Среда для выращивания патогенных микроорганизмов

ОПИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ!!ц 492544

Со!аа Советских

Социалистических

Республик (61) Дополнительное к авт. свид-ву (22) Заявлено 27.03.74 (21) 2009414/28-13 с присоединением заявки № (23) Приоритет (43) Опубликовано 25.11.75. Бюллетень № 43 (45) Дата опубликования описания 25.03.78 (51) М, Кл а С 12К 1/06

Государственный комитет

Совета Министров СССР ло делам изобретений (53) УДК 576.8.093.31/33 (088.8) и открытий (72) Авторы изобретения

В. Н. Милютин и Н. Ф. Касаткин

Ростовский-на-Дону Государственный научно-исследовательский противочумный институт (71) Заявитель (54) СРЕДА ДЛЯ ВЫРАЩИВАНИЯ ПАТОГЕННЫХ

МИКРООРГАНИЗМОВ

Изобретение относится к области микробиологии.

Известна питательная среда для выращивания патогенных микроорганизмов, содержащая гидролизат углеводородных дрожжей, двузамещенный фосфорнокислый натрий

0,1%, хлористый натрий 0,5%, 5%-иый раствор алюмокалиевых квасцов (10 — 15 мл) и водопроводную воду до 1 л.

Однако известная среда не обеспечивает стабильный состав и трудна для использования в качестве диагностической среды для выделения культуры в чистом виде без последующего пересева на плотную среду.

С целью упрощения культивирования микроорганизмов предлагаемая среда дополнительно содержит агар — агар, натрий сернокислый, натрий углекислый безводный. Все компоненты, входящие в среду, взяты в сухом виде и в следующем соотношении (в r иа л): дрожжи углеводородные 20,0 — 25,0, агар — агар 10,0 — 12,0, натрий хлористый 3,0—

5,0, натрий фосфорнокислый двузамещениый

1,5 — 2,0, натрий сернокислый 0,4 — 0,6 и натрий углекислый безводный 0,2 — 0,6. Готовая среда имеет рН 7,1 — 7,2.

Для приготовления этой среды взятые химически чистые минеральные соли вносят в шаровую мельницу и каждую соль в отдельности измельчают, размалывая в течение 30—

40 мин. Степень измельчения солей должна соответствовать 40 меш.

Сухие кормовые дрожжи, выращенные на очищенных парафина.;, просеивают через си5 та 14 — 18 меш. Порошкообразньш агар — агар берут высшего сорта с плотностью 400—

500 г/см -. Затем отвешива ют ингредиенты (дро:кжи, агар — агар, сол!!) В соответствии с прописью среды и помещают их в барабан

10 шаровой мельницы для механического персмешивания питательной смеси. Компоненты среды смешивают в тс !свис 10- 15 мин, после чего среда готова к упаковке и употреблению.

15 Питательную среду из порошка готовят следующим способом. Навеску 35,1 — 44,8г полученной сухой среды вносят в 1 л дистиллированной воды при 30 — 40 С, перемешивают и варят среду известным способом, после

20 чего агар осветляют путем отстоя (не менее

3 — 4 час прп 50 — 60 С), дскатаиции и фильтрации через ватно-ма рлевьш фильтр. Затем среду раза!ивают в посуду I! стерилизуюг

20 мин при 110 — 115 С.

25 Для приготовления жидкой питательной среды на основе сухих углеводородных дрожжей гначале готовят питательную среду в IIIIде водного экстракта (например 1 — 5%-кого).

Для этого в дистиллированную воду с темпе30 ратурой не вышс 30 — 40 С в!!осят сухие корСоставитель С. Малютина

Техред Е. Митрофанова

Корректоры: Л. Денискина и Л. Орлова

Редактор Андреева

Заказ 912/7 Изд. К 313 Тираж 529 Подписное

НПО Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобоетений и открытий

113035, Москва, )К-35, Раушская наб., д. 475

Типография, пр. Сапунова, 2 мовые дрожжи, перемешивают, кипятят при рН 5 — 5,5 10 мин и отстаивают 10 — 15 мин, Затем экстракт декантируют на бумажный или полотняный фильтр, полученный фильтрат подщелачивают 200 -ным раствором сдкого натрия до рН 8,5 — 9,0, разливают в бутыли и кипятят в автоклаве при 115 С 20 мин. Стерильная питательная основа может храниться длительное время, в ней образуется небольшой осадок.

Для приготовления бульона основу вновь фильтруют, добавляют 0,3 — 0,5% хлористого натрия, доводят кислотность среды до необходимой, разливают в посуду и стерилизуют при 110 — 112 С 20 мин.

При необходимости готовые среды высушивают лиофильно известным способом.

Использование в составе среды сухих стандартных ингредиентов и дистиллированной воды дает возможность получать стабильную по своему составу среду с заранее заданной величиной рН, Среда обладает высокими ростовыми качествами и при соот492544 Ф

4 ветствующем рН (7,1 — 7,2 или 7,7 — 8,0) вполне удовлетворяет питательные потребности высокотребовательных патогенных микроор" ганизмов (как, например, возбудителей чу

5 мы, холеры, сапа, мелиондоза, дизентерии, брюшного тифа и других).

Формула изобретения

Среда для выращивания патогенных микроорганизмов на основе углеводородных дрожжей, содержащая хлористый и двузамещенный фосфорнокнслый натрий, о т л ич а ю щ а я с я тем, что, с целью упрощения культивирования микроорганизмов, она также содержит натрий сернистокислый, натрий углекислый безводный и агар — агар при необходимости, все компоненты взяты в сухом виде и в следующем соотношении г/л: дрожжи углеводородные 20,0 — 25,0, агар — агар

10,0 — 12,0, натрий хлористый 3,0 — 5,0, натрий фосфорнокислый двузамещенный 1,5—

2,0, натрий сернокислый 0,4 — 0,6 и натрий углекислый безводный 0,2 — 0,6.