4-(3-метилпиразолил-4)-2,6-диметил-3,5-диэтоксикарбонил-1,4- дигидропиридин ,об ладающий гепатопротекторной активностью
4-
COOS СОВЕТСКИХ
СОЦИАЛИСТИЧЕСКИХ
РЕСПУБЛИН, (19) (10
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
К ABTOPCHOMY СВИДЕТЕЛЬСТВУ (54) 4-(3 -МЕТИЛПИРАЗОЛИЛ-4 )-2;6-
ДИМЕ ТИЛ-З, 5-ДИЭТОКСИКАРБОНИЛ-1, 4ДИГИДРОПИРИДИН, ОБЛАДАЮЩИЙ ГЕПАТОПРОТЕКТОРНОЙ АКТИВНОСТЬЮ.. (57) 4-(3 -Метилпиразолил-4;)-2,6I ( диметил-3, 5-диэтоксикарбонкп-1,4дигидропиридин формулы.
Н5С ООС
Н5 н с х
H обладающий гепатопротекторной активностью.
ГОСУДАРСТ8ЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР
ПО ДЕЛАМ ИЗОБРЕТЕНИЙ И ОТНРЫТИЙ (21) 3652451/23-04 (22) 20.10.83 (46) 23.03.86. Бюл. У 11 (71) Ордена Трудового Красного Знамени институт органического синтеза
АН ЛатвССР (72) Б.С.Чекавичус, А.Г.Одынец, А.Э.Саусинь, Г.Д.Тирзит, Д,А.Берзиня, Г.Я.Дубур и А,А.Кименис (53) 547.822.1.03 (088.8) (56) Майоре А.Я., Зариня Л.А., Дубур Г.Я., Берман Э.С. Действие антиоксиданта этидина на пораженную сернокислым гидразином печень крыс.
Изв. АН ЛатвССР, 1972, К 7, с.107112.
Патент ФРГ N 3022030, С 07 D 417/04, опублик.1981.
U.Risner, J.Kuthan, The Chemistry of Dihydropyridines. Chem.Rev.
1972, vol.72, р.1, М.А.Kira, МЛ.Afoul — Enein., М.J.Korkor. The Vilsmeier — Haack
Reaction, П .Reaction of Phosphorus
Oxychloride — Dimethylformamidå
with SemicarÚasonås. Т.Heter.
Chem,1970, vol.7, р.25-26. (594; С 07 D 211/90, 401/02, А 61 К 31/44 р c, °
1125957 2
Изобретение относится к новым химическим соединениям, конкретно
I / к 4-(3 -метилпиразолил-4 )-2,6-диметил-3,5-диэтоксикарбонил-1,4дигидропиридину формулы
Н5С200С
2Н
HzC !
Н обладающему гепатопротекторной активностью, Указанное свойство позволяет предполагать возможность применения его в медицине.
Известен 2,6-диметил-3,5-диэтоксикарбонил-1,4-дигидропиридин
;(этидин), обладающий гепатопротектор ной активностью.
Наиболее близкими по структуре
К предлагаемому соединению являются
4-имидазолил и 4-тиазолил-3,5-диалкоксикарбонил-),4-дигидропиридины, обладают кардиоваскулярной активностью.
Цель изобретения — изыскание в ряду 1,4-дигидропиридинов новых веществ, обладающих высокой гепатопротекторной активностью.
Цель достигается описываемым
4-(3 -метилпиразолил-4 )-2,6-диметил-3,5-диэтоксикарбонил-1,4дигидропиридином приведенной форму" лы 1, обладающим гепатопротекторной активностью. Укаэанное соединение получают по известной методике конденсацией этилового эфира ацетоуксусной кислоты с 3-метил-4-формилпиразолом и аммиаком в подходящем органическом растворителе при . повьппенной температуре.
Исходный 3-метил-4-формилпиразол получают из семикарбазона ацетона.
