ЦИСТЕИНА путем обработки водного раствора анализируемой пробы- цветореагентом с последуюши м фиксированием окрашивания полученного раствора, отличающийся тем, что, с целью повышения специфичности определения, в качестве цветореагента используют бис- (4-диметиламинофенил) - (1-пара-сул ьфофен ил-3- метили ир азолон-5-ил ) - к а рбинол в присутствии хлороформа и фиксируют окраску хлороформного слоя.
1191791
Способ
Аминокислота
Описываемый
Изв естный
Лекарственные вещества
Окрашивание отсутствует
Фиолетовое окрашивание
Аминалон
То же
То же
Гистидин
Фиолетовое окрашив ание
Глютаминовая кислота
Метионин
Окрашивание отсутствует
Изобретение относится к аналитической химии, к качественному определению органических соединений, а именно к качественному определению аминокислот: глютаминовой и цистеина, которые применяются в фармацевтической практике.
Целью изобретения является повышение специфичности определения.
Пример 1. В пробирку емкостью 20 мл помещают 0,5 мл 0,05%-ного водного раствора бис- (4-диметиламинофенил) - (1-пара-сульфофенил-3-метилпиразолон-5-ил)-карбинола(аминона), добавляют 0,1 мл 0,1 %-ного водного раствора глютаминовой кислоты и 1 мл хлороформа. Содержимое пробирки встряхивают, слой хлороформа окрашивается в фиолетовый цвет.
Пример 2. 0,5 г порошка растертых таблеток глютаминовой кислоты по 0,25 г, покрытых оболочкой, растворяют в 5 мл воды и фильтруют через бумажный фильтр.
В пробирку емкостью 20 мл помещают
0,5 мл 0,05%-ного водного раствора бис- (4-диметиламинофенил) - (1-пара-сульфофенил-3-метилпиразолон-5-ил) -карбинола (аминона), добавляют 0,1 мл приготовленного фильтрата и 1 мл хлороформа. Встряхивают содерж имое пробирки. Слой хл ороформа окрашивается в фиолетовый цвет.
Пример 3. 0,5 г порошка растертых таблеток глютаминовой кислоты по 0,5 г (без оболочки) растворяют в 5 мл воды и фильтруют через бумажный фильтр. В пробирку емкостью 20 мл помещают 0,5 мл 0,05%-ного водного раствора бис-(4-диметиламинофенил) - (1-пара-сульфофенил-3-метилпиразолон-5-ил) -карбинола (аминона), добавляют
0,1 мл приготовленного фильтрата и 1 мл хлороформа. Встряхивают содержимое пробирки. Слой хлороформа окрашивается в фиолетовый цвет.
Пример 4. 0,5 г порошка растертых таблеток глютаминовой кислоты по 0,25 г, растворимых в кишечнике, растворяют в
5 мл воды и фильтруют через мубажный фильтр. В пробирку емкостью 20 мл помешают 0,5 мл 0,05%-ного водного раствора
5 бис- (4-диметиламинофенил) - (1-пара-сульфофенил-3-метипиразолон-5-ил) -карбинола (аминона), добавляют О,1 мл приготовленного фильтрата и 1 мл хлороформа. Встряхивают содержимое пробирки. Слой хлороформа окрашивается в фиолетовый цвет.
1п Пример 5. В пробирку емкостью 20 мл помещают 0,5 мл 0,05%-ного водного раствора бис-(4-диметиламинофенил) -(1-пара-сульфофенил-3-метилпиразолон-5-ил)-карбинола(аминона), добавляют 0,1 мл 0,05%ного водного раствора цистоина и 1 мл
15 хлороформа. Содержимое пробирки встряхивают, слой хлороформа окрашивается в фиолетовый цвет.
Чувствительность качественного определения кислоты глютаминовой 40 мкг/мл. цистеина 20 мкг/мл. Вспомогательные вещества, входящие в состав таблеток, определению не мешают; чувствительность определен ия не мен яется.
Другие аминокислоты — лекарственные вещества: метионин, гистидин, амина10H, фенилбут, а также прочие а-аминокисло25 ты (см. таблицу) — в указанных условиях не дают окрашенного экстрагируемого соединения с аминоном. Отсутствует экстракция а-аминокислот, в том числе и глютаминовой кислоты и цистеина, с другими кислотными красителями: бромфеноловым красным, бромкрезоловым пурпурным, метиловым оранжевым и бромтимоловым синим.
В таблице представлена специфичность способов идентификации аминокислот
Представленные данные показывают. что описываемый способ качественного определения глютаминовой кислоты и liHcTE ина по сравнению с известным является более специфичным.
1191791
Продолжение таблицы
То же
Фенилбут
Цистеин
Фиолетовое окрашивание
Прочие
Окрашивание огсутствует
Алании
То же
Аргинин
Глицин t 7
>7
Изолейцин
Лейцин
JIH3HH
Норлейцин
Оксилизин
77
77 7 7
Окрашивание отсутствует
Фиолетовое окрашивание сС - Фенилаланин t 7
Р -Фенилаланин
Редактор H. Швидкая
Заказ 7150/40
Орнитин
Пролин
Серии
Треонин
Составитель, В. Шки IbKo83
Техред И. Верес Корректор М. Максим ишииец
Тираж 896 Подписное
ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий ! 13035, Москва, Ж вЂ” 35, Раушская наб., д. 4/5
Филиал ППП «Патент», г. Ужгород. чл. Проектная, 4


