Способ определения диссоциации крови и оксигемоглобина
& ! &,Л
I г
ОП ИСАНИ Е
ИЗОБРЕТЕН ИЯ
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ
Союз Советских
Социалистических
Республик (11) 44242К (61) Зависимое от авт. свидетельства— (22) Заявлено20.09 . 72 (21)1829859/И-К6 (51) М. Кл.
&&. ОХ 33/тв с присоединением заявкиГосударственный номнтет
Соввтв Министров СССР по делам изооретеннй н открытий (32) Приоритет
Опубликовано 05.09.74 Бюллетень Мо 33 (53) УДК 672.XX Х2 (088.8) Дата опубликования описания 15 ° 12. 74 (72) Автор изобретения
Ф.Ф.Сопрунов
Ордена Трудового Красного Знамени институт медицинской паразитологии и тропической медицины им.
Е.И.Марциновского (71) Заявитель (S4l СПОСОБ ОШАМИ?ЕНЙТ ДИССОЦИАЦИИ КРОЕИ И
ОКО ИГЕЮГЛОБИНА
Изобретение относится к ойасти медицины.
Известей способ получения кривой диссоциации крови, заключающийся в том, что .задают определенное парциальное давление кислорода в ячейке и определяют насыщение гемоглобина кислородом, при этом рО> меняют линейно а информацию о молекулярных свойствах ip гемоглобина получают по форме сигмовидной кривой насыщения.
Целью изобретения является обеспечение быстрой записи и расчета кривых оксигенации с опреде- 15 лением активного выброса кислорода эритроцитами при диагностике гипоксических состояний и анемий, связанных с дефицитом гемоглобина.
Это достигается твм, что ли- о нвйно изменяют суммарное содержание кислорода в ячейке, линейно изменяют насыщение гемоглобина кис лородом а информацию о молекулярных свойствах гемоглобина получают 5 по сиг;ювидной форме изменения сво
2 бодного кислорода.
На фиг.I изображен график сов мещения трех повторных записей кри. вой диссоциации одного раствора оксигемоглобина человека (при непрерывной подаче раствора гидросульфита. 02р — растворенный 02 в ячейке); на фиг. 2 - график полярографической записи кривой диссоциации оксигемоглобина человека, на фиг.3 — график записи кинетики перехода системы гемоглобин — 02 от одного состояния равновесия к другому.
Кривую диссоциации крови и оксигемоглобина получают следующими способами.
Пример I. Раствор оксигвмоглобина человека получают путем гемолиза эритроц,.лов, трижды щнмытых физиологическим растворой (эритроцитарныв оболочки удаляют центрифугированивм при 7000@ в течение 50 мин.). Приготовляют раствор, содержащий 4,226 r гемоглобина в
?000 ил Физиологического раствора
44242I
3 4 с трио-И 1 Суаерои (0,005й; рН-7,Чт) иип крови кислородои, аппаратура,, уетгвмоглобин восстанавливают, раствор гилросульфита для титровав гемоглобин добавлением 2-3 ка- ния тв же что в йримерв I. Объем пель раствора гидросульфита натрия ячв"к" 5 мл; T 23oC, нaпряzенив в трио-буфере (РН-7,2), Снимают ти- 5 0,6; чувствительность. l/28; уаипичныв спектры двзоксигемоглобина ление 4.Х0-1 А). Раствор гидрои оксигемоглобина после насыщения .сУльФ ита подают дискретными порцираствора кислородом воздуха в те- ями по 0,1 мкл через микрометричение EQ мин при непрерывном встря- чвское устройство. длительность пвании в колбе Эпленмейвпа (Т вЂ” о т11трования 2 мин 40.свк.
Пример 3. Запись кинетики нерехода системы от одного состояния
Титрование в замкнутой ячейке на равновесия к другому. Кровь ктоли3 мл с вцонтированным электродом ка. свежевзятая из ной вены сравнения, с вращающимся пластино- ы, разбавлена 1/2 физиологическим равым электродом и комбинированным .створом, Т.26о g,(:òðåëêoä ( микроэлементом. Титрованив паст- ) м
3), отмечвнО: шведе.ни,.в 2 MKlI раот вОввс/объем . в трио-НСЮ b (L0$ . пи вв,/объв.м . Р„твор ...Овя, перед ю 2писца х 5 по сраьнению с пр"м Ррм титрованием беа доступа воздуха на воде, продттой чистым азотом (РН раствора 7,42). Раствор гидро . Л " ® РЕТ сульфита подают в ячейку автобю- Способ определения. дисооциа.— рвткой АДИ-I2 .со скоростью Х,25 5 ции крови и оксигеиоглобина путем млк/св.к.яолярограммы записанй на, создания парциального давлвния кис. полярографв Р-60 (три- повторлых лорода и насыщения гемоглобина кис. записи титровв.н я одного раствора -,лородом, отличающийся тем, что, с оксигвмоглобина тем жв растм м целью определения активного выбросе гидросульфита). длительность каж- кислоРода эРитроцитами при диагносдого титрования С,5 мин. Колба- о тике гипоксичвских состояний и:аненив рН в процвсре титрования:0,01. мий связных с дефицитом гемоглс=
На фиг.I показано совпадение пов- бинами линейно измейявт насыщение торно записываемых кривых диссо- гемоглобина кисло дом, а о. моле. циации.:ку лярных свойствах гемогло.бина суПример 2. Запись кривой (см. М ;дят по сигмовидной форме изменения
° ° ° ° ° иг.2) диссоциации крови человек свободноГо кислорода на кривой диадонора). 5 мл крови и 2,8 мл рао- „социацни. твора А(аС1 (0,9). Условйя насище.-!
ЭВ
44242I с
«л с сос ввнтеввб Ящвщща
Редактбр Т. КИРЭЮ)щтехред НеСщщ щ Корректоры: Pi IQg) eg838
Заказ Д Я Иад. v 7Е4 тираж 65Е
Подписное
ЦНИИПИ Гасударственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений н открытий
Москва, il3035, Раушская наб., 4
Предприятие «Патент»; Москва, Г59, Бережковская наб., 24