П Р и м е р. 4-(3 -Метилпиразолил-4 )-2,6-диметил-3,5-диэтоксикарбонил-!,4-дигидропиридин (1).
3 г (0,03 моль) 3-метил-4-формилпиразола, 7,8 r (0Ä06 моль) этилового эфира ацетоуксусной кислоты и 7,5 г (0,225 моль) 25%-ного водного аммиака растворяют в 20 мл этаиола и кипятят 5 ч. Охлаждают, фильтруют, осадок промывают эфиром и кристаллизуют из. 50% этанола. Получают
2,25 г (25%) бесцветных кристаллов о соединения 1 с т.пл. 214-215 С.
Найдено,%: С 60,9, Н 6,9,N 12,9.
Вычислено,%: С 61,2, Н 7,0, N )2,6.
С 17 H23N504
10 УФ вЂ” спектР (в С Н ОН),Я мах нм (1gE): 245 (4,25), 270 (3,98), 357 (3,90), ИК-спектр (в нуйоле), см (% поглощения): 3355 (84), 3260 (72), 15 1698 (91), 1680 (91), 1630 (83).
Спектр ПМР (в (СН ) BO-d4 ), о, м.д.: l, 15 (6 Н, т, OCH СН э), 2,13 (6 Н, с, 2,6.-СН 1), 2,22 (3 Н, с, 3 -СН ), 4,00 (4Н, кв, 20 ОСН СН5), 4,68 (1 Н, с, 4-Н), 7,04 (1 Н, с, 5 -Н), 7,71 (l Н, с, NH пиридина), 12,0 (1 Н, с, NH пиразола).
Гепатопротекторная активность
25 соединения 1 изучена в опытах in
vitro u in vivo на модели поражения печени крыс, вызванного четыреххлористым углеродом. В качестве пре. . паратов сравнения в опытах in vitro использовали глутатион, витамин Е, цистеамин и этндин> в опытах 1п
vivo — витамин Е и этидин, Опыты проводили на белых беспородных крысах — самцах массой 180-220 r.
В опытах in vitro гомогенизирова35 ли печень крыс, полученный гомогенат центрифугировали и супернатант в количестве, содержащем 3,0 мг белка, вносили в инкубационные сосуды. Во
40 все пробы добавляли 0,2 мкМ НАДФН.
В отдельные пробы вносили СС14 (10 мкм ) и одно из исследуемых веществ: .глутатион — 0,4 мкМ, витамин Е, цистеамин, этидин и соединение 1 10 MKM. Пробы инкубировали
45 при 37 С в течение 40 мин при пере
О мешивании. Оценку перекисного окисления липидов (ПОЛ) проводили путем определения малонового диаль50 дегида (МДА) . При добавлении в инкубационную среду CC) наблюдалось резкое усиление процессов ПОЛ вЂ” количество МДА увеличивалось в 3 раза.
Внесение в инкубационную среду, содержащую СС1,, исследуемых соеди55 кении предотвращало усиление ПОЛ (табл.)).
В скобках указано число экспериментов.
Т а б л и ц а 1
Действие исследуемых соединений на прооксидантный эффект четыреххлористого
r углерода в опытах, in virroСхема эксперимента
М + tn, нМ/мг белка мин о
100
Контроль
6,0 0,6 (30)
18,9+1,0 (30)
4,4+0,5 (8)
4,1+0,7 (5) 4,7+0,3 (5)
4,4 0,4 (20) CCI
314
CCl + глутатион
CC1 + витамин Е
ССI + цистеамин
СС1! + этидин
CCl + соединение
81
5,510 р 6 (5) 91 х) Достоверно по отношению к контролю. хх1 Достоверно по отношению к CCI< .
В скобках указано число экспериментов, В опытах in vivo СС1 инъециро вали внутрибрюшинно в дозе 0,5 мл/кг в виде IOX раствора в оливковом масле. Исследуемые соединения вводили перорально в виде водной суспензии с добавлением твина-80 в дозе
200 мг/кг дважды — за 1 и 24 ч до инъекции CCIg . Контрольным животным вводили 4,5 мл/кг оливкового масла и водный раствор твина-80. Животных забивали декапитацией через 24 ч после введения ССI ..
