Способ приготовления препаратов зародышевых мешков

ОП ИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (i i) 919636

Союз Советски и

Социалистических

Республик (6! ) Дополнительное к авт. свнд-ву— (22) Заявлено 25.06.80 (21) 2952118/30-15 с присоединением заявки № (23) П риорнтет— (5l)M. Кл.

А 01 G 7/00

3ЬеуаврстоаииыН комитет

СССР

l0 делам изооретеиий н открытий

Опубликовано .15.04.82. Бюллетень ¹ 14 . Дата опубликования описания 15.04.82 (53) УДК 581.331 (08&.8) (72) Автор изобретения

П. Г..Куприянов!

Саратовский государственный университет имЫ) „Чернышевского,; .с

« (71) Заявитель (54) СПОСОБ ПРИГОТОВЛЕНИЯ ПРЕПАРАТОВ ЗАРОДЫШЕВЬИ

МЕШКОВ

Изобретение относится к цитологии, нреиму. щественно цитоэмбриологии растений, и может быть использовано для оценки состояния кенской генеративной сферы в работах по селекции- и генетике растений.

Известен способ приготовления препаратов зародышевых мешков из семяпочек, подвергнутых длительной мацерации (11.

Известен также способ ускоренного приготовления препаратов зародышевых мешков, в котором извлечение; зародышевых мешков производится из сохраняющих семяпочек, подвергнутых кратковременной мацерации различными веществами, извлечение проводится йа стереоскопических микроскопах микроигйа1 . ми (2).

Недостатком известного способа является то, что довольно много времени тратится на очистку зародышевых мешков от окружающих ткаиейсемяпочки.Это обусловлено тем, что длительность обработки завязки и семяпочек ограничена необходимостью сохранения целостности последних, поскольку иначе их перемешение становится затруднительным. 1 .2

Цель изобретения — ускорение процедуры приготовления зародышевых мешков при сохранении возможности дробного исследования материала (исследования малых выборок зародышевых мешков любого объекта).

Поставленная цель достигается тем, что семяпочки в мацерирующем растворе помещают в углубления ня пластинах, которые имеют три отвесные стороны и наклонный желоб с четвертой стороной, причем дно углубления

10 и дно желоба закругленные и выдерживают семяпочки до полной мацерации межклетных пластинок семяпочек.

В предлагаемом способе обработке семяпочек время мацерации резко увеличивается до

15 пределов, при которых межклетные пластинкиполностью разрушаются и семяпочки теряют целостность. Сохранение возможности дробного исследования материала достигается благодаря тому, что соответствующие выборки семя20 почек (из одной завязи, одного цветка, одного колоса н т.п.) помещаются для мацерации в пронумерованные углубления на пластинках (оргстекла, форфора и т.п.), объем

3 91963 которых примерно в два раза больше объема ° семяпочек. Эти углубления имеют закруглен,ное дно. С трех сторон стенки углубления отвесные,, а с четвертой — в виде наклонного (45 ) желоба (с закругленным дном).

Такая форма углубления необходима, чтобы силы поверхностного натяжени» и адгезии не препятствовали полному отбору содержимого, который осуществляется пипеткой с капиллярным концом через наклонную ego сторону. тр

Диаметры капилляров пипетки и объемы углублений зависят от спецификации объектов.

Пластинки с.углублениями во время мацерации помещают во влажную камеру, например чашку Петри, на дно которой наливают воду, а на крышку наклеивают влажную фильт-. ровальную бумагу. По достижении предельно сильной мацерации тканей семяпочек мацири рующий недостаточный раствор отсасывают, а осадок поднимают со дна порцией воды при помощи пипетки и переносят на предметное стекло на край лунки, которая также заполнена водой. Далее нри необходимом увеличении стереоскопического микроскопа проводят отделение зародышевых мешков от остатков тканей семяпочек и сбор их в чистой зоне лунки предметного стекла. Перенос готовых мешков производят пипеткой с более тонким капилляром, а дальнейшие процедуры с ними .зависят от характера обработки, предшествовавшей мацерации, а также от того, какой метод избран для их последующего исследования, Пример. Оценку эффективности и скорости приготовления препаратов зародышевых мешков кукурузы, люцерны посевной и борца круглолистного проводят двумя способами.

В качестве фермента всюду используют цитазу.

Полученные данные сведены в таблицу.

919636

Зо о о о с о

D rn ь

Ю

D О о ь

I о

l ь о

О 0

Х сп х I о (4 (rr ln о

+ + + + + + + +

+ +

В

О и

Й о

1! „!

1, ° а

I !

1 х

Ю

2 сО

О

Ф

)х

4 х

Ф х

CO о о

Й о

М а х I о фа

О

О D х и х о о х х

L0 щ, х

>х ,Д CO х

Й ез (1 а ъ

М

5 и Й

8 8

Т о- дЯ д

Составитель М. Мирзаев

ТехредЛ.Пекарь

Редактор А. Гулько

Корректор М. Демчик

Тираж 699.

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Подписное

Заказ 2198/2

Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4

7 919636 8 Как видно из таблицы, предлагаемый спо- . в углубления на пластинах, которые имеют соб, обладая высокой аналитической способ- три отвесные стороны и наклонный желоб постыл, значительно превосходит известный с четвертой, стороной, причем дно углублено скорости приготовления препаратов, ка- лия и дно желоба закругленные и выдержичеству извлекаемых зар4 ышевых мешков и у вают до,максимальной мацерации межклетных универсальности применения. пластинок семяпочек.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе ф о р м у л а и э о.б р е т е н и я 1. Хохлов С. С. и др. Выявлениеапомиктичц> ных форм растений, во флоре СССР. Саратов, - Способ приготовления препаратов зародыше- 1978, с. 159.. вмх мешков, включающий мацерацию и диссек- 2. Esaneesa Н. Х. Возможности и перспекцию семяпочек, отличающийся тем, тины ферментативной мацерации в эмбриолочто, с целью ускорения процесса прн сохране- гнческих исследованиях покрытосемянных распни возможности дробного исследования, семя- 1э теннй- Автореф. канд. дис. Кишинев, 1979 (пропочки в мацерирующем растворе помещают . тотип)