Способ дифференциальной диагностики инфаркта миокарда

ОП ИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕН Ия

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Союз Советскин

Социалистических

Республик (11) 531078 (61) Дополнительное к авт. свид-ву— (22) Заявлено20.05,74 (21) 2025931/13 с присоединением заявки № (23) Приоритет (43) Опубликовано 05.10.765юллетень № 37 : (5!) М. Кл

5 01 > 33/16// //А 61 В 10/00

Государственный комитет

Соаата Нинистроа СССР ао делам изобретений н открытий (53) УД К,6 1 6, .1 2 7-005. .8(088,8) (46) Дата опубликования описания„02.03.77 (72) Авторы изобретения

Ф. Б. Левин и И. М. Якубсои (71) Заявитель (54) СПОСОБ ДИФФЕРЕНЦИАЛ ЬНОЙ ДИАГНОСТИКИ

ИНФАРКТА МИОКАРДА

Изобретение отйосится к MegHIIHHe, а менно к биокимическим способам диагнос- ики, Известен способ определения активности

:АТФ: креатинфосфотрансферазы, заключаю- . о щийся в том, что сыворотку крови инкубируют с субстратной смесью, осаждают белки, добавляют раствор сульфата цинка, центрифу гируют, отбирают аликвоты надосадочнойжидкости, добавляют щелочной раствор и нингид-{О риновый реактив, а .жгем измеряют флуорес ценцию.

Известный способ трудоемкий и длительный.

Целью изобретения является сокращение времени анализа.

Эта цель достигается тем, что непосре г ственно после инкубации крови или йлазмы с субстратной смесью в эту же пробирку добавляют .нингидриновый реактив и О,9% .2О ! ный щелочной;" раствор хлористoro натрия ,и по истечении J. мин измеряют флуоресцен.4» ". шпо !смеси.

Способ состоит в следующем, Кровь берут из вены или из пальца и 25

2 добавляют гепарин. Плазму получают, центрифугируя кровь 2 мин при 2000 o6/мии.

Смешивают 4 ч. раствора креатинфэсфата и 1 ч. раствора цистеина, В пробирку помещают 1,08 мл этой смеси 0,12 мл цельной крови или плазмы, перемешивают и ставят о в водяной термостат при 34 C на 1 мин.

Затем по 0,3 мл этой смеси переносят в три одинаковые пробирки — кюветы. В про:бирку "Проба" вносят 0,2 мл раствора ЛТФ, в rrpodèðêó "Контроль —. 0,2 мл воды, в третью пробирку Стандарт — приливают

0,2 мл стандартного раствора креатин. Каждую пробирку встраивают и по:,.ещают в т рмостат иа 6 мин (для плазмы) или на 9 мин при анализе крови. Затем извлекают, приливают по 1,5 мл раствора нингидрик;;, через

30 сек добавляют по 2 мл раствора гидраt

ra окиси калия с хлористым натрием, Смесь тщательно перемешивают и через 1 чин пл.ле этогэ измеряют величину флуоресценции на,флуорометре, используя для возбуждающего потока светофильтр с диапазо э.:! 320-

-390ммк, а вторичные светофильтры с диа пазоном 450 — 580 ммк. Км да ледст531078 — 99 3 (83-50) ° бмин 0 03мл (Ф„- Ф„) ммкм ст

А

<Ф -Ф„) T ооз

Составитель С. Малютина

Редактор 3. Бородкина .Техред H. АндрейчуЫ;Корректор! С. Шекмар

Заказ 5530/258 Тираж 1 02 9 Подписное

IIHHHHH Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП Патент, r. Ужгород, уц. Проектная, 4 вие вh1cокой активности фермента, величина флуоресценции не умещается в шкалу пр бора, кровь или плазму разбавляют, Расче1 активности производят по формуле где ф - отсчет флуорометра для пробы, и

Ф - отсчет контроля, к ф - отсчет стандарта; мМкм ° ст- количество миллимикромолей креа1

"тина, содержащегэва в-стандартндй ! пр обе, )5

Т - время инкубации,:мин.

0,03 - количество плазмы или крови в. пробе.

AKTHBHDcTb выражают в миллимикромол креатина, образующегося ферментом„ содер > жащимся в 1 мл крб и (или йлазмы) за

1 мин. Пример расчета активности в плаз- ме: отсчет пробы 75, отсчет контроля 50 отсчет стандарта, содержащего 25 ммкм креатина, 85.

Формула изобретения

Способ дифференциальной диагностики инфаркта миокарда путем флуориметрическоFo определения активности АТФ: креатин-, фосфотрансферазы в цельной крови или плаз ме, отличающийся тем, что, с елью сокращения времени анализа, непосредственно после инкубации крови или пп мы с субстратной смесью в say же проб ку добавляют нингидриновый реактив и О,9

)целочной раствор хлористого натрия и по стечении 1 мин измеряют флуоресценцию меси.