Способ обработки лиофилизированных сухожильных аллотрансплантатов

Оп ИСАНИ Е

ИЗОБРЕТЕН ИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (!!)997639

Союз Советских

Социалистических

Реслублик (61) Дополнительное к авт. свид-ву— (22) Заявлено 15.01.81 (21) 3238274/28-13 с присоединением заявки №вЂ” (23) Приоритет— (51) М. gp p3

А 01 N 1/00

Гесударствевкый кемитет

СССР (53) УДК 612.75 (088.8) Опубликовано 23.02.83. Бюллетень № 7

Дата опубликования описания 28.02.83 йо деаам нзобретеяяй и еткрмтий (72) Автор изобретения

А. А. Путилин

Астраханский государственный медицинский инстит им. А. В. Луначарского (71) Заявитель (54) СПОСОБ ОБРАБОТКИ ЛИОФИЛИЗИРОВАННЫХ

СУХОЖИЛЬНЫХ АЛЛОТРАНСПЛАНТАТОВ

l,0

Изобретение относится к медицине и касается консервирования и пересадки тканей, применяемых в хирургии для пласти; ческих целей.

Известен способ обработки лиофилизированных сухожильных аллотрансплантатов, включающий насыщение сухожильных аллотрансплантатов лекарственными веществами 11):

Однако известный способ не позволяет сохранить биологические свойства сухожильных трансйлантатов и предупредить рубцовые сращения.

Целью изобретения является сохранение биологических свойств сухожильных трансплантатов и предупреждение рубцовых сращений.. Цель достигается тем, что согласно способу обработки лиофилизированных сухожильных аллотрансплантатов, включающему насыщение сухожильных аллотрансплантатов лекарственными веществами, их обрабатывают раствором лекарственных препаратов, содержащим, мл:

Ацетилхолин — хлорид 0,1 — 0,2

Никотиновую кислоту (19) 1,0 — 2,0

Гепарин (1000 ед—

2000 ед) 1.0 — 2,0

Цапорин 1,0 — 2,0

Физиологический раствор 100,0 — 150,0 в течение 20 — 24 ч при 18 — 20 С.

Пример 1. Опыты проведены яа 20 кроликах-самцах средним весом 4 — 6 кг. Всех животных подвергают одинаковой в техническом отношении операции. Обнажают ахиллово сухожилие, иссекают его среднюю часть и дефект размером 1,0 см замещают ляофилизированным сухожильным аллотрансплантатом в первой серии (!О животных), обработанным раствором, содержащим, мл:

Ацетилхолия-хлорид О,l

Никотиновую кислоту (1%) 1,0

Гепарин (100000 ед) 1,0

Цапорин (250000 — 500000)

Физиологический раствор 100,0 при 18 С в течение 20 ч.

Вторая серия (10 животных) без оработки.

997639

55

2,0

Между трансплантатом и концами сухожилия накладывают швы бок в бок. Рану послойно ушивают. Конечность фиксируют гипсовой лонгетой на 21 день. В сроки

I0. 20, 60, 130, 270 дней животных выводят из опыта.

Пересаженное сухожилие вырезают, из чего готовят целлуидиновые блоки с окраской препаратов гематоксилин-зозином, по

Вангизону, Шик-реакция.

Проводят сканирующую электронную микроскопию поверхности поперечных срезов регенерата с окружающими тканями на электронном микроскопе Psem — 500.

Наблюдения за животными, которым пересажены сухожилия, подвергнутые обработке по предлагаемому способу, свидетельствуют о том, что у них в меньшей степени развивается отек оперированной конечности и на 3--4 день, как правило, спадает.

В контрольной серии опытов отек держится более длительное время. При гистологическом исследовании установлено, что на ранних сроках 10 — 20 дней после пересадки сухожилий, обработанных предлагаемым способом, интенсивно идут процессы пролиферации. Шик-реакция положительная. B контрольной серии пролифе ативные процессы слабее, вокруг трнсплантата встречаются лейкоцитарные и лимфацитарные инфильтраты. Шик-реакция положительна (++)..

На 50--60 сут. после пересадки сухожильный трансплантат окружеН волокнистой соединительной тканью и образует единый тяж, подвижный по отношению к коже с подножной клетчаткой: В контрольной серии регенерат к этому сроку плотно спаен с окружающими тканями.

