Способ получения терпенов,обладающих антипсориатическим действием

Оп ИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К ПАТЕНТУ (11) 995700

Сотоз Советсиик

Социалистичесник

Республик (61) Дополнительный к патенту— (22) Заявлено 23. 05. 79 (21) 2771805/28 13 (23) Приоритет — (32). 24. 05. 78 (51) М. Кл.

A 61 K 35/78

Гфсударетвеииьж кеиитет

СССР (31) 470204 (33) Испания

Опубликовано 07. 02. 83. Бюллетень М 5 ио делен иэоеретеиий и еткрытий (В3) УД K 615. 45: 615.

7 (088. 8) Дата опубликования описания 07.02.83

Иностранцы (72) Авторы и) (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ТЕРПЕНОВ, ОБЛАДАКМЦИХ

АНТИПСОРИАТИЧЕСКИИ ДЕЙСТВИЕИ

Изобретение относится к медицине, а именно способам получения лекарственных препаратов.

Известен способ получения терпенов, обладающих противовоспалительным дей- 5 ствием 1 ).

Предложен способ получения терпенов, обладающих антипсориатическим действием, который характеризуется тем, что высушенные при 50-70 С кор- то невища и листья Огуорйег1s crass 1rhi

zoma, Polypodium vulgara Zinn, Polypodium lecotomos, PhIebodium decumanun J. Smith, Polypodium aureum Zinn, Polypodium triseria11 и корневища Po- s

lypodium aureum 2inn и Ро1ypodium

triseriale экстрагируют метанолом, упаривают растворитель, полученный остаток обрабатывают смесью и-гексана с водой в соотношении 10:4, отста- ивают и к раствору добавляют раствор

1 0-203-ной гидроокиси калия в этаноле, упаривают, фильтруют, осадок промывают этанолом, растворяют в н -гексане, хроматографируют и перекристаллизовывают в горячем абсолютном спир" те.

Способ осуществляют следующим образом.

Корневища и листья режут на полос" ки в 2-3 см, листья сушат .:такими, как они собраны. Сушку производят непрерывно при подаче материала на вра". щающуюся металлическую проволочную сетку, имеющую 5 м шириной и 25 м длиной, которая движется внутри горячей камеры, при 50-70 С. Рри регулировании скорости вращающейся металлической проволочной сетки за 1 ч высу" шивают полтонны влажного материала.

Сухой материал (остаточное содержание влаги ниже 53) гранулируют в дисковой мельнице, отрегулированной так, чтобы давать частицы 1е до 2 мм с плотностью 0,36. Экстракцию проводят с использованием любого растворителя (диэлектрическая постоянная 1,890 9,08), предпочтительно метанола, при соотношении 1:4 по объему. Полутвердый остаток экстракта берут в смесь ривают досуха при умеренном вакууме (20-30 мм рт. ст.). Остаток берут в смесь н -гексана и воды (15: 10 л) и оставляют стоять в течение ночи в сепараторе. Водную фазу удаляют и гексановую фазу осветляют 10 -ным раствором гидроокиси калия в 90 -ном этаноле (5 ). Осветленную таким образом гексановую фазу нейтрализуют с помощью промывки водой и упаривают досуI xa. Остаток растворяют в 500 мл 963-ного этанола при нагревании, фильтруют и сушат (выход 50 г) . Сухой, осадок растворяют в 1 л н-гексана и хроматографируют на колонке из Гедурана. S}60 (100х10 см ) при элюировании порциями в 1 л Н - гексана. Первая 1-литровая фракция упаривается, и остаток кристаллизуется.в горячем гексане, бензоле или абсолютном этаноле (выход

12 г) .

Пример 2. 36 кг сухого целого растения, гранулированного на дисковой мельнице до размера, проходящего через сито Ф 10 (2,5 мм), непрерывно экстрагируют н -гексаном при комнатной температуре, гексановый раствор упаривают до 10 л и осветляют в сепараторе 1 л 103-ной гидроокиси калия в 90/-ном этаноле в течение ночи.

Гексановую фазу нейтрализуют промывкой водой и упаривают досуха. Остаток берут в горячий бензол в достаточном количестве для получения насыщенного раствора (1 л).

Осадок отфильтровывают, охлаждают и кристаллизуют в горячем бензоле или горячем абсолютном этаноле. Кристаллический материал растворяют в н-гексане (500 мл) и хроматографируют на колонке из Гедурана Sl-60 размером 5х50 см (фирмы Мери-Дармитадт) при элюировании порциями по поллитра.

Две первые поллитровые фракции элюата выпаривают и кристаллизуют в горячем гексане, горячем бензоле или горячем абсолютном этаноле (выход 38 r).

