Штамм viвriо el тоr 1310 серотипа огава-продуцент холерного экзотоксина

ОЛИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕН И Я

1 !..p,- 1г д

" 79293l

Сеюе Соеетокии

Социалистических

Республик

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (61) Дополнительное к авт. спид-ву— (22) Заявлено 06.06.79 (21) 2787640г28-13 с присоединением заявки _#_2— (23) Пр,иоритет— (51) М К, з

С 12 D 7/00

Государственный комитет (53) УДК 576.8.093.1 (088.8) по делам изобретений н открытий

Опубликовано 23.02.82. Бюллетень М 7

Дата опубликования описания 23.02,82 (72) Авторы изобретения

Р. М. Саямов, В. П. Авроров и T. А. Ханумьян (71) Зая в итель

Ростовский-на-Дону государственный научно-исследовательский противочумный институт (54) ШТАММ VIBRIO EL TOR 1310 СЕРОТИПА

О ГАВА — П РОДУЦЕ НТ ХОД ЕР НО ГО Э КЗОТОКС И НА

Огава — продуцент холерного экзотоксина.

Изобретение относится к области медицины, а именно к микробиологии.

Штамм Vibrio El Тог 1310 серотипа Огава новый и в патентной и научно-технической литературе не описан.

Целью изобретения является получение нового штамма Ч1Ьг1о Е1 Tor 1310 серотипа

Огава — продуцента холерного экзотокси- )p на, Штамм Vibrio El Tor хранится в коллекции культур микроорганизмов Всесоюзного научно-исследовательского противочумного института «Микроб» под номером 1310.

Штамм Vibrio El Tor выделен в Ираке в 1966 году от больного алгидной формой холеры и характеризуется следующими культурально-морфологическими, физиолого-биохимическими, серологическпми и ан- zp тигенными свойствами, Культурально-лгорфологичеекие признаки.

Величина клеток односуточной агаровой культуры 1,5 — 2,0 X 0,3 — 0,5 мкм с одним 25 полярно расположенным жгутиком. Спор и капсул не образует, по Граму не окрашивается.

Агар Мартена с добавлением 50iо дрожжевого экстракта. Через 16 — 24 ч роста об- ЗО

2 разует округлые колонии диаметром 1,5—

2,0 мм.

Агар Мартена. Полупрозрачные округлые колонии с голуооватым оттенком диаметром 1,5 — 2,0 мм.

Бульон Мартена с добавлением 50 о дрожжевого экстракта. Равномерное помутнение, образование пленки на поверхности бульона к 18 — 24 ч роста.

Бульон Мартена. Равномерное помутнение, образование нежной пленки на поверхности бульона к 18 — 24 ч роста.

Казеиновый бульон. Равномерное помутнение с образованием пленки на поверхности бульона.

Фггзиолого-биохгияические признаки.

Глюкозу, маннозу, сахарозу, маннит, мальтозу, крахмал расщепляет до кислоты без выделения газа. Арабпнозу, лактозу не фсрментпрует. Лизин и орнптпн декарбоксплирует. Аргинин не дигидролнзирует. Обладает оксидазной, лецитиназнои, протсолптической активностью. Образует ацетилметилкарбинол, индол. Редуцпрует нитраты в нитриты.

Серологические признаки.

Не лизирует эритроциты барана. Агглютинирует куриные эритроциты. Лизируется диагностическим холерным фагом Эль Тор и холерным диагностическим фагом 3. РасФормула изобретения

Составитель Е. Ярных

Редактор О. Филиппова Техред А. Камышникова Корректоры: Л. Слепая и Т. Трушкина

Изд, № 114 Тираж 705

ВНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4!5

Заказ 1286

Подписное

Загорская типография Упрполиграфиздата Мособлнсполкома

3 тет на щелочном агаре с 50 ЕД полимиксина, Антивоенные свойства.

Агглютинируется холерными диагностическими сыворотками «О» и Огава, Пример. Высушенную ампулированную культуру засевают на щелочной агар, состоящий из 50% агара Мартена и 50% дрожжевого экстракта, и инкубируют в течение 48 ч при температуре 32 С. Затем культуру смывают раствором трис-буфера, смытый агар измельчают и заливают 200 мл раствора трис-буфера. Зкстракци1о производят при температуре 18 — 20 С, Через 18 ч экстрагированный агар профильтровыиают через капроновую ткань и добавляют мертиолат в разведении 1: 5000.

Полученный экзотоксин испытывают на биологических моделях.

1. Фактор кожной проницаемости на взрослых кроликах (по Крейгу) на 3 животных. Препарат раститровывают двухкратно с 1/10 и вводят внутрикожно в количестве 0,1 мл. Учет проводят через 24 ч. Положительная реакция зарегистрирована в разведении 1/640 — 1/1280.

2. Фактор кожной проницаемости на

3 морских свинках весом 300 †3 л. Положительная реакция получена в разведении

1/80.

3. Определение отечногенного эффекта в лапках белых мышей (по Филькенштейну).

Берут белых мышей весом 18 — 20 г по

5 — 6 животных на дозу, В подушечку зад4 ней лапки вводят препарат в ооъеме 0,5 мл.

Контролем служит противоположная интактная лапка. Кроме того, 5 — 6 животным вводят экстракт среды выращивания. Учет результатов производят через 48 ч. Вводят цельный препарат и в разведении 1/2, 1/4, 1/8, При введении цельного препарата различия в весе опытной и контрольной лапок составляет 150 †3 мг. Различия в весе

1О лапок при введении среды составляют

3 — 10 мг, 4. Определение холерогенного эффекта на кроликах-сосунках (по Датта и Хаббу).

Новорожденным крольчатам весом 100—

140 г внутрикишечно вводят цельный препарат в объеме 1 мл. Для контроля крольчатам вводят в том же объеме среду выращивания. Учет результатов проводят через

24 ч. Положительная холерогеннгя реакция

2п наблюдается у 70 — 90 4 подопытных животных при отрицательных реакциях у контрольных животных.

Использование изобретения позволит улучшить профилактику и лечение холеры.

Штамм Vibrio Е1 Tor 1310 серотипа Ога30 ва — продуцент холерного экзотоксина.

Хранится в коллекции культур микроорганизмов Всесоюзного научно-исследовательского противочумного института «Микроб» под номером 1310.