Способ получения иммуногенного лапинизированного штамма вируса ящура

О П И С A"-Н Й

ИЗОБРЕТЕНИЯ (i i) 490823

Союз Советский

Сациалистическик

Республик

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ (61) Дополнительное к авт, свпд-ву (22) Заявлено 19.04.73 (21) 1917789/30-15 с присоединением заявки М (23) Приоритет

Опубликовано 05,11.75. Бюллетень ¹ 41 (51) М, Кл. С 12k 5/00

Государственный комитет

Совета Министров СССР ао делам изобретений (53) УДК 615.371 (088.8) Дата опубликования описания 06.02.76 и открытий (72) Авторы изобретения

В. И, Киндяков, С. М. Филиппович, Л. H. Рублев, Ю. К. Третьяков, Л. В. Киндяков и И. Г, Малиновский (71) Заявитель

Казахский научно-исследовательский ветеринарный институт (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ИММУНОГЕННОГО

ЛАПИНИЗИРОВАННОГО ШТАММА ВИРУСА ЯЩУРА

Изобретение относится к ветеринарной вирусологии и биологической промышленности, изготавливающей лапинизированные вакцины против ящура сельскохозяйственных животных.

Известен способ получения лапинизированного вакцинного штамма вируса ящура, заключающийся в том, что афтозный вирус ящура крупного рогатого скота пяти-семикратно последовательно пассажируют на крольчатах.

Однако многократное пассажирование афтозного вируса крупного рогатого скота на крольчатах ведет к значительному отклонению специфичности антигенных, снижению иммуногенных свойств вируса и эффективности вакцины.

С целью повышения иммуногенной активности вируса, по предлагаемому способу афтозный вирус получают длительными переменными пассажами на крупном рогатом скоте и крольчатах, а пассажирование проводят однократно на крольчатах.

Способ осуществляют следующим образом.

Из эпителия стенок невскрывшихся афт с языка, полученных от больного ящуром крупного рогатого скота, готовится 10% -ная суспензия на фосфатно-буферном растворе (рН 7,6), содержащем по 200 ЕД пенициллина и стрептомицина в 1 мл. Суспензию вируса центрифугируют при 5000 об/мин в течение

10 мин. Недостаточную жидкость по 1 мл вводят полкожно в область спины 10 крольчатам двух-трехдневного возраста. Зараженных крольчат, у которых через 24 — 48 час появляются характерные признаки заболевания ящуром, убивают в агональном состоянии, обрабатывают и разделывают. Полученные тушки помещают в стерильные банки и заморажива10 ют при — 20 С.

Вируссолержащий материал от крольчат первого пассажа титруют на двух-трехдневHbIx крольчатах. Титр вируса рассчитывают по методу Рида и Менча и выражают

15 в ЛД;0/ìë.

Лапипизированиый вирус считается пригодным для переменного пассажа на крупном рогатом скоте тогда, когда достигнет титра 10т—

108 ЛДоо/мл.

20 Если вирус пе лостигает указанной вирулентности, то послелний продолжают пассажировать на крольчатах и каждый последующий пассаж вируса титруется как указано выше.

25 В качестве вируссодержащего материала для заражения крупного рогатого скота используют 10%-ную суспензию пз мышечной ткани больных ящуром крольчат последнего пассажа. Суспензшо в лозе 10 мл вводят ин30 традермолингвально в 20 точках тела живот490823

Предмет изобретения

Составитель В. Киндяков

Редактор Н. Скворцова Текред 3. Тараненко Корректор О. Тюрина

Заказ 30/7 Изд. Мв 65 Тираж 529 Подписное

ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий

1 13035, Москва, Ж-35, Раушская паб, д. 4. 5

Типография, пр, Сапунова, 2 ного, которое должно заболеть ящуром в течение 24 — 36 час.

Полученный от крупного рогатого скота афтозный вирус вновь подвергается последовательным пассажем на крольчатах, пока не будет достигнута вирулентность 10 — 10

ЛД5p/ìë. Затем вирус вновь подвергается переменному пассажу на крупном рогатом скоте.

Последовательные на крольчатах и переменные пассажи на крольчатах и крупном рогатом скоте проводят до тех пор, пока афтозный вирус ящура крупного рогатого скота- при первом пассаже в разведении 1: 100 в дозе 1 мл при подкожном введении не вызовет у крольчат явную клиническую картину ящура через

18 — 24 час при титре не ниже 10 ЛДво/мл.

Вирус должен обладать штаммоспецифическими свойствами и иметь титр в РСК не ниже 1:8.

Афтозный вирус ящура, обладающий указанными свойствами, считается как производственный и используется для заражения крольчат, которые являются вируссодержащим материалом для изготовления противоящурной вакцины.

Афтозный вирус хранится при температуре — 20 С.

5 Данный способ обеспечивает получение неограниченного количества приравненного к афтозному дешевого лапинизированного вируса для массового изготовления высокоиммуногенной вакцины против ящура крупного ро10 гатого скота.

Способ получения иммуногенного лапини15 зированного штамма вируса ящура, включающий получение афтозного вируса крупного рогатого скота и пассажирование его на невосприимчивых животных, отличающийся тем, что, с целью повышения иммуногенной

20 активности, афтозный вирус получают длительными переменными пассажами на крупном рогатом скоте и крольчатах, а пассажирование проводят однократно на крольчатах.