Пример 3. 12 кг сухого корневища, гранулированного на дисковой мельнице до размера, проходящего через сито У 10 (2 5 мм), непрерывно экстрагируют дихлорметаном при комнатной температуре. Дихлорметан упаривают досуха, и остаток берут в 5 л

H-гексана. Гексановый раствор осветляют 1 л 10/;ной гидроокиси калия в

90 -ном этаноле в течение ночи, и гексановую фазу затем нейтрализуют промыванием водой и упаривают. Оста3 995700

Н-гексана с водой (10: 4) > и после отстаивания к Н -гексановому раствору добавляют одну десятую от его объема

10-203 гидроокиси калия, и после периодического помешивания его оставляют стоять 6 ч. н -Гексановая фаза нейтрализуется промывкой водой. После выпаривания остаток берут в трехкратный объем 96/-ного этанола и оставляют стоять до тех пор, пока не прои- 10 зойдет полное осаждение, обычно 48 ч при комнатной температуре. Осадок фильтруют через стеклянные фильтры, имеющие среднюю пористость, при всасывании, промывают его подходящими количествами 964-ного этанола до тех пор, пока он не станет почти бесцветным, и сушат под вакуумом над гидроокисью калия или концентрированной серной кислотой. Осадок растворяют в н -гексане для получения 103 по весу раствора при комнатной температуре (20ОC) Раствор хроматографируют в зависимости от количества материала с элюированием н-гексаном, элюируют в первой 1-литровой фракции (по отношению к 2 л). После выпаривания до концентрации 10i H- råêñàíoâîìó раствору дают воэможность кристаллизоваться самопроизвольно при комнатной температуре. Кристаллы фильтруют с отсасыванием, и маточные жидкости снова упаривают, получая еще одну кристаллическую массу.

Другой метод заключается в использовании нейтральной колонки на окиси алюминия АЯ О (5х100 см ) и элюировании н -гексаном. В данном случае элюат экстрагирует фермент, т.е. активный ингредиент. Перекристаллиэация происходит в горячем абсолютном эта о ноле. Фармацевтические композиции приготавливают в виде обычных дозированных форм введением фермента в фармацевтические носители. Активный ингредиент (фермент) должен присутст"

45 вовать в композициях в количестве, достаточном для обеспечения противопсориазной активности. Композиции предпочтительно содержат 1- 100 мг активного ингредиента на одну доэирован ную единицу, а фармацевтический носитель может быть твердым или жидким.

Пример 1. l2 кг сухих листьев, гранулированных на сите Р 10 (2,5 мм), экстрагируют 1,5 ч 10 л 96>-ного эта- 55 нола при 70ОС. Экстракт фильтруют и промывают 10 л 964-ного этанола на фильтре. Отфильтрованный экстракт упа$ 9957 ток берут в 1 л н-гексана и хроматографируют на колонке иэ силикагеля-60 (100х10 см) с использованием и -гексана. Две первые фракции элюата упаривают, и остаток кристаллизуат в горя- чем И -гексане, горячем бензоле или горячем этаноле (выход 25 г).

Il р и м е р 4. Прй нагревании с обратным холодильником 1 ч 12 кг гранулированного и высушенного целого . 10 растения (гранулометрия 2,5 мм или сито и 10) и экстрагируют 100 л метанола при 70 С. Экстракт фильтруют и промывают на фильтре 20 л метанола.

Иетаноловый экстракт упаривают, и ос" М таток берут в смесь й-гексана и воды (3:2, т. е. 30-20 л) и оставляют стоять в течение ночи в сепараторе. Водную фазу удаляют, а гексановую фазу осветляют 10.л 203-ной гидроокиси ка- 20 лия в 903-ном этаноле, ее нейтрализуют промывкой водой и упаривают досуха. Остаток растворяют в I л горячего 903"ного этанола и. оставляют стоять при комнатной температуре 48 ч. 2s

Осадок отфильтровывают и сушат под вакуумом над гидроокисью калия. Су" хой осадок растворяют в 1 л н -гексана и хроматографируют на колонке из нейтральной окиси алюминия размерсн

50х5 см при элюировании н-гексаном.

Первые 5 л упаривают, и материал кристаллизуют в H-гексане, циклогексане, горячем бензоле и горячем абсолютном этаноле (выход 12-13 г),, 35

Пример 5. Используют, мл:

Фернен 40 Лактоза 60

Ингредиенты смешивают, просветляют и вводят в твердые желатиновые капсулы. Капсулу, приготовленную описанным образом, вводят пациенту три раза в день.

Пример 6. Используют, мг:

Фернен 60

Сахароза, 25

Крахмал 20

Тальк 5

Стеариновая кислота 5

Фернен и сахарозу смешивают и гранулируют с раствором 103 желатина.

Гранулы просеивают, сушат и затем смешивают с крахмалом, тальком и сте-ариновой кислотой. Затем все просеивают и превращают в таблетки.

