Способ определения фосфолипидов в биологических мембранах
СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ФОСФОЛИПИДОВ В БИОЛОГИЧЕСКИХ МЕМБРАНАХ путем обработки препаратов хлорс|формом и метанолом и окрашивания молибденовым реактивом, отличающийся тем, что, с целью упрощения способа, к анализируемой пробе добавляют 3,0755%-ный раствор дезоксихолата натрия , хлороформ и метанол в объемном соотношении
СОЮЗ С08ЕТСНИХ
СОЦИАЛИСТИ4ЕСНИХ
РЕСПУБЛИН
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
К АВТОРСКОМ .Ф СВИДЕТЕЛЬСТВУ.
ГОСУДАРСТ8ЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР
ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТКРЫТИЙ (21) 3627782/28-13 (22) 26.07.83 (46) 30.04.88. Бюл. У 16 (7 1) Харьковский государственный университет им. А.М. Горького и Харь ковский филиал Киевского научно-исследовательского института кардиологии им. акад. Н.Д.Стражеско (72) В.В.Лемешко и В.М.Бровкович (53) 616. 153. 915 (088. 8) (56) Кейтс M. Техника липидологии. М., "Мир", 1975, с. 66-80.
„,З0„„11 224 А (51)4 G 01 N 33 48 (54) (57) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ФОСФОЛИПИДОВ В БИОЛОГИЧЕСКИХ МЕМБРАНАХ путем обработки препаратов хлороформом и метанолом и окрашивания молибденовым реактивом, отличающийся тем, что, с целью упрощения способа, к анализируемой пробе добавляют 3,07,5Х-ный раствор дезоксихолата нат рия, хлороформ и метанол в объемном соотношении (2-3):(3-4):(1-3), а окрашивание проводят при температуре 0-50 С и соотношении молибденовоо го реактива к смеси 1:(1-1,5).
1189224
Изобретение относится к биохимии, а именно к способам количественного определения фосфолипидов и может найти применение в клинической, экспериментальной и технической биохимии.
Цель изобретения — упрощение способа.
Пример. Определение содержания фосфолипидов в суспензиях микро- 10 сом печени крыс.
Готовят смесь 0,3 мл 37.-ного раствора дезоксихолата, содержащего суспензию микросом (335 мкг белка микросом в пробе), 0,2 мл метанола, 0,2 мл хлороформа. Смесь встряхивают, добавляют 0,6 мл молибденового реактива и перемешивают в течение 20-30 с. Через 3 мин вновь добавляют 1,4 мл хлороформа, вновь перемешивают и 20 центрифугируют 5 мин при 3000 об/мин.
Колориметрируют хлороформную фазу при 760 нм на спектрофотометре. Конечный объем хлороформа 1,6 мл.
Расчет ведут по уравнению
Е = 3,2 х ° 1, где Š— единицы оптической плотности, х — мкмоль липидного фосфора в пробе, 1 — длина оптического пути, см.
При Е = 0,61 и 1 = см
По уравнению находим, что содержание липидного фосфора в пробе (335 мкг белка микросом) составляет .0,19 мкмоль или 0,57 мкмоль на 1 мкг белка микросом.
Корректор Г,Решетник
Техред M.Õoäàíè÷
Редактор Н.Сильнягина
Подписное
Тираж 847
Заказ 3378
ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий
113035, Иосква, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5
Производственно-полиграфическое предприятие, r. Ужгород, ул. Проектная, 4