Через 24 ч после введения СС1 в сыворотке крови наблюдается резкое усиление активности аланинами- нотрансфераэы (АлАТ) и аспартатаминотрансфераэы (АсАТ) (табл.2), что указывает на серьезные повреждения печени, связанные с деградацией мембран гепатоцитов. Значительно уменьшается величина коэффициента де Ритиса, отражающего соотношенйя активности АсАТ и АлАТ. В печени наблюдается уменьшение количества белка и цитохрома P-450 (табл.3).
/ °
Применение витамина Е, этидина соединения 1 предотвращает существенное изменение биохимических показателей сыворотки крови. Соедине ".
125957 4 ние 1 достоверно снижает уровень активности АлАТ и АсАТ, улучшает коэффициент де Ритиса, а также досто" ,верно препятствует снижению количества цитохрома P-450 в печени.
Соединение 1 улучшает большинство биохимических показателей сыворотки крови и печени при поражении четыреххлористым углеродом в боль1О шей степени, чем витамин E.и этидин..
Острая токсичность исследована при внутрибрюшинном введении белым мышам-самцам. ЛД, для соединения
1 составляет 1350 (1000-1822) мг/кг. ц Таким образом, выявлено положительное действие соединения I на структурно-функциональные нарушения в печени, вызванные..четыреххлориотым углеродом. По гепатопротектор" ур ному действию соединение l значительно превосходит этидин-соединение того же химического класса.
Низкая токсичность и высокая ге.
В патопротекторная активность 4- (3! \
25 метилпиразолил-4 ) -2,6-диметил"
3,5-диэтоксикарбонил-1,4-дигидропнридина указывают на возможность его практического применения в медицине для лечения и профилактики заболеваний печени.
1125957
Таолица2 Активность сывороточных алайин" и аспартатамннотрансферазм через 24 ч после. введения СС1 и предварительного введения нсследуеьанс соединений ч»
Схема зкспери- Колнчестмнта во иивотнълс
АлАТ АсАТ
Коз!Ьфициент де Ритиса щ, ед. Х М +in, ед
АсАТ/АпАТ
100 1,45310,099
I76 0,851+0,025.
14I 0,908+0,110
167 0,870+0,023
14 I.64 0,Il
4 е67+Ое07
100 1,25g0.07
285 3,96 0,10
СС1е+ витамин Е . 5
3,7010,58 226 3,18+0,18
62 4,3бф0,14 266 3,77+0,08
1 0
Щ + этидии
3,06+0,50 187 . 2,63+0,28
11 7 0,980 0,22! 67
СС14+ соединение 1 5
Таблица 3
Содержание белка и цитохрома Р-450 в печени через 24 ч после введения СС14 и предварительного введения исследуемых соединений
Схема эксперимента Количество животных
Белок M+m, мг/г печени
Цитохром
P-450 M+m, нМ/мг белка
158,4+9,2 100 0,39+0,04 100
Контроль
123,2+6,8 78
143,0+3,3 90
115,7+5,9 73
126,0+4,0 80
СС14+ Внт!Нн Е
СС! + этидин
0,2520 03
СС! + соединение 1 5
Редактор Л.Письман Техред Л.Олейник, Корректор М.Шароши
Заказ 1339/3 Тираж 379 Подписное
ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий!
13035, Москва, Ж-35, Раушская наб.; д.4/5
Филиал ППП "Патент", г.ужгород, ул. Проектная,4
«) Достоверно по отноиению к контролю. ии) Достоверно по отиоиеиив к CCI< . х) Достоверно по отношению к контролю. хх) Достоверно по отношению к CCI
Д,17+0,04 44
0,34+0,02 86
0,17+0,06 44