Пример 7. Используют, мг:

Фернен 50

Арахисовое масло 100

00 С;

Ингредиенты смешивают и вводят в мягкие желатиновые капсулы.

Лекарственные препараты получили название Днапсос и плацебо.

Пример 8. Больной 37 лет страдал псориазом, который развивался

8 лет, болезнь была генерализована по всему телу. Больной принимал Анапсос.7 мес (400-600 мг в день), после принятия лекарства 2 мес у больного практически не осталось мест, пораженных псориазом и в настоящее время он полностью излечился от псориаза, fl р и м е р 9. Бальная 38 лет с общим псориазом, развивавшимся 4 r, начала принимать Анапсос 27 июня 1979 г, и через 1 мес состояние участков ее кожи, пораженных псориазом, значитель" но улучшилось. В следующее посещение клиники у нее была обнаружена ярко выраженная эритема кожи, причем из участков кожи, пораженных псориазом, и прилегающих нормальных участков были выделены Staphylococcus aurea. больная продолжала прйнимать Анапсоссовместно с антибиотиком - триметоприм-сульфаметоксазол (12-13) 1 нед.

После такого лечения последовало быстрое улучшение состояния пораженных мест. Больная продолжала принимать только Анапсос .и до настоящего времени у нее не наблюдается возобновления заболевания псориазом.

Il р и и е р 10. Больная 25 лет страдала от псориаза, развивавшегося 18 лет.

Она принимала Анапсос в 1968 г, и по" ражения псориазом исчезли. Через 6 лет заболевание возобновилось, больная принимала Анапсос, и опять наступила ремиссия. Ей прописали плацебо, которое она принимала 5 мес. Болезнь про-. грессировала, и больная стала принимать Анапсос 1 мес. Однако больная далее не возвращалась в клинику и не получала никакого лечения 3 мес, в результате ее состояние ухудшилось.

В это время из участков ее кожи, по. раженных псориазом, и иэ прилегающих участков нормальной кожи были выделены 5йарЬу1ососсоз aurei. Больная принимала антибиотик 5 дней, не переставая принимать Анапсос. По прошествии

1 мес ее состояние начало улучшаться, и после двух месяцев принятия Анапсо-. са на ее теле не осталось участков кожи, пораженных псориазом.

Пример 11. Больной в возрасте

12 лет, страдавший псориазом 8 мес, начал применять Анапсос и по прошест995700 8 цевтические препараты высокоэффективны нетоксичны и безвредны.

Формула изобретения

Составитель Ю. Алмазов

Редактор Н. Швыдкая Техред Ж. Кастелевич Корректор А. Гриценко

Заказ 674/50

Тираж 711 Подписное

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП "Патент", r. Ужгород, ул. Проектная, 4 ьии 1 мес наблюдалась значительная ремиссия участков его кожи, пораженных псориазом. После второго месяца лечения наступила почти полная ремиссия. Через два месяца из мест его ко- и жи, пораженных псориазом, и глотки были выделены Staphylococcus aurea. больной принимал антибиотик 5 дн вместе с Анапсосом, и по прошествии 1 мес поражения почти полностью исчезли, и в настоящее время возобновления болезни не наблюдается.

Пример 12. Больная в возрасте

59 лет страдала псориазом, развивавшимся в течение двух лет,, начала при- 1 нимать Анапсос и в этот же день у нее были отобраны бактериальные культуры, и был выделен Staphylococcus aurea.

После этого она принимала антибиотик

5 дн, не. прекращая принимать Анапсос ° 20

Спустя 3 мес наблюдалось явное улучшение, и по прошествии 4 мес больная в основном поправилась.

Предложенный способ обеспечивает получение терпенов, обладающих анти- 2$ псориатическим действием. Полученные препараты применены на 152 пациентах, Страдающих псориазом, при ежедневной дозе.200 мг, что вызвало исчезновение заболевания в более, чем 803 случаях зв в течение 1-3 мес. Полученные фарма" ю

Способ получения терпенов, обладающих антипсориатическим действием, ха ра к те ризующийся (тем, что высушенные при 50-70оС корневища и листья Dryopterfs crassirhizoma, Polypodium vulgara 1inn, Polуpodium lecotomos, Phlebodium decumanun J. Smith, Polypodium aureum Z1nn, Polypodium triseriall и корневища

Polypodium aureum Zinn u Polypodium

triseriaIe экстрагируют метанолом, упаривают растворитель, полученный остаток обрабатывают смесью Н-гексана с водой в соотношении 10:4, отстаивают и к раствору добавляют раствор !

О-203-ной гидроокиси калия в этаноле, упаривают, фильтруют, осадок промывают этанолом, растворяют в Н -гексане, хроматографируют и перекристадлизовывают в горячем абсолютном спир" те.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Гаммерман А.Ф. Курс фармакогнозии. Л, Медгиз, 1960, с. 125- 137 °