Способ получения веществ, обладающих коронарорасширяющим действием

ОП ИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Союз Советских

Социалистических

Республик (») 461 680 (61) Дополнительное к авт. свид-ву (22) Заявлено 15,02.73 (21) 1882646 31-16 с присоединением заявки № (23) Приоритет (43) Опубликовано 05 07.763эюллетень №25 (45) Дата опубликования описания 08.12.76 е.

& 01 н133/16 (51) М. Кл.

Государственный намитет

Совета Министров СССР по делам иэабретений и атнра1тий (53) УДК 612,111..1 (088.8) А. А. Галоян, P. А. Алексанян и М. В. Оганян (72) Авторы изобретения (71) Заявитель (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ВЕШЕСТВ, ОБЛАДАЮШИХ

КОРОНАРОРАСШИРЯ ЮШИМ ДЕЙСТВИЕМ бЯ б1. РФ

Изобретение относится к области медицины, а именно к лекарственным препаратам, Известен способ выделения веществ, расширяющих коронарные сосуды 1тт ч1ЧО из препаратов инсулина путем,пиализа разведен- 5 ного инсулина против 2 н.уксусной кислотьг, лиофилизапии диализата, разделения его хроматографическим или электрофореграфическим способом и отбора фракций cR 0,5 и 0,65.

С целью расширения сырьевой базы для получения вешеств, обладающих коронарорасширяюшим действием, по предлагаемому способу диализу и дальнейшей обработке подвергают сыворотку крови панкреатической вены.

Белки сыворотки крови разделяют низко- l5 вольтным горизонтальным. бумажным электрофорезом в веронал — мединаловом буфере рН 8,6. Изготовляют элюаты белковых фракций в физиологи .еском растворе и вводят их внутривенно кошке с регистрацией объемно- 20 го кровотока сердца. Элюаты фракции а —

-глобулинов через 10-15 мин после внутривенного введения увеличивают количество крови, оттекающей из венозных сосудов серИ ца за единицу времени, на 250% в течение 5

1-2,5 час без заметных изменений артериального давления на протяжении опыта.

Сыворотку ставят на диализ против 2 н. раствора уксусной кислоты при ЗоС на 24. час. За тем прекращаю г пиализ, диализат лиофилизируют. Лиофилизированный диализат сыворотки разделяют гелевой фильтрацией и очищают дополнительно методами нисходящей бумажной хроматографии и высоковольтного бумажного электрофореза, Гелевую фильтрацию проводят наколонке

"Сефадекс &- 10" обычным способом. В качестве элюирующего раствора употребляют 0,067 N фосфатный буфер. Получают разделение диализата на четыре фракции.

При внутривенном введении кошке элюатов четвертого пика (1550-1650 мл элюирующего буфера) получают выраженный эффект расширения коронарных сосудов — количество крови, оттекающей из венозного синуса, увеличивается на 200-250% в течение 2,5 и более часов. Артериальное кровяное давление не подвергается заметным изменениям на всем протяжении опыта.

4-61 680

Составитель С. Щенева

Техред, О. Луговая Корректор l1, Мельниченко

Редактор Т. Блохина

Заказ 4969/220 Тираж 1 029 Подписное

ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по .делам. изобретений и открытий

113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5

Филиал ППП "Патент", г. Ужгород, ул. Проектная, 4

Коронароактивную фракцию лиофилизируют и низкомолекулярные коронароактивные вещества;.. азделяют следующими методами.

Нисходящая бумажная хроматография.

И .пользуют хроматографическую бумагу раство, итель — бута: ол: ксусная кислота:

; вода (4: 1; 5 ) . Полу ают две коронарорасшпр;-.ющие фракции с% 0,5 и 0,65. При внутривенном введении элюаты этих фракций увеличивают коронарный отток на 200- 10

250% в течение 2,5 — 3 час.

Высоковольтный бумажный электрофорез.

Электрофорез проводят в цитратном буфере рН 3, 8 при градиенте напряжения 1 500 В, силе тока 1,2 мА/см и в течение 3,5 час. !5

Для обнаружения биологически активных фракций фореграммы делят на участки шириной по 2 см, элюируют физиологическим раствором и вводят кошкам., Обнаружено на фореграммах четыре коронароактивных пятна (+4 см., +8 см, -2 см., и -6см).

Указанные вещества расширяют коронарные сосуды путем выделения из гипоталамуса в кровь двух коронарорасширяющих веществ, обнаруженных ранее А. Галояном.

Формула и зоб ретения

Способ получения веществ, обладанщих коронарорасширяющим действием. 1п vi vo путем диализа сырья против слабой органи ческой кислоты, например 2 н. уксусной, лиофилизации диализата, электрофоретическо-. о и хроматографического разделения его и отбора активных фракций, о т л и ч а ю щи йс я тем, что, с целью расширения сырьевой базы, диализу и дальнейшей обработке подвергают сыворотку крови панкреатической вены.