В дальнейшем как в опытной„так и в контрольной сериях, идет постепенное замещение трансплантата сухожильной тканью и к 270 дню на кисте сухожилия, подвергнутого обработке по предлагаемому способу, формируется ткань, образованная пучками коллагеновых волокон, между которыми располагают;ся ядра фиброцитов и фибробластов. В контрольной серии (без насыщения) среди вновь образованных волокон встречаются участки неперестроенной гомогенной ткани трансплантата. Процесс перестройки еще не закончили.

Пример 2. Опыты проведены на 20 кроликах-самцах средним весом 4 — 6 кг. Всех животных подвергают одинаковой в техническом отношении операции. Обнажают ахиллово сухожилие, иссекают его среднюю часть и дефект размером 1,0 см замещают лиофилизированным сухожильным аллотрансплантатом в первой серии (10 животных), обработанным раствором, содержащим, мл:

Ацетилхолин-хлорид 0,2

Никотиновая кислота (10/ ) 2,0

Гепарин (2000 ед.) 5 0

f5

Цапорин ,(500000 ед.) 2,0

Физиологический раствор 50,0 при 20 С в течение 24 ч.

Вторая серия (10 животных) без обработки.

Между трансплантатом и концами сухожилия накладывают швы бок в бок. Рану послойно ушивают. Конечность фиксируют гипсовой лонгетой на 21 день. В сроки !О, 20, 60, 130, 270 дней животные выходят из опыта.

Пересаженное сухожилие вырезают, из чего готовят целлуидиновые блоки с окраской препаратов гематоксилин-зозином, по Вангизону. Шик-реакция.

Проводят сканирующую электронную микроскопию поверхности поперечных срезов регенерата с окружающими тканями на электронном микроскопе PSEM — 500.

Наблюдения за животными, которым пересажены сухожилия, подвергнутые обработке по предлагаемому способу, свидетельствуют о том, что у них в меньшей степени развивается отек оперированной конечности и на 3 — 4 день, как .правило, спадает. В контрольной серии опытов отек держится более длительное время.

При гистологическом исследовании уставовлено, что на ранних сроках 10 — 20 дней после пересадки сухожилий, насыщенных предлагаемым раствором, интенсивно идут процессы пролиферации. Шик-реакция положительна (++++). В контрольной серии пролиферативные процессы выражены слабее. Шик-реакции (+ + ) .

В дальнейшем, как в опытной, так и в контролоной сериях, идет постепенное замещение трансплантата сухожильной тканью. К 50 — 60 дню после операции пересаженное сухожилие окружено волокнистой соединительной тканью, богатой клеточными элементами; Между регенератом и окружающими тканями идет формирование скользящего аппарата.

В койтрольной серии между регенератом и окружающими тканями имеются грубые сращения. К 270 дню на месте сухожилия, подвергнутого обработке, формируется ткань, образованная пучками коллагеновых волокон, между которыми располагаются ядра фиброцитов и фибробластов. В контрольной серии (без насыщения) среди вновь образованных волокон встречаются участки неперестроенной гомогенной ткани трансплантата.

Обработка сухожилий, консервированных методом сублимационной сушки предлагаемым способом, позволяет насытить трансплантаты лекарственными веществами путем естественной регидратации.

Обработка лиофилизированных сухожильных аллотрансплантатов, обработанных предлагаемым способом, позволяет зна,997639

l,0 — 2,0

Формула изобретения

Составитель С. Малютина

Техреду И. Верес Корректор Л. Бокшан

Тираж 719 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

l 13035, Москва, Ж вЂ” 35, Раушская наб., д. 4/5

Фиянал ППП «Патент», г. Ужгород, ул. Проектная, 4

Редактор Н. Джуган

Заказ 980/1 чительно улучшить условия течения регенераторного процесса, уменьшить воспалительную реакцию на трансплантат и предупредить рубцовое сращение регенерата с окружающими тканями.

Способ обработки лиофилизирова нных

-сухожильных аллотрансплантатов, включающий насыщение. сухожильных аллотрансплантатов, лекарственными веществами, отличающийся тем, что, с целью сохранения биологических свойств сухожильных трансплантатов и предупреждения рубцовых сращений, их обрабатывают раствором лекарственных препаратов, содержащим (мл): Ацетилхолин - хлорид 0,1 — 0,2

Никотиновую кислоту (1%)

Гепарин (1000 — 2000 ед.) l,0 — 2,0

Цапорин (250000 — 500000) 1,0 — 2,0

Физиологический раствор 100,0 — 150,0 в течение 20 — 24 ч при 18 — 20 С.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Луи Рэ. Консервация жизни холодом.

М., Издательство медицинской литературы, 1962, с. 57, 156.